生物测定

㈠ 细胞水平及分子水平的生物测定是怎样的

传统的生物测定方法虽然所得数据较为可靠，但是往往所需要的时间较多，且供试药剂的需求量较大，现在新农药的筛选，供试化合物动辄几万个甚至更多，传统的方法根本无法满足数量巨大的筛选要求。基于以上原因，近年来，许多新的生物测定方法层出不穷。

（1）预期作用靶标抑制活性的测定。随着农药作用于昆虫的靶标部位、昆虫体内农药的代谢解毒机制渐渐为人们认知，通过检测供试药物对靶标或代谢物质的作用，可以简化生物筛选测定的步骤与时间，这也是生物合理设计农药的重要思路。

（2）MTT法。MTT（methylthiazoletrazolium）是一种黄色水溶性四噻唑蓝，活细胞中的琥珀酸脱氢酶可使MTT分解产生紫色结晶状颗粒积于细胞内和细胞周围。其量与细胞数呈正比，也与细胞活力呈正比，但是死细胞不具有这个能力。因此，用一定浓度的药剂处理指数生长期的细胞后一段时间，加入MTT，再测出所有混合液体的吸光值，可推出细胞的活力，衡量供试药剂的毒力大小。

一般步骤是首先培养昆虫细胞系，如棉铃虫细胞系、烟草夜蛾细胞系，取对数生长期细胞，置96孔微量滴定板中培养一定时间（使细胞贴壁），然后加入待测化合物，并继续培养24h，结束培养前一定时间，向孔内加入MTT母液，培养结束后弃去上清液，再向孔内加入一定溶剂，待生成物完全溶解后，置酶联检测仪上于570nm处读取吸光度值，通过细胞死亡率高低初步判断化合物有无活性，还可设置系列样品浓度，最终求出LD50/LC50值，以判断活性大小。

MTT法需要专门的无菌操作台及相配套的细胞培养设备，成本较高。但是，此法对药剂所需要的剂量少，能很好的满足现在高通量筛选等筛选技术的要求。

（3）生物传感器。生物传感器是一种以生物的部分活性物质作为敏感部件，结合物理化学分析仪器，对特定种类化学物质或生物活性物质具有选择性和可反应的分析装置。其中关键技术原理是传感器的生物敏感层与复杂样品中特定的目标分析物之间（如酶与底物、抗体与抗原、外源凝集素与糖、核酸与互补片段之间）的识别反应会产生一些物理化学信号（如光热、声音、颜色、电化学）的变化，这些变化通过不同原理的转换器（如光敏管压电装置、光极光敏电阻、离子选择性电极等）转换成第二信号（通常为电信号），经放大后显示或记录。

生物传感器按照识别元件可分为三类：基于分子（酶、抗原或抗体、受体、核酸、脂质体等）的传感器、基于细胞的传感器和基于组织切片的传感器。就敏感元件而言，前者是固定化的生物体成分，后两者是生物体本身。基于分子的生物传感器具有高度选择性和敏感性，只对一靶分子有响应。正因为这种高度选择性，可能会使某些具有相同功能的相关分子检测不到。而将活细胞作为探测单元，可以检测到许多未知的物质。目前生物传感器主要用于环境监测（生化武器、地下水污染等）、药物筛选、新药开发和基础神经学等研究，在农药领域的应用正在起步。

例如测定昆虫电生理反应。其原理是昆虫产生拒食行为与药剂刺激昆虫的味觉感受器如中栓锥感受器有一定的相关性，用供试药液刺激昆虫的中栓锥感受器，同时，将电极连接该感受器，通过电子设备接受并放大感受器发出的脉冲信号，用示波器或记录器记录这些信号，或直接输入电脑通过特定的处理软件对信号进行分析，判断活性的有无或大小。华南农业大学曾就炔类化合物和川楝素对亚洲玉米螟拒食活性与电生理反应做了相关的研究工作。

（4）生物芯片。生物芯片（biochip）技术，采用光导原位合成或微量点样等方法，将大量生物大分子，如核酸片段、多肽分子甚至组织切片、细胞等生物样品有序地固化于支持物（如玻片、硅片、聚丙烯酰胺凝胶、尼龙膜等载体）的表面，组成密集二维分子排列，然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交，通过特定的仪器，如激光共聚焦扫描或电荷耦联摄影像机（CCD）对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析，从而判断样品中靶分子数量。

目前，生物芯片包括基因芯片、蛋白质芯片、组织芯片等。在已知的防治昆虫靶标中，可以将多种害虫的细胞、作用靶标或核酸片断同时制作在同一生物芯片上，以供药物的筛选。芯片技术具有高通量、大规模、平行性等特点，可以进行新药的筛选，也可采用生物芯片技术来寻找潜在药物靶标。用芯片做大规模的筛选研究可以省略大量的动物试验，缩短药物筛选所用时间。

㈡ 生物测定学阅读器的基本问题是什么

农药室内生物测定需要定量喷雾塔等喷雾设备；吸管、天平等量取、称量设备；生物培养箱、智能温室等培养设备。
农药生物测定是指用活体生物对农药的毒效、毒性进行的测定评价，是测定药剂有无生物活性的基本方法，包括利用标准供试生物对农药有效成分含量的测定；农药在室内外对病虫草药的测定；农药在动、植物体内残留量的测定，对病虫草抗药性的测定。
农药生物测定与室内毒力测定一般没有严格区别，多半是指在室内进行的测定。

㈢ 常用的测定做生物生长的方法有哪几种

常用测定微生物生长的方法有：

1)称干重法.可用离心法或过滤法测定.优点：可适用于一切微生物,缺点：无法区别死菌和活菌.
2)比浊法.原理：由于微生物在液体培养时,原生质的增加导致混浊度的增加,可用分光光度计测定.优点：比较准确.
3)测含氮量,大多数微生物的含氮量占干重的比例较一致,根据含氮量再乘以6.25即可测得其粗蛋白的含量.
4)血球计数板法.优点：简便、快速、直观.缺点：结果包括死菌和活菌.
5)液体稀释法.对未知菌样作连续的10倍系列稀释,经培养后,记录每个稀释度出现生长的试管数,然后查MPN表,再根据样品的稀释倍数就可计算其中的活菌含量.优点：可计算活菌数,较准确.缺点：比较繁琐.
6)平板菌落计数法.取一定体积的稀释菌液涂布在合适的固体培养基,经培养后计算原菌液的含菌数.优点,可以获得活菌的信息.缺点：操作繁琐,需要培养一定时间才能获得,测定结果受多种因素的影响.

㈣ 生物监测的含义

农业环境学上： 生物监测是指利用生物对环境中污染物质的反应，即在各种污染环境下所发出的各种信息，来判断环境污染状况的一种手段，对污染物敏感的生物种类，都可以作为监测生物。
又称“生物测定”。利用生物对环境中污染的物质的敏感性反应来判断环境污染的一种手段。用来补充物理、化学分析方法的不足。如利用敏感植物监测大气污染；应用指示生物群落结构、生物测试及残毒测定等方法，反映水体受污染的情况。 基本信息
生物监测方法的建立是以环境生物学理论为基础的。根据监测生物系统的结构水平、监测指示及分析技术等，可以将生物监测的基本方法大致分为四大类，即生态学方法、生理学方法、毒理学方法及生物化学成分分析法。
这里说用的生物主要包括：海藻、水蚤、斑马鱼、豆芽等等，操作起来比较繁琐，实验周期较长，无法现场快速检测和在线长期监测，目前另外一种生物：发光细菌倍受用户的青睐，所用设备分别有实验室用、便携式、在线式，其中进口设备居多如美国、以色列、德国、荷兰，价格昂贵，尤其是菌种的后期采购时间周期长，且菌种易失活；国产设备有中科院南京土壤所、上海上立、北京滨松光子，价格低廉，售后服务快捷，其中北京滨松公司设备灵敏度可以与美国设备相媲美，希望能增加研发力度，为国产设备增添影响力

㈤ 生物学效价的测定方法

（一）生物试验法，这是一种以仔鸡为试验对象，以某一磷酸盐为参照物，用斜率比法测定磷酸盐RBV的方法，已被广泛使用。同一磷源的RBV测值常常是各不相同的，造成这一现象的原因之一是试验条件存有差异。对其测定方法加以比较后可知，基础日粮、饲养方式、试验期、试验动物和评定指标等都会影响测值。
（二）同位素示踪法，同位素32P示踪法试验周期更短，一般不需要2~4周时间，但耗资更大，对小动物试验来说不太经济，而且用同位素世踪测定矿物元素的表观消化率意义不大，因为粪中排出的矿物质既混有未吸收的，也有内源性的。

㈥ 什么是生物鉴定法

生物鉴定法是利用某些生物对某些物质(如维生素、氨基酸)的特殊需要，回或对某些物质(如激素、植答物激素、抗生素、药物等)的特殊反应来定性、定量测定这些物质的方法。如用小鼠的惊厥反应测定胰岛素，用微生物测定维生素B12等。生物测定有时比其他测定方法更为灵敏和专一。它是生物学、医学、特别是毒理学的重要内容和基础。

㈦ 生物测定试验设计的基本原则有哪些

研究农药与生物的相关性，对农药及生物的要求是比较严格的。例如，室内的筛选或毒力测定，药品应该是纯品，至少要有确切的有效成分含量。而供试生物应该是纯种，个体差异小，生理标准较为均一的。同时，还必须以确定的环境条件为前提。故试验设计应该掌握以下原则：1．相对的控制环境条件

室内应该尽量保持与田间环境条件的一致性。因为环境条件的差异，尤其是本身环境条件的恶劣就极有可能会使供试生物体死亡。测定农药的毒力，原则上要求只有两个变数，一个是药剂的剂量或浓度作为自变数，另一个是死亡率或抑制率作应变数。药剂与生物的反应，一般是正相关，这样所得的结果，容易重复和分析。但环境条件，主要是温、湿度对农药及生物都有直接或间接的影响，因此，生物测定的试验条件，首先要求相对的控制环境条件，使影响因素力求稳定。室内尚可采用特定的恒温、恒湿设备来控制，同时，使用精密的测试仪器及严格的测试方法，而且供试虫种或菌种也用室内饲养标准化的纯种，这样尽可能消除或减少处理之间因条件或人为因素造成的差异，以提高试验的精确度。田间试验，除温、湿度外，光照、风雨等多因子变异因素使许多条件不能控制，但小区试验，也应尽量力求所选地区土壤肥力、病虫害分布、作物长势及管理水平等条件均匀相似，以减少试验误差为准则。

2．必须设立对照

在生物测定试验中，对照是十分重要的。因昆虫在试验期间往往有自然死亡的情况，故应设立对照加以校正。对照有3种：①空白对照：是不做任何处理的对照。②不含药剂对照：与药剂处理所用溶剂或乳化剂完全一样，只是不含药剂。③标准药剂对照：用标准药剂作对照。标准药剂是选择同类化合物已对某种病虫害确定是有效的药剂，它不仅可以与新品种对比，也可以消除一些偶然因素影响的误差。这3种对照，并不一定在每次试验中都设立，应根据具体情况和测定要求加以确定。

3．处理必须设重复

毒力的测试对象是群体，一个生物体个体之间对药剂的耐药性是有差异的，取样应具有代表性，每个处理要求一定的数量，重复的次数越多，结果越可靠。增加重复是减少误差的一种方法，但也不能过多，应根据不同的供试材料，各自的试验目的和要求而定。一般至少重复3次。

4．运用生物统计分析试验结果

统计方法是生物测定的基本技术，是判断和评价试验结果的工具之一。它是应用数学逻辑来解释生物界各种数量的资料，将其化繁为简，找出规律。统计学的处理，是分析结果中极重要的一环，可以从错综复杂的试验数据中，揭示农药与病虫害之间的内在联系，因此应该正确运用，以避免轻率下结论。

㈧ 测定微生物的生物量有哪些主要方法

圣才学习网为您解答：
1.直接计数测定 根据微生物种类,有血球计数板和细菌计数板；或者用电子计数器计数
2.比浊法 根据菌悬液的浓度在一定范围内与光密度成正比,可以用分光光度计测OD值,用OD值表示样品菌液浓度
3.核酸计数法 荧光定量PCR技术
4.活菌计数法 MPN和平板计数法
由于测定方法的限制,前几种计数结果不太准确,目前应用广泛的是第四种
对粪大肠菌群和光合细菌可用MPN,对其他微生物可用平板计数法

㈨ QC生物测定

又称生物检(鉴)定。利用某些生物对某些物质（如、）的特殊需要，或对某些物质（如、、抗生素、药物等）的特殊反应来定性、定量测定这些物质的方法。如用小鼠的惊厥反应测定，用微生物测定维生素B等。生物测定有时比其他测定方法更为灵敏和专一。它是生物学、医学、特别是毒理学的重要内容和基础。

㈩ 什么是农药的生物测定

农药的生物测定是指利用生物（动物、植物、微生物等）的整体或离体内的组织、细胞以及细容胞中的活性物质（如靶标酶、细胞膜等）对某些化合物的反应，如死亡率、抑制率等，作为评价他们生物活性的量度，运用特定的实验设计，以生物统计为工具，测定供试对象在一定条件下的效应。

生物测定可以为新农药的研制与开发提供科学的理论数据。在新农药创制的初期，生物测定能够对供试化合物的生物活性做出准确的分析，为先导化合物构效关系提供定量的活性资料，也可为待开发化合物的商品化评价提供依据。通过农药的生物测定，对得出的试验结果进行统计分析，得出科学的结论，并以此指导生产，以期达到科学合理的使用农药的目的。对作物危害最多的有害生物主要为害虫、病原物与杂草，因此生物测定也主要围绕针对防治这些有害生物的杀虫剂、杀菌剂和除草剂进行探讨。

生物测定在农药研究和植物化学保护应用中主要涉及的内容和范围：①活性筛选的常规测定；②农药残留的微量生物分析；③抗性毒力测定；④药害毒性测定。