生物素化蛋白
一、生物素的定义:生物素又称维生素H、辅酶R,是水溶性维生素,也属于维生素B族,B7。它是合成维生素C的必要物质,是脂肪和蛋白质正常代谢不可或缺的物质。是一种维持人体自然生长、发育和正常人体机能健康必要的营养素。
生物素是20世纪30年代在研究酵母生长因子和根瘤菌的生长与呼吸促进因子时,从肝中发现的一种可以防治由于喂食生鸡蛋蛋白诱导的大鼠脱毛和皮肤损伤的因子。
二、生物素的用途:生物素,即人们所熟知的维生素H,它能使身体将食物转化为自身能量。生物素有利于细胞的健康和再生。糖尿病患者可以通过生物素改善血糖的调节。头发和指甲的健康也需要生物素。
(1)保健用途
糖尿病。补充生物素,生物素通过改善胰岛素和血糖的使用帮助改善血糖的调节。头发和指甲。补充生物素可以修复薄弱爆裂的脚趾甲和手指甲,改善头发的健康。生物素也可以修复那些由于生物素水平偏低引起过早的灰白头发。
(2)美容用途
生物素具有出色的美容作用,可保持皮肤嫩白、指甲光滑等。这个发现也为生物素产品开拓了一大新药业用途。美容化妆品行业是国际大产业之一,美容化妆品的国际市场总销售额远远高于药品的销售额,生物素在美肤、美甲(指甲)及美发上的新应用必将导致药用级生物素销量的上升。
(3)科研用途
生物素可以用作核酸探针的标记物,它能与核酸分子的UTP或dUTP 5‘位上的C相结合,并可与亲和素结合而被检测。在检测的过程中,生物素只用作固定连接,而不用作信号检测。
(1)生物素化蛋白扩展阅读:
生物素的食物来源:
(1)在牛奶、牛肝、蛋黄、动物肾脏、草莓、柚子、葡萄等水果、瘦肉、糙米、啤酒、小麦中都含有生物素。在复合维生素B和多种维生素的制剂中,通常都含有维生素H。
(2)富含该维生素的美食:芥末双脆、 蟹肉西兰花、芥茉菠菜、鱼香腰花、油焖鳝鱼、素炒三丝、蛋黄南瓜、芒果柳橙苹果汁、胡萝卜炖羊肉、松花淡菜粥、清炖萝卜牛肉、银杞明目汤、鸡肝胡萝卜粥、牛肉蔬
(3)菜浓汤、芒果葡萄柚汁、芒果柳橙苹果汁、木瓜生姜汁、芦荟柠檬汁、甜橙柠檬汁、杏猕猴桃汁。
❷ 生物素与细胞表面的膜蛋白是怎样结合的
通过生物素化标记分析细胞膜亚蛋白质组
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关闭细胞膜在许多基本生物学作用过程中扮演着重要角色,比如细胞-细胞相互作用、信号转导和物质运输.分析不同生理或病理状态细胞的膜蛋白的表达变化,有助于了解这些生物学过程以及发现新的诊断、治疗靶位.成功地进行膜蛋白分析最重要的是获得足够浓度与纯度的膜蛋白.这里报告一种分离高纯度膜蛋白的方法,主要包括三个步骤:(1)生物素化活细胞表面的膜蛋白,(2)链亲和素琼脂糖亲和吸附,(3)强烈的清洗条件去除非特异吸附的胞质蛋白.最后用化学方法洗脱生物素标记的膜蛋白进行双向电泳分离分析.用该方法制备了HeLa细胞的膜蛋白.免疫印迹结果表明,生物素标记的膜蛋白基本上都是低丰度蛋白.这样制备得到的膜蛋白双向电泳分离出2 400多个蛋白质点,而且大多数点的亮度相近,分布得相对分散没有聚集成群.这种图谱非常便于比较分析找到差异蛋白.多次重复制备膜蛋白、电泳表明该方法的重复性和稳定性很好.
刊 名: 中国生物化学与分子生物学报 英文刊名: CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY 年,卷(期): 2006 22(3) 分类号: Q78 关键字: 细胞膜 蛋白质组 双向电泳 生物素化 亲和纯化 机标分类号: R39 R81 机标关键字: 生物素化 标记分析 细胞膜 蛋白质 膜蛋白 生物素标记 双向电泳 化学方法 电泳分离 生物学过程 低丰度蛋白 作用过程 治疗靶位 信号转导 细胞表面 亲和吸附 物质运输 免疫印迹 链亲和素 分离分析 基金项目: 科技部科研项目
❸ 什么是蛋白生物素,对人体有什么作用
对人体的身体构建起到作用。
❹ 如何用生物素标记抗体
缓冲溶液的作用主要就是pH稳定性和离子强度的适合,还有避免缓冲溶液中的成分与样品分子发生共价链接,主要就是考虑这些。
链接很容易,就用EDC或者CMC等碳二亚胺,是最容易在羧基和氨基之间催化形成酰胺键,反应条件就是0到4度,过夜,用磁力搅拌子温和搅拌,pH<7反应快,不过pH=7或稍微pH>7也关系不大。EDC或者CMC等碳二亚胺催化活性极高,而且一般的蛋白质的分子表面总有Lys,Arg,Asn,Gln,所以游离在分子表面的羧基和氨基总是不少的,参与反应的两种蛋白质用大致10:1的比例混合(哪种蛋白质便宜,哪种蛋白质的物质的量就大些,但是这不是全部原因),反应样品浓度就按照平时使用时的浓度或略微更低浓度(别用储存液的浓度)即可。很容易反应,而且EDC或者CMC等碳二亚胺是零臂连接试剂,用于空间位阻,形成多分子交联可能较小,即使形成了也很容易用分子筛层析按照分子量区分开。
参与反应的两种蛋白质用大致10:1的比例混合(哪种蛋白质便宜,哪种蛋白质的物质的量就大些,但是这不是全部原因),为了避免两种蛋白质之间发生交联成为串联,因为一种蛋白质形成串联的可能性低一些;即使要形成串联的蛋白质串珠,最好也不要是价格高的那种;另外,EDC或者CMC等碳二亚胺催化活性极高,室温下即会催化,所以要在0到4度,过夜,用磁力搅拌子温和搅拌,一方面避免碳二亚胺催化活性太高形成串联的蛋白质串珠,另一方面,保护蛋白质不变性;反应样品浓度就按照平时使用时的浓度或略微更低浓度(别用储存液的浓度)即可,为什么?因为浓度高了更易形成串联的蛋白质串珠结构,浓度低了,没有反应成功,通过分子筛层析还可以分离出来接着连接,如果形成了酰胺键再要专一性切开就没有那么容易了。
❺ 抗生物素蛋白链菌素 为什么用这个标记
抗生物素蛋白链菌素 为什么用这个标记
该试剂盒是一种时间分辨的荧光共振能量转移免疫分析,该反应是一个竞争免疫反应,即铕标的cAMP示踪复合物与体系中的cAMP竞争结合标有Alexa Fluor 647染料的cAMP抗体。铕标cAMP示踪复合物是通过Biotin标记的cAMP与铕标的抗生物素蛋白链菌素(streptavidin)与抗体的复合物紧密结合产生的。
当抗体结合到示踪剂上时,340nm的激发光激发铕标分子,导致能量转移到Alexa Fluor 647染料上,结果产生665nm的发射光。荧光的强度与样品中的cAMP含量成反比。
本试剂盒用于检测在GPCR激动剂刺激下活细胞或者细胞膜制备品产生的cAMP。对于偶联Gαs的受体,激动剂刺激导致665nm的荧光强度降低,而拮抗剂则可以逆转这一效应;对于偶联Gαi的受体,在激动剂刺激的同时用forskolin刺激cAMP产生,那么激动剂则抑制forskolin诱导的cAMP的生成,因此对照只给forskolin的细胞组可以通过665nm荧光强度的增加反应激动剂的效应。
该试剂盒的灵敏度很高,室温下反应在20h内是稳定的。本试剂盒适用于在384孔板中进行24μl的微量分析。
❻ 蛋清中的生物素结合蛋白、蛋白酶抑制剂会影响生物素(维生素B7)和什么的消化吸
B7:又称生物素、辅酶R,是水溶性维生素,也属于维生素B族。它是合成维生素C的必要物质,是脂肪和蛋白质正常代谢不可或缺的物质。相对分子量244.3 熔点39~48‘C 为无色长针状结晶,具有尿素与噻吩相结合的骈环,并带有戊酸侧链,能溶于热水,不溶于有机溶剂,在普通温度下相当稳定,但高温和氧化剂可使其丧失活性。它存在于肝、蛋黄、奶、酵母等食物中。生物素与酶结合参与体内二氧化碳的固定和羧化过程,与体内的重要代谢过程如丙酮酸羧化而转变成为草酰乙酸,乙酰辅酶A羰化成为丙二酰辅酶A等糖及脂肪代谢中的主要生化反应有关。它也是某些微生物的生长因子,极微量(0.005微克)即可使试验的细菌生长。例如,链孢霉生长时需要极微量的生物素。人体每天需要量约100~300微克。生鸡蛋清中有一种抗生物素的蛋白质能和生物素结合,结合后的生物素不能由消化道吸收;造成动物体生物素缺乏,此时出现食欲不振、舌炎、皮屑性皮炎、脱毛等。然而,尚未见人类生物素缺乏病例,可能是由于除了食物来源以外,肠道细菌也能合成生物素之故。生物素是人体内多种酶的辅酶,参与体内的脂肪酸和碳水化合物的代谢;促进蛋白质的合成;还参与维生素B12、叶酸、泛酸的代谢;促进尿素合成与排泄。用于治疗动脉硬化、中风、脂类代谢失常、高血压、冠心病和血液循环障碍性的疾病。用于化妆品,可提高血液循环在皮肤血管中的速度,在0.1%~1.0%的浓度范围内,易于配方中的油相相混合。在护肤雪花膏、运动药液、脚用止痛膏、刮胡须液、洗发液中均可使用。动物肝脏、肾脏、鸡肉、猪肉、牛奶、蛋黄、木瓜、橘子、南瓜、糙米、小麦胚芽、酵母等。需要注意的是蛋黄中虽然富含维生素B7,但生蛋白会影响蛋黄中维生素B7的活性,所以最好煮熟之后在再食用。维生素B7对热不敏感,一般烹调不会损失。
❼ 什么是生物素
生物素又称维生素H、辅酶R,是水溶性维生素,也属于维生素B族,B7。它是合成维生素C的必要物质专,是脂肪和蛋白质正常代谢不可或缺的物质。是一种维持人体自然生长、发育和正常人体机能健康必要的营养素。
生物素(Biotin)为B族维生素之一,又称维生素H、维生素B7、辅酶R(Coenzyme R)等。是20世纪30年代在研究酵母生长因子和根瘤菌的生长与呼吸促进因子时,从肝中发现的一种可以防治由于喂食生鸡蛋蛋白诱导的大鼠脱毛和皮肤损伤的因子。生物素是水溶性维生素B群成员。在肝、肾、酵母、牛乳中含量较多,是生物体固定二氧化碳的重要因素。容易同鸡蛋白中一种蛋白质结合,大量食用生蛋白可阻碍生物素的属吸收导致生物素缺乏,如脱毛、体重减轻、皮炎等。生物素在脂肪合成、糖质新生等生化反应途径中扮演重要角色。
生物素是秃头一族的救星,不但防止落发及头顶见光颇见功效,还能预防现代人常见的少年白发。它在维护皮肤健康中也扮演着重要角色。至于安定神经系统方面的功效至今尚未获得证实,但对忧郁、失眠确有一定助益。
生物素是多种羧化酶的辅酶,在羧化酶反应中起CO2载体的作用。
❽ 如何使用生物素标记抗体或蛋白
物素预先化通噻吩环戊酸侧链羧基与抗体、酶等物酰胺键偶联化物素内制备获高敏容度BAS制剂关键环节用几种:
1) 物素N—羟基丁二酰亚胺酯(biotinyl-N-hydroxy-succinnimideBNHS)制备:
取物素1g混悬于12 mlN,N-二甲基甲酰胺(DMF)加0.6g N-羟基丁二酰亚胺(HOSU)0. 8 g二环基碳二亚胺(DCC)置于密闭容器内室温磁力搅拌作用夜滤滤液经旋转蒸干加10mL乙醚洗涤继加200 ml异丙醇使其重结晶获白色粉末状晶体
BNHS酯键-C=0基团与蛋白质赖氨酸氨基结合使物素标记蛋白含赖氨酸残基越或蛋白质等电点pI 6.0其标记效越BNHS适用于标记抗体及性偏碱性抗原
❾ 鸡蛋清中生物素的作用
鸡蛋清中生物素的作用?
维生素H生理功能 编辑 人体每天需要量约100~300微克。生鸡蛋清中有一种抗生物素的蛋白质(卵蛋白,avidin)能和生物素结合,结合后的生物素不能由消化道吸