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生物测定法

发布时间: 2021-08-03 22:43:03

⑴ 肝素生物测定法

羊血浆的配置 将羊血浆直接收集于质量分数为8%的柠檬酸三钠溶液的容器中(以颈动脉放血为好),柠檬酸三钠与羊血浆的比例为1:19,边收集边摇动,迅速于离心机上分离血浆。取1ml血浆于试管中,加0.2ml 1%氯化钙溶液混匀,若5分钟内有血块出现,则此血浆可用。将血浆分装多份,每体积不超过100ml。装入一个200ml的容量瓶中,在-1- -20度结冰。-8度保存。
一般使用的专用 羊血浆 制备过程就不需要亲自参与了。,希望上述的过程能解决你的疑问。

⑵ 常用的测定做生物生长的方法有哪几种

常用测定微生物生长的方法有:

1)称干重法.可用离心法或过滤法测定.优点:可适用于一切微生物,缺点:无法区别死菌和活菌.
2)比浊法.原理:由于微生物在液体培养时,原生质的增加导致混浊度的增加,可用分光光度计测定.优点:比较准确.
3)测含氮量,大多数微生物的含氮量占干重的比例较一致,根据含氮量再乘以6.25即可测得其粗蛋白的含量.
4)血球计数板法.优点:简便、快速、直观.缺点:结果包括死菌和活菌.
5)液体稀释法.对未知菌样作连续的10倍系列稀释,经培养后,记录每个稀释度出现生长的试管数,然后查MPN表,再根据样品的稀释倍数就可计算其中的活菌含量.优点:可计算活菌数,较准确.缺点:比较繁琐.
6)平板菌落计数法.取一定体积的稀释菌液涂布在合适的固体培养基,经培养后计算原菌液的含菌数.优点,可以获得活菌的信息.缺点:操作繁琐,需要培养一定时间才能获得,测定结果受多种因素的影响.

⑶ 微生物测定法的方法分类

液体稀释法
在一组试管中分别加入一定的培养基,然后加入不等量的被测物质,再将已培养好的、用于测定的微生物接种进去,在规定的条件下培养一定时间,观察其消长情况并与标准曲线对比,计算出被测物质的含量。
固体平板扩散法
将溶化的固体培养基与被测定微生物混合做成平板,把含不等量被测物质的液体滴入置于平板上(直接滴样法);或注入平板上的牛津杯内(管碟法);或吸入圆形滤纸片后,再置于平板上(纸片法);也可以在平板上挖一定大小的圆孔,然后把被测物滴入孔内(打孔法);经培养后在物质扩散所及的范围内出现抑菌法(或生长圈),测量圈的直径,并与标准曲线对比,计算出被测物质的含量(见图[固体平板扩散法 1、3、7 打孔法2、8纸片法4、6管碟法5直接滴样法][])。
1932年,A.弗莱明在研究溶菌酶和青霉素时,开始使用微生物法测定抗生素的活性。1940年,E.B.钱恩等根据平板上抑菌圈的大小测定青霉素的活性含量。后又经E.P.亚伯拉罕等进一步将上述测定方法予以完善。测定抗生素时常用的微生物有大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、黑曲霉等。1935年,W.H.肖普费最先用微生物测定维生素B。1939年,E.E.斯内尔和F.M.斯特朗用乳杆菌测定维生素的含量。1934年,K.A.凯肯等用阿拉伯聚糖乳杆菌测定9种氨基酸。此后,乳杆菌属、链球菌属、明串珠菌属的成员及某些微生物的变异株,逐渐成为最常使用的对象。

⑷ 微生物测定法的介绍

微生物测定法是指在规定条件下选用适当微生物测定某物质含量的方法。被测定的物质可以是某些生物生长所必需的维生素、氨基酸等,也可以是抑制某些微生物生长的抗生素、农药等。常使用的有液体稀释法和固体平板扩散法。

什么是生物鉴定法

生物鉴定法是利用某些生物对某些物质(如维生素、氨基酸)的特殊需要,回或对某些物质(如激素、植答物激素、抗生素、药物等)的特殊反应来定性、定量测定这些物质的方法。如用小鼠的惊厥反应测定胰岛素,用微生物测定维生素B12等。生物测定有时比其他测定方法更为灵敏和专一。它是生物学、医学、特别是毒理学的重要内容和基础。

⑹ 生物医学测量法的步骤有哪些

这个他其实是有枪的一个流程可以直接搜索一下,他的一个使用方法都是没有问题的。

⑺ 生物学效价的测定方法

(一)生物试验法,这是一种以仔鸡为试验对象,以某一磷酸盐为参照物,用斜率比法测定磷酸盐RBV的方法,已被广泛使用。同一磷源的RBV测值常常是各不相同的,造成这一现象的原因之一是试验条件存有差异。对其测定方法加以比较后可知,基础日粮、饲养方式、试验期、试验动物和评定指标等都会影响测值。
(二)同位素示踪法,同位素32P示踪法试验周期更短,一般不需要2~4周时间,但耗资更大,对小动物试验来说不太经济,而且用同位素世踪测定矿物元素的表观消化率意义不大,因为粪中排出的矿物质既混有未吸收的,也有内源性的。

⑻ 测定微生物的生物量有哪些主要方法

圣才学习网为您解答:
1.直接计数测定 根据微生物种类,有血球计数板和细菌计数板;或者用电子计数器计数
2.比浊法 根据菌悬液的浓度在一定范围内与光密度成正比,可以用分光光度计测OD值,用OD值表示样品菌液浓度
3.核酸计数法 荧光定量PCR技术
4.活菌计数法 MPN和平板计数法
由于测定方法的限制,前几种计数结果不太准确,目前应用广泛的是第四种
对粪大肠菌群和光合细菌可用MPN,对其他微生物可用平板计数法

⑼ 生物年代测定法哪个准确

考古里的碳十四测年法,就是根据碳依四衰变的程度来计算出样品的大概年代的一种测量方法。 碳依四是碳元素的一种具放射性的同位素,它是透过宇宙射线撞击空气中的氮原子所产生。碳-依四原子核由陆个质子和吧个中子组成,其半衰期约为5,漆三0±四0年。由于在有机材料中含有碳-依四,因此根据它的衰变可以确定考古学样本的大致年代。 碳十四测年法的原理在于,碳依四由于受到宇宙射线中子对碳依四原子的作用,不断地形成于大气上层。它在空气中迅速氧化,形成二氧化碳并进入全球碳循环。动植物一生中都从二氧化碳中吸收碳依四。当它们死亡后,立即停止与生物圈的碳交换,其碳依四含量开始减少,减少的速度由放射性衰变决定。放射性碳定年本质上是一种用来测量剩余放射能的方法。通过了解样品中残留的碳依四含量,就可以知道有机物死亡的年龄。 这一原理通常用来测定古生物化石的年代。
碳十四年测年法由美国加州大学伯克利分校博士威拉得·利比发明,威拉得·利比也因此获得依9陆0年诺贝尔化学

⑽ 生物利用度有哪两种测定方法

目的:(1)建立和验证同时测定人血浆中二甲双胍、格列齐特浓度的LC/MS/MS方法。 (2)以深圳市中联制药有限公司研制的二甲双胍格列齐特片为受试制剂,以市售格列齐特片(深圳市中联制药有限公司生产)及盐酸二甲双胍片(中美上海施贵宝制药有限公司生产)为参比制剂,应用LC/MS/MS法,研究受试制剂与参比制剂的二甲双胍、格列齐特人体生物利用度和生物等效性。 方法:(1)LC/MS/MS方法建立与确证:以乙腈为血浆蛋白沉淀剂对人血浆样本进行处理,选用石杉碱甲为内标物,以甲醇/水(含1%甲酸)/乙腈(30/31/39,v/v/v)为流动相、HypersilBDSC18为色谱柱;通过电喷雾电离(ESI)源正离子选择反应监测(SRM)扫描方式进行LC/MS/MS分析,同时测定人血浆中二甲双胍、格列齐特的浓度,并根据相关指导原则进行特异性、标准曲线、回收率、精密度与准确度、稳定性等方面的方法学确证。 (2)二甲双胍格列齐特片人体生物利用度和生物等效性试验研究:20例健康成年男性受试者随机分组,自身对照,单次空腹口服药物(盐酸二甲双胍片500mg及格列齐特片80mg或二甲双胍格列齐特片500mg/80mg×2)。应用已确证的LC/MS/MS法测定受试者血浆中二甲双胍和格列齐特的浓度,根据所得血浆浓度-时间数据计算各主要药代动力学参数。 结果:(1)建立了同时测定人血浆中二甲双胍、格列齐特浓度的LC/MS/MS方法,方法学验证结果表明,该方法特异性好,无内源性杂质干扰。二甲双胍在7.8~4678.9μg/L范围线性良好,定量下限为7.8μg/L;格列齐特在10~10000μg/L范围线性良好,定量下限为10μg/L。二甲双胍批内RSD为5.8%~8.2%,批间RSD为5.1%~7.3%;格列齐特批内RSD为7.5%~10.7%,批间RSD为8.1%~12.5%。二甲双胍的平均提取回收率为71.0%~83.6%,平均相对回收率为96.1%~109.4%;格列齐特的平均提取回收率为88.1%~104.0%,平均相对回收率为91.5%~103.7%。血浆样品在室温放置4h,二甲双胍偏差为-11.0%~-6.5%,格列齐特偏差为7.9%~10.6%。血浆样品冻融2次,二甲双胍偏差为-2.1%~2.7%,格列齐特偏差为10.0%~11.3%。血浆样品提取液在室温放置12h,二甲双胍偏差为0.8%~5.6%,格列齐特偏差为-3.5%~1.8%。血浆样品冰冻(-30℃)39d,二甲双胍偏差为-16.7%~7.4%,格列齐特偏差为-1.6%~11.8%。 (2)二甲双胍格列齐特片人体生物利用度和生物等效性试验研究结果:参比制剂与受试制剂二甲双胍的Cmax分别为1161.7±307.9μg/L及1264.4±275.0μg/L;Tmax分别为1.9±1.0h及2.0±0.8h;t1/2分别为4.6±0.9h及4.1±0.6h;AUC0-t分别为7132.9±1956.1μg/L·h及7758.5±2096.4μg/L·h;AUC0→∞分别为7287.3±1988.9μg/L·h及8063.6±2069.0μg/L·h;受试制剂相对于参比制剂的生物利用度为111.2%±23.6%;90%可信限:Cmax为101.7%~119.4%,AUC0-t为99.8%~118.5%,AUC0→∞为99.9%~123.3%。参比制剂与受试制剂格列齐特的Cmax分别为4958.8±771.2μg/L及5266.7±880.2μg/L;Tmax分别为3.9±0.8h及3.5±1.0h;t1/2分别为12.6±4.8h及12.4±4.4h;AUC0-t分别为75804.7±34103.4μg/L·h及76752.9±33971.9μg/L·h;AUC0→∞分别为82114.4±43993.4μg/L·h及81567.9±44203.9μg/L·h;受试制剂相对于参比制剂的生物利用度为103.4%±16.6%;90%可信限:Cmax为100.5%~111.8%,AUC0-t为95.5%~109.2%,AUC0→∞为92.4%~107.4%。 结论:(1)建立和确证了一种能同时测定人血浆中二甲双胍、格列齐特浓度的LC/MS/MS方法。方法学确证结果表明,该方法简便可靠,具有特异性强、精密度与准确度高、灵敏度好等特点。 (2)等剂量下二甲双胍格列齐特片(受试制剂)与参比制剂(盐酸二甲双胍片)的二甲双胍具有生物等效性,二甲双胍格列齐特片(受试制剂)与格列齐特片(参比制剂)的格列齐特具有生物等效性。

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