微生物学实验

① 灭菌在微生物学实验操作中有何重要意义

灭菌是通过物理或化学的方法杀死全部细菌，在食品生产中都要灭菌，你问微生物实验我就只说微生物实验，做微生物实验一般都要培养基，培养基都是要灭菌后使用的，灭菌的目的是为了杀死其他微生物，防止污染你要培养的菌种，特别是在实际生产中，如乳酸发酵，如果染菌，整批产品都作废，对一个工程来说那损失是很大的，只要是生物培养，都要严格的除菌，灭菌，防止染菌，所以灭菌的意义是及其重要的，在科研工作中，如果染菌，实验就会失败。

② 无菌操作技术在微生物学实验中有何意义在接种细菌时应如何注意无菌操作

无菌是指在环境中一切有生命活动的微生物的营养细胞及其芽孢或孢子都不存在的状态。在微生物实验中， 操作的目的在于防止待接种细菌被杂菌污染。只有在培养基、实验器皿等处于无菌的前提下，才能保证菌种不被污染。
接种细菌时，应注意以下几项：
（1）在超净工作台上操作，工作台在使用前要紫外消毒，酒精消毒等
（2）应在酒精灯火焰前操作
（3) 取菌种前灼烧接种针或接种环（要烧红）
（4）烧红的接种针（环）稍事冷却再取菌种，以免烧死菌种
（5）接种后应尽快塞上棉塞
总之，一句话，尽可能防止杂菌污染！！！！

③ 微生物学实验复习题，请会的回答一下！谢谢

1、简单地说，调制相同浓度的菌液，加入到相同量的可溶性淀粉溶液回中，过一段生长、反应时间答后加入碘液，观察变色情况。显然产淀粉酶能力高的细菌水解淀粉酶最多最快。

2、甲基红试验呈强阳性，葡萄糖发酵试验必为阳性，甲基红试验：细菌在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至pH4.5以下，使甲基红指示剂变红，这时候为甲基红试验阳性。而VP试验此时一定为阴性，因为分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V－P（+）反应。所以甲基红试验和VP试验的结果往往是相反的。

④ 微生物学实验设计

没有什么时间，我简单解释一下，语言你可以自己组织，意思对了丰富一下以下内容就可以了哈：
1、取材。指材料选择，微生物分离一般来源是自然界的土壤及其他生物体内。你最好选择在常年高温的环境中采样。譬如火山口，热泉口，常年高温的戈壁沙漠土壤等。
2、分离。指分离野生菌株。在实验室，分离微生物的传统途径是选择合适的培养基选择性分离土壤中的微生物，这个题目的要求说明实验中需要在高温条件培养，最好选用多种培养基，以便于分离到种类较多的各类微生物。相关实验技术请自行查阅书籍。
3、纯化。微生物分离过程中重要一步，目的是需要得到菌株的纯培养，即多次纯化过程中需挑取单菌落接种扩培，同时可以起到活化菌株生命力的作用。当然此过程中合适的培养基相当重要。否则菌株可能反而退化失活。
4、筛选。获得适合高温生长的菌株库之后，依据要求筛选菌株。即指提供单因子培养条件筛选，譬如选择能产高温蛋白酶的，需要在培养基中单一添加高级蛋白（即未降解过的或未胨化过的）作为氮源，以葡萄糖或其他易利用糖类作单一碳源。又如选择产高温淀粉酶的，以淀粉作为单一碳源，补充其他无碳利用的氮源。能在选择条件下生长的为目的菌株。
5、确证。得到目的菌株后即可通过相应的酶提取方法确证。提取总酶在高温条件下进行体外蛋白消化或者淀粉消化实验来确证。

⑤ 灭菌在微生物学实验操作中有何重要意义

防止培养基被污染；防止杂菌影响实验结果；现在的实验一般都是控制变量法，所以一旦有杂菌进入，实验就宣告失败了。可以说灭菌是几乎一切微生物实验的基础，没有灭菌，剩下就不用做了。

⑥ 微生物学检查主要包括哪三样

微生物学检查的方法

临床微生物学实验室接到标本后应立即进行微生物学检验。主要包括直接镜检、检测特异性抗原或病原体成分、进行分离培养和鉴定、体外药敏试验等。

（一）直接镜检

标本经涂片染色或制备湿片镜检，有些标本如尿液、脑脊液等经过离心浓缩后镜检出其初步结果对有些病人标本有诊断参考价值。直接镜检对于确定进一步检出步骤及鉴定方法也很有帮助。另外，直接镜检还可评价标本是否符合检验要求。

（二）快速诊断

快速检测病原体成分主要是指特异性抗原和核酸检测。特异性抗原检测包括免疫荧光技术、胶乳凝集试验、酶免疫技术、对流免疫电泳、化学发光免疫测定等。核酸检测包括核酸探针杂交、PCR技术。其他快速检测法还有气-液相色谱法、化学发光、生物发光测定法和基因或蛋白微型阵列芯片技术等。

（三）直接药敏试验

直接药敏试验即在分离培养病原体的同时，直接将临床标本接种于平板，用抗生素纸片作药物敏感性试验，在18～24h内可获得结果。但因其在试验时接种量难以标准化，且对混有杂菌和混合感染的标本不易明确其结果，故分离出纯培养物后应再作体外药物敏感试验。

（四）常规检验

1.分离培养：通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5％～10％CO2的气缸中培养，大部分细菌可于24～48h生长良好。若原始培养为阴性，但据镜检结果和临床信息提示可能有病原菌存在，则应再采集大量标本，离心浓缩或溶解离心法处理，取沉淀接种营养丰富的需氧或厌氧培养基来培养。

对于存在正常菌群部位采集的标本，分离时应采用选择培养基以利于病原菌生长，也可加某些抗生素抑制污染菌的生长。对于某些感染标本中发现的细菌，如尿路感染的尿液中检出大肠埃希菌，可能是病原菌，也可能是污染菌或正常菌群，其临床意义的确定有赖于定量培养法。即取一定量的标本如液体标本用液体培养基作一系列稀释；组织标本称量后制成悬液，并稀释成l0-1，10-2，10-3等，分别取0.1ml涂布于血琼脂平板或倾注培养，35℃24h后计算每克标本所含细菌数。

2.鉴定：分离出的细菌一般应经过细菌形态、菌落特点、生化反应、血清学试验、动物接种等鉴定。目前尚有某些微量鉴定系统，其鉴定快速、简便，值得推广。如用于鉴定肠杆菌科的20E，鉴定非发酵菌的20NE及鉴定厌氧菌的20A等。

3.体外纯菌药物敏感性试验：常用方法包括抑菌试验、杀菌试验、联合药敏试验和检测细菌产生的抗生素灭活酶等。

（五）报告

直接镜检要求2h报告，说明标本是否合格，发现微生物情况和特点；初步鉴定和直接药敏结果于24h或次晨报告，报告可能的病原菌和直接药敏结果；最后鉴定和细菌药敏结果一般不超过3天，还规定除血培养外，所有送检标本必须在24h内预报。

⑦ 微生物学实验应注意什么

无菌操作很重要 不论是培养基灭菌 接种环消毒 到试管 等等都应该注意无菌操作。

⑧ 微生物学实验的内容简介

全书分为上、下两篇，共74个实验。上篇为基本技能部分，编写了39个典型的微生物基本操作技能实验，内容包括光学显微镜和显微技术、细菌染色技术、培养基制备技术、灭菌除菌技术、接种与分离培养技术、生长繁殖测定技术、微生物形态特征观察和描述、噬菌体检测技术、菌种保藏技术和分类鉴定技术；下篇为专业技能部分，根据微生物学和微生物学实验技术在工业、医药、环保和食品等领域中的应用，编写了工业微生物、制药微生物、环境微生物和食品微生物方向共35个应用微生物学实验，以满足不同专业方向学生选择专业实验的需要。与目前其他同类教材相比而言，《微生物学实验》具有实验内容安排组织系统、科学，选编的实验更加实用、可操作性强、指导性更强的特点。另外为了增加直观性，改变了以往教材的手绘图片，书中基本上采用拍摄的真实图片，以增加直观教学效果。
《微生物学实验》适合于作为各类院校生物工程、生物技术、制药工程、药物制剂、环境科学、食品科学与工程、发酵等专业的微生物学实验教材，也可用作综合性大学、师范院校等微生物学实验教学主要参考书以及从事与微生物学相关研究的科技人员或研究生的参考书。