微生物學實驗
① 滅菌在微生物學實驗操作中有何重要意義
滅菌是通過物理或化學的方法殺死全部細菌,在食品生產中都要滅菌,你問微生物實驗我就只說微生物實驗,做微生物實驗一般都要培養基,培養基都是要滅菌後使用的,滅菌的目的是為了殺死其他微生物,防止污染你要培養的菌種,特別是在實際生產中,如乳酸發酵,如果染菌,整批產品都作廢,對一個工程來說那損失是很大的,只要是生物培養,都要嚴格的除菌,滅菌,防止染菌,所以滅菌的意義是及其重要的,在科研工作中,如果染菌,實驗就會失敗。
② 無菌操作技術在微生物學實驗中有何意義在接種細菌時應如何注意無菌操作
無菌是指在環境中一切有生命活動的微生物的營養細胞及其芽孢或孢子都不存在的狀態。在微生物實驗中, 操作的目的在於防止待接種細菌被雜菌污染。只有在培養基、實驗器皿等處於無菌的前提下,才能保證菌種不被污染。
接種細菌時,應注意以下幾項:
(1)在超凈工作台上操作,工作台在使用前要紫外消毒,酒精消毒等
(2)應在酒精燈火焰前操作
(3) 取菌種前灼燒接種針或接種環(要燒紅)
(4)燒紅的接種針(環)稍事冷卻再取菌種,以免燒死菌種
(5)接種後應盡快塞上棉塞
總之,一句話,盡可能防止雜菌污染!!!!
③ 微生物學實驗復習題,請會的回答一下!謝謝
1、簡單地說,調制相同濃度的菌液,加入到相同量的可溶性澱粉溶液回中,過一段生長、反應時間答後加入碘液,觀察變色情況。顯然產澱粉酶能力高的細菌水解澱粉酶最多最快。
2、甲基紅試驗呈強陽性,葡萄糖發酵試驗必為陽性,甲基紅試驗:細菌在分解葡萄糖過程中產生丙酮酸,進一步分解中,由於糖代謝的途徑不同,可產生乳酸,琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性產物,可使培養基PH值下降至pH4.5以下,使甲基紅指示劑變紅,這時候為甲基紅試驗陽性。而VP試驗此時一定為陰性,因為分解葡萄糖產生丙酮酸,丙酮酸縮合,脫羧成乙醯甲基甲醇,後者在強鹼環境下,被空氣中氧氧化為二乙醯,二乙醯與蛋白腖中的胍基生成紅色化合物,稱V-P(+)反應。所以甲基紅試驗和VP試驗的結果往往是相反的。
④ 微生物學實驗設計
沒有什麼時間,我簡單解釋一下,語言你可以自己組織,意思對了豐富一下以下內容就可以了哈:
1、取材。指材料選擇,微生物分離一般來源是自然界的土壤及其他生物體內。你最好選擇在常年高溫的環境中采樣。譬如火山口,熱泉口,常年高溫的戈壁沙漠土壤等。
2、分離。指分離野生菌株。在實驗室,分離微生物的傳統途徑是選擇合適的培養基選擇性分離土壤中的微生物,這個題目的要求說明實驗中需要在高溫條件培養,最好選用多種培養基,以便於分離到種類較多的各類微生物。相關實驗技術請自行查閱書籍。
3、純化。微生物分離過程中重要一步,目的是需要得到菌株的純培養,即多次純化過程中需挑取單菌落接種擴培,同時可以起到活化菌株生命力的作用。當然此過程中合適的培養基相當重要。否則菌株可能反而退化失活。
4、篩選。獲得適合高溫生長的菌株庫之後,依據要求篩選菌株。即指提供單因子培養條件篩選,譬如選擇能產高溫蛋白酶的,需要在培養基中單一添加高級蛋白(即未降解過的或未腖化過的)作為氮源,以葡萄糖或其他易利用糖類作單一碳源。又如選擇產高溫澱粉酶的,以澱粉作為單一碳源,補充其他無碳利用的氮源。能在選擇條件下生長的為目的菌株。
5、確證。得到目的菌株後即可通過相應的酶提取方法確證。提取總酶在高溫條件下進行體外蛋白消化或者澱粉消化實驗來確證。
⑤ 滅菌在微生物學實驗操作中有何重要意義
防止培養基被污染;防止雜菌影響實驗結果;現在的實驗一般都是控制變數法,所以一旦有雜菌進入,實驗就宣告失敗了。可以說滅菌是幾乎一切微生物實驗的基礎,沒有滅菌,剩下就不用做了。
⑥ 微生物學檢查主要包括哪三樣
微生物學檢查的方法
臨床微生物學實驗室接到標本後應立即進行微生物學檢驗。主要包括直接鏡檢、檢測特異性抗原或病原體成分、進行分離培養和鑒定、體外葯敏試驗等。
(一)直接鏡檢
標本經塗片染色或制備濕片鏡檢,有些標本如尿液、腦脊液等經過離心濃縮後鏡檢出其初步結果對有些病人標本有診斷參考價值。直接鏡檢對於確定進一步檢出步驟及鑒定方法也很有幫助。另外,直接鏡檢還可評價標本是否符合檢驗要求。
(二)快速診斷
快速檢測病原體成分主要是指特異性抗原和核酸檢測。特異性抗原檢測包括免疫熒光技術、膠乳凝集試驗、酶免疫技術、對流免疫電泳、化學發光免疫測定等。核酸檢測包括核酸探針雜交、PCR技術。其他快速檢測法還有氣-液相色譜法、化學發光、生物發光測定法和基因或蛋白微型陣列晶元技術等。
(三)直接葯敏試驗
直接葯敏試驗即在分離培養病原體的同時,直接將臨床標本接種於平板,用抗生素紙片作葯物敏感性試驗,在18~24h內可獲得結果。但因其在試驗時接種量難以標准化,且對混有雜菌和混合感染的標本不易明確其結果,故分離出純培養物後應再作體外葯物敏感試驗。
(四)常規檢驗
1.分離培養:通常由正常無菌部位採取的標本接種血平板,置於空氣或含5%~10%CO2的氣缸中培養,大部分細菌可於24~48h生長良好。若原始培養為陰性,但據鏡檢結果和臨床信息提示可能有病原菌存在,則應再採集大量標本,離心濃縮或溶解離心法處理,取沉澱接種營養豐富的需氧或厭氧培養基來培養。
對於存在正常菌群部位採集的標本,分離時應採用選擇培養基以利於病原菌生長,也可加某些抗生素抑制污染菌的生長。對於某些感染標本中發現的細菌,如尿路感染的尿液中檢出大腸埃希菌,可能是病原菌,也可能是污染菌或正常菌群,其臨床意義的確定有賴於定量培養法。即取一定量的標本如液體標本用液體培養基作一系列稀釋;組織標本稱量後製成懸液,並稀釋成l0-1,10-2,10-3等,分別取0.1ml塗布於血瓊脂平板或傾注培養,35℃24h後計算每克標本所含細菌數。
2.鑒定:分離出的細菌一般應經過細菌形態、菌落特點、生化反應、血清學試驗、動物接種等鑒定。目前尚有某些微量鑒定系統,其鑒定快速、簡便,值得推廣。如用於鑒定腸桿菌科的20E,鑒定非發酵菌的20NE及鑒定厭氧菌的20A等。
3.體外純菌葯物敏感性試驗:常用方法包括抑菌試驗、殺菌試驗、聯合葯敏試驗和檢測細菌產生的抗生素滅活酶等。
(五)報告
直接鏡檢要求2h報告,說明標本是否合格,發現微生物情況和特點;初步鑒定和直接葯敏結果於24h或次晨報告,報告可能的病原菌和直接葯敏結果;最後鑒定和細菌葯敏結果一般不超過3天,還規定除血培養外,所有送檢標本必須在24h內預報。
⑦ 微生物學實驗應注意什麼
無菌操作很重要 不論是培養基滅菌 接種環消毒 到試管 等等都應該注意無菌操作。
⑧ 微生物學實驗的內容簡介
全書分為上、下兩篇,共74個實驗。上篇為基本技能部分,編寫了39個典型的微生物基本操作技能實驗,內容包括光學顯微鏡和顯微技術、細菌染色技術、培養基制備技術、滅菌除菌技術、接種與分離培養技術、生長繁殖測定技術、微生物形態特徵觀察和描述、噬菌體檢測技術、菌種保藏技術和分類鑒定技術;下篇為專業技能部分,根據微生物學和微生物學實驗技術在工業、醫葯、環保和食品等領域中的應用,編寫了工業微生物、制葯微生物、環境微生物和食品微生物方向共35個應用微生物學實驗,以滿足不同專業方向學生選擇專業實驗的需要。與目前其他同類教材相比而言,《微生物學實驗》具有實驗內容安排組織系統、科學,選編的實驗更加實用、可操作性強、指導性更強的特點。另外為了增加直觀性,改變了以往教材的手繪圖片,書中基本上採用拍攝的真實圖片,以增加直觀教學效果。
《微生物學實驗》適合於作為各類院校生物工程、生物技術、制葯工程、葯物制劑、環境科學、食品科學與工程、發酵等專業的微生物學實驗教材,也可用作綜合性大學、師范院校等微生物學實驗教學主要參考書以及從事與微生物學相關研究的科技人員或研究生的參考書。