生物素二抗

Ⅰ 請教：生物素化的抗體與非生物素化的抗體的區別

如果是同公司同貨號的抗體，差異就是在生物素上，生物素化的抗體是在一抗上偶聯了生物素，這樣可以在下游檢測時通過親和素放大一抗的信號強度，而未生物素化的抗體，需要二抗用anti特異種屬的來進行信號放大。

Ⅱ 「第二抗體」和「二抗」的區別是什麼

第二抗體是抗人IgG(免疫球蛋白)抗體，針對不同抗原的人IgG抗體，它們的V區不同，所以只能與相應的抗原發生特異性結合，但C區是相同的，均含r鏈，因此第二抗體與之結合。
二抗：二抗是在其它宿主體內制備的能與一抗或一抗片段結合的抗體，上面通常連有酶或熒光素等標簽。由於二抗所具備的優點使得其在免疫學實驗中得以應用廣泛，如western blot（通過與特異性抗體結合來鑒定蛋白質），ELISA（以耦聯有酶的抗體或抗原為標記來檢測特異性的蛋白質，尤其是相應的抗原或抗體），免疫組織化學（檢測組織中的特異性抗原），免疫細胞化學（通過免疫學方法檢測細胞的抗原組成），流式細胞術（通過檢測激光所激發熒光來鑒定分離不同類型的細胞）及免疫沉澱（通過抗原與抗體的特異性結合作用來分離相應抗原）。二抗針對某一特定物種（如小鼠）的所有抗體均具有特異性，因而使用標記的二抗可以免去對每一個一抗進行標記，大大節省了時間和費用；此外，一個一抗分子可以同時結合幾個二抗分子，從而使信號大大增強，提高了實驗靈敏度。
二抗可以耦聯有幾種不同的標記，可以是酶，熒光素，或生物素。
抗體特異性 產品。

Ⅲ 熒光二抗標記用HRP、AP、FITC、生物素法各發什麼顏色熒光

這四個不是一碼事，HRP和AP是酶，二抗上掛了酶，要給相應的底物才能顯回色，顯色方式可以通過答發熒光也可以不發熒光（例如給予ECL底物，其中的H2O2和魯米諾在HRP的作用下，能在黑暗中發出熒光；也可以給予雙氧水和DAB，反應產生棕色不溶於水的物質）；FITC為異硫氰酸熒光素，本身就是黃綠色熒光，二抗結合後可直接在熒光顯微鏡下觀察；生物素一般也是掛在二抗上的，利用卵白素分別連接生物素標記的第二抗體和生物標記的酶，由酶催化底物，生成終產物，這個終產物也是不溶於水的。

Ⅳ 一抗，二抗如何選擇

如果一抗為多克隆抗體，由於多克隆抗體主要是IgG類，因此相應的二抗應該選擇抗IgG抗體。

對於一抗為單克隆抗體的情況，其同型(Isotype)通常會在產品信息中給出，如果你的一抗同型是小鼠IgM(Isotype：IgM)，那麼相應的二抗就應該選擇抗小鼠IgM。

此外由於抗IgG抗體可以識別大多數類型的免疫球蛋白，所以在不清楚一抗同型的情況下，可以選擇抗IgG的二抗。

如果單克隆一抗為小鼠IgG的某一亞類，那麼除了選擇抗IgG的二抗外，還可以選擇針對該亞類的二抗，此種抗體在雙標記實驗中尤其適合。如一抗同型為小鼠IgG1，那麼可以選擇抗IgG二抗或抗IgG1二抗。

(4)生物素二抗擴展閱讀：

注意事項：

1、一般來講，耦聯到二抗上的探針主要有酶（辣根過氧化酶HRP和鹼性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP），熒光基團（FITC,RRX,TR,PE）和生物素。

2、對於westernblot和ELISA，最常用的二抗是酶標二抗，而細胞或組織標記實驗（細胞免疫化學，組織免疫化學，流式細胞術）中通常使用熒光基團標記的二抗，免疫組化中也可以使用辣根過氧化酶或鹼性磷酸酶標記的二抗。如果想要更大程度的放大檢測信號，可以使用biotin/avidin檢測系統。

3、親和層析純化的抗體一般更受用戶歡迎，因為這些產品的純度最高，產生的非特異性背景最少。但是有些情況下也要考慮到純化過程中損失的IgG部分，因為其中含有親和力很高的抗體，尤其是當目的抗原存在的量很小的時候，高親和性的IgG部分就顯得尤為重要。

Ⅳ 免疫組化為什麼要用一抗又要用二抗啊

一抗特異性結合組織中你要檢測的物質，而二抗則能和一抗結合，並帶有放射性、生物素或者地高辛標記，使得你可以觀察到。

Ⅵ 做werstern如果二抗是抗體-生物素，三抗是辣根過氧化物酶，這種操作步驟與直接標記的辣根過氧化物酶有何不

本質上一樣，只是三抗有級聯放大效應，更敏感，亮度更大

Ⅶ 如何選擇二抗——根據一抗種屬及類型選擇合適的二抗求解

二抗廣義上是指專門和一抗進行特異性反應和結合的抗體，在免疫學反應中，經常需要針對試驗選擇不同的二抗，艾美捷能為您的科研工作提供最適合和最全面的二抗產品。檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇，同時在後繼試驗中也會有不同的檢測方案，因此在選擇二抗的時候要綜合考慮一抗的類型及後繼檢測方案的要求，一般來說，選擇合適的二抗需要從下面幾個方面考慮：【一抗的種屬來源】二抗應選用與使用的一抗相同的物種來源，例如：如果你的一抗是小鼠源的單克隆抗體，二抗則選抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可）；如果一抗是從兔血清里制備的兔源多克隆抗體，則相應的二抗需要選擇抗兔的二抗。即根據一抗的物種來源選擇相應的抗該物種的二抗。艾美捷能為您提供最全的抗不同種屬的原裝進口二抗，包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、綿羊、人、豚鼠、豬、馬、牛、雞、鴨等二抗。【一抗的類別亞型】二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。這通常是針對單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白，因此相應的二抗就是抗IgG抗體。其中單克隆抗體的類別及亞類通常會在產品說明書中都會有描述，如果你的一抗是小鼠IgM，那麼相應的二抗就應當是抗小鼠IgM。如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那麼幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結合，或者你也可以選擇專門針對這一亞類的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那麼你可以選擇抗IgG1的二抗，此種抗體在雙標記實驗中尤其適合。在不清楚一抗為何種類/亞類的情況下，可以選用抗相應物種IgG。艾美捷能為您提供通用的IgG(H+L)二抗，或者特異性只結合IgM的Anti IgM (mu) Antibody、IgA的Anti IgA (alpha-Antibody、IgE的Anti IgE (epsilon) Antibody等。【二抗的種屬來源】一般來說，不同的種屬來源與二抗的質量沒有必然的聯系，來源於山羊的二抗與來源於驢的二抗在一般的實驗里沒有太多的差別。然而在一些特殊的實驗里， 如雙標實驗里，如果其中一個一抗是山羊來源的，一個是小鼠來源的，則相應的二抗分別要抗山羊和抗小鼠的二抗，這時候，二抗就不能選擇山羊或者小鼠來源的。 艾美捷有相應的驢來源的二抗，非常適合做類似雙標的免疫實驗。【二抗的耦聯標記】一般來講，耦聯到二抗上的探針主要有酶（辣根過氧化酶HRP和鹼性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP），熒光基團（FITC、 Rhodamine、Texas Red、PE、Rhodamine、Dylight等）、生物素、金顆粒。選用哪種探針的二抗主要取決於具體的實驗。對於Western Blot和ELISA，最常用的二抗是酶標二抗；而細胞或組織標記實驗（細胞免疫化學，組織免疫化學，流式細胞術）中通常使用熒光基團標記的二抗，免疫組化中也可以使用辣根過氧化酶或鹼性磷酸酶標記的二抗。如果想要更大程度的放大檢測信號，可以使用Biotin/Avidin檢測系統。在一些熒光檢測方案中，則需要選擇不同的熒游標記；而金顆粒標記的二抗則更多的應用於免疫電鏡中。艾美捷能為您提供上述所有不同類型標記的二抗。【是否經過血清吸附過的二抗】為減少二抗與樣本的非特異性結合，艾美捷還能為您提供不同血清吸附的原裝進口二抗。如您的檢測樣本是人源的蛋白，一抗是小鼠源的單克隆抗體，二抗就需要選擇抗小鼠源的二抗，如果您對實驗的特異性要求很高，那我們向您推薦經過人血清吸附過的抗小鼠源的二抗，這種二抗由於經過人血清吸附而排除了與人源組織（如IgG等）可能發生非特異性反應的IgG，因此將非特異性結合降低到最低。【Anti-IgG還是Anti-IgG, F(ab』)2 fragment】在一些如胸腺、脾臟、血液的組織以及造血細胞、淋巴細胞、B細胞等細胞內，通常含有較多的Fc受體，這時候選擇二抗時最好選擇Anti-IgG, F(ab』)2 fragment這樣的特異性二抗，這樣就消除了由於Fc部分與IgG的非特異性結合。常規的Anti-IgG (H+L)二抗與IgG的重鏈和輕鏈都有結合反應，即與IgG的Fc的F(ab』)2片段都能結合；由於IgG、IgM、IgA都有保守的輕鏈結構域，因此Anti-IgG (H+L)與它們都有交叉反應。而Anti-IgG, F(ab』)2 fragment經過了IgG Fc片段的吸附，因此只與IgG的F(ab』)2片段結合，然而IgG、IgM、IgA都有保守的輕鏈結構域，因此與它們也有交叉反應。【Anti-IgG(H+L)、Anti-IgG (gamma)、Anti-IgM (mu)、Anti-IgA (alpha)】在一些特殊的實驗里，只需要檢測樣本里的IgG或者IgM，常規的Anti-IgG (H+L)由於與IgG的重鏈和輕鏈都有結合反應，而IgG、IgM、IgA都有保守的輕鏈結構域，因此不能特異性的檢測某種類型的IgG或者IgM。這時候就需要針對特殊類型Ig分子的二抗。艾美捷備有全面的二抗現貨產品並能提供最完整的二抗產品線。主要二抗品牌為全球最大的二抗產品Jackson以及前沿抗體生產商EarthOx。按照標記分，有HRP、AP、生物素等標記二抗，FITC、TRITC、Rhodamine、Cy3/5、Dylight等熒光二抗；按照檢測物種分，有抗人、大鼠、小鼠、豬、驢、綿羊、山羊、小雞、馬、兔、倉鼠、狗、牛，以及多種細菌類二抗；另外，還有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、IgG(ab』)2等不同類型抗體。

Ⅷ 如何選擇二抗

1 一抗的物種來源
2 一抗是屬於哪個類或亞類
二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。這通常是針對單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白，因此相應的二抗就是抗IgG抗體.
單克隆抗體的類別及亞類通常會在產品列表中列出，如果你的一抗是小鼠IgM，那麼相應的二抗就應當是抗小鼠IgM，或是抗小鼠IgG抗體。
如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那麼幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結合，或者你也可以選擇專門針對這一亞類的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那麼你可以選擇抗IgG1的二抗，此種抗體在雙標記實驗中尤其適合。
如果你不知道一抗是哪一類別或亞類，那麼抗小鼠IgG是一個不錯的選擇，因為此種抗體可以識別大多數類型的IgG免疫球蛋白。
下面總結了幾種具有不同特異性的二抗：
針對整個抗體分子（H＋L）具有特異性：如anti-IgG(H+L)，此類抗體既可以與抗體的重鏈結合也可以與輕鏈結合，即與抗體分子的 Fc，F(ab』)2/Fab部分（見圖5）均可反應，anti-IgG(H+L)也可以與其他免疫球蛋白家族反應（如IgM和IgA），因為所有的免疫球蛋白都具有相同的輕鏈（?鏈或?鏈）。
針對Fab片段具有特異性：這類抗體與重鏈輕鏈均可以結合，由於它們可以與輕鏈反應，它們同時也已和具有相同輕鏈的其他種類的免疫球蛋白反應。
這對Fc片段或重鏈具有特異性：這類抗體和重鏈的Fc部分反應，一次它們是類別特異性的（即gamma鏈特異性抗體只與IgG反應，mu鏈特異性抗體只識別IgM，依此類推）。
輕鏈（lambda，kappa）特異性：與所有類別的抗體反應，因為所有類別的抗體均具有相同的lambda鏈或kappa鏈。
經過吸附處理的二抗：不同來源的免疫球蛋白含有相似的結構，抗一個物種的抗體可能與其他物種發生交叉反應，一次有些二抗經過了動物或人類IgG吸附處理，以減少非特異性背景。例如，如果是小鼠的組織或細胞，那麼選擇經小鼠血清或IgG吸附處理過的二抗可以減少非特異性結合。但是此種抗體識別表位的數量被大大減少。
整個IgG分子：此種抗體適用於多數情況。
F(ab』)2片段：該種抗體是由兩個靠二硫鍵連接的用於結合抗原的Fab片段組成，這些抗體用在特定的情況中，如需要避免抗體與具有Fc受體的細胞結合的情況。
Fab片段：它們只有一個結合位點，一般用來封閉內源性免疫球蛋白。
一般來講，耦聯到二抗上的探針主要有酶（辣根過氧化酶HRP和鹼性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP），熒光基團（FITC, RRX, TR, PE）和生物素。選用哪種探針的二抗主要取決於具體的實驗。對於western blot和ELISA，最常用的二抗是酶標二抗，而細胞或組織標記實驗（細胞免疫化學，組織免疫化學，流式細胞術）中通常使用熒光基團標記的二抗，免疫組化中也可以使用辣根過氧化酶或鹼性磷酸酶標記的二抗。如果想要更大程度的放大檢測信號，可以使用biotin/avidin檢測系統。5 抗體的純度：

Ⅸ 如何選擇二抗

1 一抗的物種來源 2 一抗是屬於哪個類或亞類 二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。這通常是針對單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白，因此相應的二抗就是抗IgG抗體. 單克隆抗體的類別及亞類通常會在產品列表中列出，如果你的一抗是小鼠IgM，那麼相應的二抗就應當是抗小鼠IgM，或是抗小鼠IgG抗體。 如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那麼幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結合，或者你也可以選擇專門針對這一亞類的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那麼你可以選擇抗IgG1的二抗，此種抗體在雙標記實驗中尤其適合。 如果你不知道一抗是哪一類別或亞類，那麼抗小鼠IgG是一個不錯的選擇，因為此種抗體可以識別大多數類型的IgG免疫球蛋白。 下面總結了幾種具有不同特異性的二抗： 針對整個抗體分子（H＋L）具有特異性：如anti-IgG(H+L)，此類抗體既可以與抗體的重鏈結合也可以與輕鏈結合，即與抗體分子的 Fc，F(ab』)2/Fab部分（見圖5）均可反應，anti-IgG(H+L)也可以與其他免疫球蛋白家族反應（如IgM和IgA），因為所有的免疫球蛋白都具有相同的輕鏈（?鏈或?鏈）。 針對Fab片段具有特異性：這類抗體與重鏈輕鏈均可以結合，由於它們可以與輕鏈反應，它們同時也已和具有相同輕鏈的其他種類的免疫球蛋白反應。 這對Fc片段或重鏈具有特異性：這類抗體和重鏈的Fc部分反應，一次它們是類別特異性的（即gamma鏈特異性抗體只與IgG反應，mu鏈特異性抗體只識別IgM，依此類推）。 輕鏈（lambda，kappa）特異性：與所有類別的抗體反應，因為所有類別的抗體均具有相同的lambda鏈或kappa鏈。 經過吸附處理的二抗：不同來源的免疫球蛋白含有相似的結構，抗一個物種的抗體可能與其他物種發生交叉反應，一次有些二抗經過了動物或人類IgG吸附處理，以減少非特異性背景。例如，如果是小鼠的組織或細胞，那麼選擇經小鼠血清或IgG吸附處理過的二抗可以減少非特異性結合。但是此種抗體識別表位的數量被大大減少。 整個IgG分子：此種抗體適用於多數情況。 F(ab』)2片段：該種抗體是由兩個靠二硫鍵連接的用於結合抗原的Fab片段組成，這些抗體用在特定的情況中，如需要避免抗體與具有Fc受體的細胞結合的情況。 Fab片段：它們只有一個結合位點，一般用來封閉內源性免疫球蛋白。 一般來講，耦聯到二抗上的探針主要有酶（辣根過氧化酶HRP和鹼性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP），熒光基團（FITC, RRX, TR, PE）和生物素。選用哪種探針的二抗主要取決於具體的實驗。對於western blot和ELISA，最常用的二抗是酶標二抗，而細胞或組織標記實驗（細胞免疫化學，組織免疫化學，流式細胞術）中通常使用熒光基團標記的二抗，免疫組化中也可以使用辣根過氧化酶或鹼性磷酸酶標記的二抗。如果想要更大程度的放大檢測信號，可以使用biotin/avidin檢測系統。5 抗體的純度：

Ⅹ 免疫組化一抗+生物素化的二抗+DAB顯色，這屬於什麼方法

大部分都是一抗加二抗直接顯色啊 做WB IF都是
用DAB顯色的就是免疫組化了嘛
鼠源還是兔源其實無所謂 看公司賣的有哪種就可以了