免疫熒光化學
⑴ 細胞鑒定是免疫熒光還是免疫組化
免疫組化和免疫熒光都是蛋白定位的檢測(也就是確定蛋白是表達在細胞核/漿/膜)。
免疫組織化學又稱免疫細胞化學,是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起來,藉助顯微鏡的現像和放大作用,在細胞,亞細胞水平檢測各種抗原物質,並可在原位顯示相應的基因和基因表達產物。免疫組織化學技術現已有:免疫熒光組織(細胞)化學技術、免疫酶組織(細胞)化學技術、親和組織化學技術、免疫金銀及鐵標記免疫組織化學技術等。免疫熒光組織(細胞)化學技術是採用熒光素標記的已知抗體(或抗原)作為探針,檢測待測組織、細胞標本中的靶抗原(或抗體),形成的抗原抗體復合物上帶有熒光素,在熒光顯微鏡下,由於受高壓汞燈光源的紫外光照射,熒光素發出明亮的熒光,這樣就可以分辨出抗原(或抗體)的所在位置及其性質,並可利用熒光定量技術計算抗原的含量。以達到對抗原物質定位、定性、定量測定的目的。
⑵ 免疫熒光反應與免疫組織化學有什麼區別
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。
免疫組織化學又稱免疫細胞化學,是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起來,藉助顯微鏡(包括熒光顯微鏡、電子顯微鏡)的顯像和放大作用,在細胞、亞細胞水平檢測各種抗原物質(如蛋白質、多肽、酶、激素、病原體以及受體等)。 免疫組化技術近年來得到迅速發展。50年代還僅限於免疫熒光技術,50年代以後逐漸發展建立起高度敏感,且更為實用的免疫酶技術。
⑶ dmpo和免疫熒光有什麼區別
化學發光是利用化學反應產生的能量促使產生能級躍遷,從而發光,典型的如魯米諾檢測血跡;熒光是一種光致發光現象,必須提供光源去激發分子產生能級躍遷,進而發光。 使用上述兩種方法進行免疫分析時,其區別很明顯,化學發光無需外加光源
⑷ 免疫熒光細胞化學的原理誰能介紹下
免疫熒光細胞化學是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素製成熒游標記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標本,熒光素受激發光的照射而發出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質、定位,以及利用定量技術測定含量。
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⑸ 做免疫細胞化學的一抗能用於免疫熒光嗎
可以直接選擇流式抗體。流式抗體也可以用於免疫熒光,而且不用二抗,直接一種抗體就可以。
⑹ 免疫熒光細胞化學的原理是什麼
免疫熒光細胞化學是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素製成熒游標記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。
在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標本,熒光素受激發光的照射而發出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質、定位,以及利用定量技術測定含量。
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⑺ 做免疫熒光怎麼看蛋白是在細胞核表達還是胞漿表達
做免疫熒光怎麼看蛋白是在細胞核表達還是胞漿表達
免疫組化和免疫熒光都是蛋白定位的檢測(也就是確定蛋白是表達在細胞核/漿/膜)。
免疫組織化學又稱免疫細胞化學,是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起來,藉助顯微鏡的現像和放大作用,在細胞,亞細胞水平檢測各種抗原物質,並可在原位顯示相應的基因和基因表達產物。免疫組織化學技術現已有:免疫熒光組織(細胞)化學技術、免疫酶組織(細胞)化學技術、親和組織化學技術、免疫金銀及鐵標記免疫組織化學技術等。免疫熒光組織(細胞)化學技術是採用熒光素標記的已知抗體(或抗原)作為探針,檢測待測組織、細胞標本中的靶抗原(或抗體),形成的抗原抗體復合物上帶有熒光素,在熒光顯微鏡下,由於受高壓汞燈光源的紫外光照射,熒光素發出明亮的熒光,這樣就可以分辨出抗原(或抗體)的所在位置及其性質,並可利用熒光定量技術計算抗原的含量。以達到對抗原物質定位、定性、定量測定的目的。
⑻ 免疫熒光染色檢測各基因的表達亮變化怎麼看出來的
免疫組織化學又稱免疫細胞化學,是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起來,藉助顯微鏡的現像和放大作用,在細胞,亞細胞水平檢測各種抗原物質,並可在原位顯示相應的基因和基因表達產物。免疫組織化學技術現已有:免疫熒光組織(細胞)化學技術、免疫酶組織(細胞)化學技術、親和組織化學技術、免疫金銀及鐵標記免疫組織化學技術等。免疫熒光組織(細胞)化學技術是採用熒光素標記的已知抗體(或抗原)作為探針,檢測待測組織、細胞標本中的靶抗原(或抗體),形成的抗原抗體復合物上帶有熒光素,在熒光顯微鏡下,由於受高壓汞燈光源的紫外光照射,熒光素發出明亮的熒光,這樣就可以分辨出抗原(或抗體)的所在位置及其性質,並可利用熒光定量技術計算抗原的含量。以達到對抗原物質定位、定性、定量測定的目的。
⑼ 化學發光免疫分析技術和免疫熒光技術的區別
化學發光是利來用化學反應自產生的能量促使產生能級躍遷,從而發光,典型的如魯米諾檢測血跡;熒光是一種光致發光現象,必須提供光源去激發分子產生能級躍遷,進而發光。
使用上述兩種方法進行免疫分析時,其區別很明顯,化學發光無需外加光源,背景干擾小;而熒光則需要外加光源,在垂直光源的方向上檢測,生物樣品中的蛋白質、氨基酸等分子也會產生背景熒光,背景稍高一些,需要選擇合適的熒光試劑,以及樣品處理方法以減少非特異性吸附蛋白的影響。
⑽ 免疫熒光層析法屬於色譜法還是免疫法
樓下的說法有誤,免疫熒光層析的基礎還是免疫層析,而免疫層析與色譜法最大的區別就是層析帶來的分離效果只為免疫檢測服務,而不是作為檢測的手段。免疫層析最後往往需要顯色反應/發光反應/熒光反應等別的方法來表徵信號,而色譜法是通過層析時間和豐度來表徵信號。兩者之間有明顯區別。