生物药b
1. 药品批准文号中的.Z.H.B.S表示什么
化学药品使用字母“H”,中药使用字母“Z”,通过国家药品监督管理局整顿的保健药品使用字母“B”,生物制品使用字母“S”,体外化学诊断试剂使用字母“T”,药用辅料使用字母“F”,进口分包装药品使用字母“J”。
2. 国药准字后面的字母代表什么有哪几种
国药准字号Z开头代表中药。国药准字号H开头代表西药。
3. 国药准字b属于哪类药
这个问题我之前也有关注过,后来了解到2000年3月7日药品监督管理局(现国家食品药品监督管理总局)发布了关于中药保健药品整顿工作的通知,国药准字B是通过国家药品监督管理局整顿的保健药品,它的使用字母是“B”。“国药准字B”是具有治疗及保健作用的药品,也就是常说的保健药品,但是跟药品相比,一般情况下保健药品的治疗作用会比较弱。
4. 生物制药哪些学校比较好
生物制药硕士研究生主要就是指微生物与生化药学方向.1 中国药科大学 A+ 3 江南大学 A 5 山东大学 A 2 沈阳药科大学 A 4 上海交通大学 A 6 暨南大学 AB+等(10个):福建医科大学、北京中医药大学、南京大学、四川大学、重庆工学院、浙江大学、吉林大学、华东理工大学、武汉大学、广西中医学院B等(9个):天津科技大学、河南大学、武汉工业学院、湖北大学、浙江工业大学、兰州理工大学、南京师范大学、西南交通大学、华南师范大学C等(7个):名单略不过各个综合大学的生命科学院开设的微生物学 分子生物学等二级学科 也有制药的就业方向 就请楼主多留心了
5. 中药、西药、生物药 它们有些什么优点和缺点
网络名片 纤维瘤(fibroma)是来源于纤维结缔组织的良性肿瘤,因纤维瘤内含成分不同而有不同种类,因纤维结缔组织在人体内分布极广,构成各器官的间隙,所以纤维瘤可以发生于体内任何部位.其中以皮肤和皮下组织最为常见,肌膜、骨膜、鼻咽腔及他处粘膜组织以及其它器官如乳腺、卵巢、肾脏等均可发生.大小不等,生长缓慢. 目录 基本概述 纤维瘤(fibroma)多见于皮下,生长缓慢,一般较小、边缘清楚、表面光滑、质地较硬、可以推动.若混有其他成分,则成为纤维肌瘤、纤维腺瘤、纤维脂肪瘤等. 纤维瘤由分化良好的皮下结缔组织构成,多发于40-50岁成人,瘤体生长缓慢,当肿瘤发展至一定程度后一般不再增长.其中纤维瘤、尤其是腹壁肌肉内的硬纤维瘤(desmoid)可恶变,应尽早手术完整切除. 主要类型 纤维瘤有以下几种类型: a.黄色纤维瘤:好发于躯干、上臂近端的真皮层或皮下,常起自外伤或搔痒后的小丘疹,肿块硬,边缘不清,因伴有内出血,含铁血黄素,呈深咖啡色,瘤灶若超过1cm、生长较快,应疑为纤维肉瘤变,手术切除须彻底. b.隆突性皮纤维肉瘤:位于真皮层,突出体表,表面皮肤光滑,形似疤痕疙瘩,好发于躯干,低度恶性,具假包膜,切除后易复发,多次复发恶性度增高,可血行转移,应尽早切除含足够多正常皮肤和深部相邻筋膜的瘤灶. c.带状纤维瘤:腹壁肌肉因外伤或产伤后修复性增生所成,无明显包膜,宜手术切除. 相关症状 肿瘤位于深部组织,无明显自觉症状或稍有不适感.生长缓慢.形状不规则或呈椭圆形,其长径与受累肌纤维方向一致.肿瘤的大小与病程长短有关,直径从数厘米到十几厘米.肿瘤周界不清,表面光滑,无压痛,质坚韧如橡皮.与侵犯肌肉的纵向较固定,而横向稍能移动,与皮肤无粘连.巨大肿瘤可影响活动和压迫神经. 诊断要点 1.可见于全身各部,大、小不等,表面光滑,或呈现头状,可自由推观. 2.亦可见有带蒂者,增大可至数公斤,多松弛悬挂,触之柔软,有色素沉着. 3.据其组织成分与性质,又有软、硬两种特殊类型:软纤维瘤又名皮赘,多见于面、颈及胸背部,有蒂、大小不等、柔软九弹性;硬纤维瘤多发于20—40岁女性,以腹壁多见.为坚硬、无痛、无移动性、与周围组织界限不清的肿物,生长缓慢,无包膜而呈浸润生长.切除后易夏发,且可恶变. 4.病理切片可确定肿瘤性质. 辅助检查 1.诊断该病主要依据症状及体症,尤其是肿物特征; 2.为了与其他病变鉴别,检查专案可包括检查框限"B". 治疗措施 治疗原则 纤维瘤宜早期手术切除,并适当切除相连之周围组织.硬纤维瘤更应行早期广泛切除.术后送病理检查以排除恶性情况,一般不需用药. 纤维瘤由分化良好的皮下结缔组织构成,多发于40~50岁成人,瘤体生长缓慢,当肿瘤发展至一定程度后一般不再增长.属良性肿瘤,很少发生恶变,治疗以手术切除为主. 在治疗的过程中,还应当正确的引导患者心理,让患者对此病有一个清晰的认识,避免患者陷入各种不良的情绪和心理中.同时,应当鼓励患者多参加一些有益运动,尤其是各种户外运动.如:登山,钓鱼等. 手术要点 主要是外科手术广泛切除.放射治疗和应用激素在个别病例可抑制肿瘤生长,但一般认为不能作为主要的治疗手段,可作为无法手术者的姑息治疗. 该症虽具有多次复发的恶性生物学行为,但手术广泛彻底的切除,可杜绝复发. 1.术中冰冻切片检查 大多数病人术前虽已拟诊为本病,但主要根据术中冰冻切片证实. 2.必须广泛切除 切除范围必须有一定的广度及深度.应该包括肿瘤周围3~5cm的正常皮肤,肌肉、肌腱等组织及其深面一定的正常组织.如肿瘤侵及骨膜或腹膜,应一并切除.如肿瘤包绕着重要的血管和神经,应作锐分离,必要时可作血管移植.严重掌握截肢及半骨盆截肢的适应症. 3.必须掌握组织移植的治疗手段 肿瘤广泛切除,常造成局部软组织的缺损及重要组织裸露,必须应用组织移植修复局部.反之,只有掌握了组织移植的治疗手段,方能为肿瘤手术根治创造条件. 修复方法 纤维瘤病广泛切除后,常有肌肉缺损或大血管神经裸露,骨、关节的外露及软骨组织缺损,局部肌皮瓣或肌瓣的修复最为理想. 其优点为: ①血运丰富,易成活. ②操作简便. ③立即一次修复缺损. ④抗感染力强. ⑤组织丰厚,可为良好的衬垫,可起缓冲的作用. ⑥旋转弧度较大,便于各方向的转移,若形成岛状肌皮瓣,可达180º的转位. 兹将好好部位手术后缺损的肌皮瓣修复方法分述如下: 1.臀部肿块根治术后,常有坐骨神经裸露,髂骨外露,均需较厚的组织修复,可采用阔筋膜张肌皮瓣进行立即转移,其营养血管为旋股外侧动脉的横文,从肌肉的上中1/3交界处进入肌皮瓣.肌皮瓣长宽比例可达15*35~40cm,供区一期缝合. 2.股内侧肿块根治术后,较深的软组织缺损或大血管的暴露时,也可采用阔筋膜张肌骨皮瓣修复. 3.股外侧肿块术后,可应用股薄肌肌皮瓣修复,其血管蒂为旋股内侧动脉或股深动脉的分支,从肌肉的上1/3进入该瓣,长宽比例为6*24cm,供区一期缝合. 4.腘窝部肿块切除后,常有腘动静脉及腘神经的外露,时有肿物包绕血管神经束,如能锐性分离神经,钝性分离血管,则肢体就能保留.可应用对侧的腓肠肌内侧头肌皮瓣转移,交腿姿势固定.其血管蒂为腘动脉在膝关节水平分出的腓肠内侧血管,自该肌上极进入肌肉,皮瓣长宽比例可达8*25cm.供区植皮消灭创面. 5.肩胛部好发于大于圆肌肿块切除后,应用下斜方肌岛状皮瓣修复,其营养血管为颈横动脉浅支的降支,皮瓣长宽比例可达10*15cm.供区一期缝合. 6.腹壁肿物切除术后,网织物修补(Nylon Teflon、Dacron、Polyglactin等),皮肤缺损少,可直接拉拢缝合;缺损过多,可应用对侧腹壁浅岛状皮瓣修复,加压包扎. 疗效评价 治愈:肿瘤切除完整. 其他相关 术后复发 根据2000例纤维瘤患者手术后跟踪调查表明,其中术后1年,其中有30%的患者又出现纤维瘤,3年后的占70%,其根本原因还在于: 手术仅仅是一种治标不治本的方法,纤维瘤是沿着人体的中枢神经系统分布的,纤维瘤的复发是不可避免; 手术本身的刺激,也是纤维瘤复发的原因之一,且往往会造成纤维瘤的其他部位转移复发,使治疗更加麻烦、困难. 乳腺纤维瘤 乳腺纤维瘤已成为一种常见的妇科疾病,一般认为与雌激素作用活跃有密切关系,好发于性功能旺盛时期(18至25岁). 在对乳腺纤维瘤进行治疗时可采用药物治疗的方法,药物治疗的基本理论是运用养血柔肝、舒肝理气,软坚散结的治疗原则,均可达到从根本上消除乳房肿块的目的. 乳腺纤维瘤在临床上的分类 (1)巨纤维腺瘤:中年妇女多见,可见于妊娠、哺乳、闭经前后妇女,特点是生长较大,可达10CM以上或更大,偶可有肉瘤变.本病的形成与卵巢功能旺盛,机体和乳房局部组织对雌激素过度刺激的敏感性有关,雌激素水平过高,乳腺组织对其发生局部反应,从而导致本病. (2)青春型纤维腺瘤,大多发生在月经初潮期,临床较少见,特点为生长较快,瘤体较大,病程约在1年左右可占满全乳房,肿块最大径为1-13CM. (3)普通型纤维腺瘤,此型最多见,瘤体小,生长缓慢,一般在3CM以下. 乳腺纤维瘤的治疗方法 1、中药治疗: 缺点是消瘤速度比手术及西药治疗慢,优点是副作用小,抗复发率效果好,能稳定病情不扩散、不转移,去除效果相对较好,目前接受治疗的患者都比较满意. 2、西药治疗或中药加西药治疗:此种方法是一种激素疗法,见效较快,但停药即发,适合手术前的肿物缩小,便于手术,以及适用于生长较快的肿物. 3、手术治疗:由于药物治疗并疗效并不是很理想而且有局限,因此目前都采用手术进行切除.而且现在的手术方法都实行了微创,它手术切口仅为2厘米左右,手术后不影响乳房外观.与传统手术相比,乳腺纤维瘤微创手术还具有不需拆线换药、恢复时间快(一至两天即可恢复)等特点.自我院引进以来,患者好评如潮,当然也是你最佳选择. 纤维瘤的类型分类 a.纤维瘤类型 黄色纤维瘤:好发于躯干、上臂近端的真皮层或皮下,常起自外伤或搔痒后的小丘疹,肿块硬,边缘不清,因伴有内出血,含铁血黄素,呈深咖啡色,瘤灶若超过1cm、生长较快,应疑为纤维肉瘤变,手术切除须彻底. b.纤维瘤类型 隆突性皮纤维肉瘤:位于真皮层,突出体表,表面皮肤光滑,形似疤痕疙瘩,好发于躯干,低度恶性,具假包膜,切除后易复发,多次复发恶性度增高,可血行转移,应尽早切除含足够多正常皮肤和深部相邻筋膜的瘤灶. c.纤维瘤类型 带状纤维瘤:腹壁肌肉因外伤或产伤后修复性增生所成,无明显包膜,宜手术切除. 纤维瘤病人日常注意事项有哪些 纤维瘤病人日常注意事项有饮食要有节制,避免生冷,小食油腻,禁忌辛辣食物,戒除烟酒.注意保暖,避免着凉.个人卫生,勤洗澡,换衣.注意休息,避免剧烈活动,应劳逸结合.防止过渡紧张和劳累:过渡紧张和劳累可导致机体的代谢功能紊乱,疲倦和抗病力下降,故劳逸结合,合理安排工作与休息非常重要.
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6. 生物制药是什么意思
生物制药以天然的生物材料为主,包括微生物、人体、动物、植物、海洋生物等用来制药。
生物药物的特点是药理活性高、毒副作用小,营养价值高。生物药物主要有蛋白质、核酸、糖类、脂类等。用免疫法制得的动物原料、改变基因结构制得的微生物或其它细胞原料等。这些物质的组成单元为氨基酸、核苷酸、单糖、脂肪酸等,对人体不仅无害而且还是重要的营养物质。
(6)生物药b扩展阅读
生物制药在I型糖尿病DNA疫苗的应用
基于B7-1-PE40KDEL外毒素融合基因的DNA疫苗近日获得国际“三方”发明专利授权。该成果是具有完全自主知识产权的原创性成果,也是我国全新治疗性DNA疫苗领域获得的首个国际“三方”发明专利授权,即该成果将在世界上最大的3个市场(美国、欧盟和日本)受到专利保护。
治疗性DNA疫苗特异性强、疗效确切、安全性好、生产成本低,现已成为继单克隆抗体药之后,全球生物制药产业中又一个新的战略制高点。据介绍,该DNA疫苗在前期的动物实验中能有效防治I型糖尿病,纠正I型糖尿病自身紊乱的细胞与体液免疫应答反应,修复损伤破坏的胰岛β细胞,恢复自身胰岛素的分泌。
该疫苗只需在患者皮下或肌肉注射一次,可有效维持疗效近一个月,将大幅度提高该DNA疫苗用药的依从性,避免患者每天用药的麻烦。
7. 生物医药前景如何
一、制药专业就业前景如下:
医药产业已成为世界经济强国竞争的焦点,世界上许多国家都把建立医药品工业视为国家强盛的一个象征。新药的不断发现和治疗方法(如基因研究)的巨大进步,促使医药工业发生了非常大的变化。因此,无论是药品,还是过程技术都需要新型制药工程师,这类人才掌握最新技术和交叉学科知识、具备制药过程和产品双向定位的知识及能力,同时了解密集的工业信息并熟悉全球和本国政策法规。正如前面已经提到的,2003年中国制药企业共5082家,生产药品的工业企业约3000家,生化制药企业300余家,其中现代生物制药企业47家;生产中药(包括天然药物)产品的企业约1600家,其中专门生产中药(包括天然药物)产品的155家。另外,还有药品批发企业16.7万多家,药品零售企业12万家,医疗机构6万家。这些企业都对制药工程专业人才有较大的需求量。
二、制药专业就业方向如下:
从事医药产品的生产、科技开发、应用研究和经营管理等方面工作。
三、培养目标:
本专业培养具备扎实的生物技术和药学基础理论、基本知识,熟练掌握现代生物技术和制药技术的常用实验流程,初步了解生物技术制药企业生产和销售环节的流程,能够胜任现代生物技术实验室和生物技术制药企业岗位基本要求的德、智、体、美全面发展的技术应用型高级实用人才。
8. 典型生物药物的一般制造流程是什么
一般生物制药的主要流程如下:1. 上游阶段
1.1 目的基因的制备
目的工程的主要目的是使优良性状相关的基因聚集在同一生物体中,创造出具有高度应用价值的新物种. 为此必须从现有生物群体中,根据需要分离出用于克隆的次类基因,这样的基因称之为目的基因. 基因工程中获得的目的基因主要用于: (1).研究该基因,分析其结构,功能和表达的调空机制 (2).和正常基因比较,找出基因的异常点,探索疾病发生的分子生物学基础. (3).研究生物种系的进化 (4).建立基因疗法,将正常基因引入病人体内,治疗遗传性疾病(5).大量表达某种基因,生产出需要的蛋白和多肽 (6).对某些基因进行改选,改良动植物品种.
不同基因组类型的基因组大小不同,基因组和基因排列也各不相同,因此,分离目的基因应采用不同的途径和方法
1.1.1 构建cDNA基因文库分离法
cDNA文库是以真核细胞中分离纯化出所有的mRNA,在以mRNA为模板合成cDNA与适当的载体重组转入宿主细胞,这样建立起来的cDNA重组分子集合体称为cDNA文库.而cDNA文库中插入片段的总和可代表某一种生物全部的mRNA序列.
1.1.1.1 cDNA文库的构建
构建cDNA文库主要包括以下步骤: (1).细胞总RNA的制备及mRNA的分离 (2).以mRNA为模板,合成cDNA第一条链 (3).双链cDNA的合成,而将mRNA—DNA杂交分子转变为双链cDNA分子 (4). CDNA与载体的连接和噬菌体颗粒的包装及传染或质粒的转化等
1.1.1.2 cDNA克隆的优越性
自20世纪70年代初说创cDNA克隆问世以来,以采用构建和筛选cDNA文库的方法克隆了许多目的基因的cDN**段.在基因工程操作中,也长以cDNA为探针从基因文库中分离相应的基因克隆.因此, cDNA克隆常常以基因分离和结构分析的着手点,在分子生物学研究和基因工程应用等方面具有十分重要的意义.
1.1.2 构建基因组文库分离法
1.1.2.1 基因组文库的概念
将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段,分别与适合的载体重组后导入宿主细胞,这些重组分子中插入片段的总和可代表该生物全部基因组序列.这种通过重组,克隆方法保存在宿主细胞中的各种DNA重组分子的集合体称为基因组文库.
1.1.2.2 基因组文库的大小
克隆片段的平均大小/bp 基因组的大小/bp
2×10^6(细菌) 2×10^7(真菌) 3×10^9(动物)
LN SJ LN SJ LN SJ
5×10^3 400 1831 4000 18418 600000 2736110
10×10^3 200 919 2000 9208 300000 1381550
20×10^3 100 458 1000 4603 150000 690774
40×10^3 50 278 500 2300 75000 345386
一个理想的基因组文库因该是在克隆群体中包含完整基因组的所有DNA序列.这就要求在打断基因组DNA时尽可能做到随机切割,实际上,无论采用什么方法的不能达到理论上的切割.应此构建的基因组文库应包含的克隆子数理论值和经验值之间相差比较大.几类基因组文库的大小见下表: 「2」
1.1.2.3 构建基因组文库的类型
通过克隆,重组方法构建的基因组文库主要有:
(1)构建λ噬菌体基因组文库;(2)构建考斯质粒基因组文库
(3) 构建YAC基因组文库
1.1.3 直接分离法
1.1.3.1 限制性核酸内切酶酶切分离法
限制性核酸内切酶酶切分离法适于简单基因组中分离目的基因。质粒和病毒等DNA分子小的只有几千碱基,大的也不超过几万碱基,编码的基因较少,获得的目的基因方法比较简单。
1.1.3.2 基因分离的物理化学法
这是基因工程在发展初期所用的方法,某些生物的rDNA基因最早都是利用该法分离获得的,但目前很少采用。次方法主要有:密度梯度离心法、单链酶解法和分子杂交法等。1.1.3.3 双抗体免疫法分离编码蛋白的基因
双抗体免疫法分离编码蛋白的基因适于某一真核细胞的蛋白质已被分离纯化,且足以产生抗体。
1.1.3.4 利用酶促反转录发直接从特定mRNA分离基因
酶促反转录主要用于合成分子质量较大,转录产物mRNA易分离目的基因。
目的基因的mRNA为模板 逆转录酶 cDNA DNA聚合酶双链 双链cDN**段
与合适载体重组并转入受体菌 cDNA克隆
1.2 目的基因的分离
通过适当的方法构建上一个完整的基因组DNA文库或CDNA文库,意味着包含目的基因在内的所有基因都得以克隆,但并不等于完成了目的基因的分离。因为在基因文库中,不论是CDNA文库还是基因组文库,含目的基因的克隆子都只是数以万计的克隆子中的一个,其中究竟哪个克隆子含有我们所需要的目的基因序列还不清楚。因此,还需要下一个步骤要进行的就是目的基因的分离,主要方法有:
(1)目的基因的功能克隆 (2)序列克隆法
(3)利用差示分析法分离目的基因克隆 (4)功能结合法筛选目的基因
(5)DNA插入诱变法分离目的基因(6)应用基因定位克隆技术分离筛选目的基因
(7)基因的定位侯选克隆法(8)染色体显微切割与微克隆法
(9)根据生物大分子内的相互作用分离目的的CDNA克隆
(10)筛选目的基因片段的差别杂交及减法杂交技术
1.3 基因克隆载体
载体是携带目的基因的DN**段进入受体细胞进行扩增和表达的工具。常用的载体是经过改造的细菌质粒,噬菌体,黏粒和病毒
1.3.1 质粒克隆载体
质粒是细菌染色体外的双链环状的能自我复制的小分子DNA,其对细胞本身的生长繁殖不是必需的,但可以赋予细菌一定的类型,如耐热型等。
与构建克隆载体相关的质粒性质有:
(1) 粒的复(2) 制型(2)质粒的不(3) 相容性
(3)质粒的接合性
(4)质粒作为基因工程载体需要具备的条件:作为基因工程载体的质粒都是经过人工改造过的质粒,具备以下特点:
a, 相对分子质量小3—10kb b, 是松弛型复制质粒
c, 是非接合型质粒 c, 质粒上有多个限制酶的单一切点
d, 带有双选择标记
1.3.2 病毒(噬菌体)克隆载体
病毒主要由DNA(或RNA)和外壳蛋白组成,经包装后成为病毒颗粒。通过感染,病毒颗粒进入宿主细胞,利用宿主细胞的合成系统进行DNA(或RNA)复制的壳蛋白质的合成,实现病毒颗粒的增殖。人们利用这些性质构建了一小列分别适用于不同生物的病毒克隆载体。通过此种方法构建成的基因克隆载体主要有:
(1) 噬菌体克隆载体cosmid克隆技术(黏粒)(2)Μ13噬菌体克隆载体
(2) aMV克隆载体(4)烟草花叶病毒( TMV)载体克隆
(5)SVCO克隆载体(6)反转录病毒克隆载体
(7)腺病毒克隆载体(8)痘苗病毒克隆载体
(9)杆状病毒表达克隆载体
1.3.3 其他类型的克隆载体
(1)染色体定位整合克隆载体(2)人工染色体克隆载体
(3) 特殊用途克隆载体:如启动子探针型,(4) 诱导型,(5) 反义表达组织特异表达,(6) 分泌型表达,(7) 双启动子,(8) 串族启动子和含增强子表达克隆载体等等
1.4 目的基因和载体的连接(重组)
目的基因和载体连接前要先用同一种限制酶将目的基因和载体切割成黏性端或平端,也可以用物理方法切割后再用酶补成平端
体外连接是基因工程的重要环节,体外连接要减少载体的自身环化,提高重但子阳性率。主要的连接方法有:黏性末端连接、平端连接、定向插入和同源多聚尾。
1.5 重组体导入受体细胞
外源目的基因与载体在体外连接重组后形成重组的DNA分子。该重组DNA分子必须导入适宜的受体细胞在中才能使外源目的基因得以大量扩增或表达。随着基因工程的发展,从低等的原核细胞,到简单的真核细胞,进一步达到结构复杂的高等动,植物细胞都可以作为基因工程的受体细胞。选择适宜的受体细胞已经成为重组基因高效克隆或表达的基本前提之一
1.5.1 受体细胞的选择要求
目的基因获得后,必须在合适的宿主细胞中才能进行表达,才能获得目的产物.应此,宿主细胞必须满足:容易获得较高浓度的细胞;能利用易得廉价的材料;不致病、不产生内毒素;发热量低,需氧低,适当的发酵温度和细胞形态;容易进行代谢调控;容易进行DNA重组技术操作技术;产物的产量、产率高,产物容易提取纯化.
1.5.2 受体细胞的类型
人们通过研究,根据需要获得了一定的目的产物,而目的基因能否的到有效的表达,关键在与受体细胞的选择.
1.5.2.1 原核生物细胞
由于原核生物作为基因工程受体具有其他生物所没有的优点,而且人们对其遗传背景清楚,所以早期开展的基因工程操作,都是以原核生物为受体细胞.目前研究比较多的有:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌等.
1.5.2.2 真核生物细胞
由于真核生物的细胞结构、基因组成和基因表达较为复杂,适用于原核生物的转基因方法大多数难以有效地用于真核生物.近年来经过探索,发现它可以对表达的蛋白质进行翻译后加工过程,有利于保持天然结构和生物活性.并用这些方法有效的获得了转基因真核生物.研究较多的有:酵母菌、哺乳动物细胞、昆虫细胞、植物细胞等等.
1.5.3 重组子的筛选
在重组DNA分子的转化、转染和转导过程中,并非所有的的受体细胞 都能被导入重组DNA分子.一般仅有少数重组DNA分子能进入受体细胞,同时也只有极少数的受体细胞在吸纳重组DNA分子之后能良好增殖.因此,如何将被转化细胞从大量受体菌细胞中初步筛选出来,然后进一步检测到含有期待重组DNA分子的克隆子将直接关系到基因克隆和工程操作红极为重要的环节.
重组子的筛选可以根据载体的类型、受体细胞种类以及外源DNA分子导入受体细胞的手段等采用不同的方法,一般包括以方面:
(1).遗传直接筛选法; (2),核算分子杂交检测法; (3)依赖于重组子结构特征分析的筛选法;
(4)免疫化学检测法; (5)转译筛选法; (6)亚克隆法; (7)插入失活法;
(8)电子显微镜作图检测法; (9)基因表达产物分析法; (10)DNA序列分析法.
1.6、外源基因的表达
基因工程技术的核心是基因表达技术。迄今为止,已构建了多种基因表达系统,包括原核生物和真核生物基因表达系统,不同的表达系统具有各自的特点。
1.6.1 基因表达的机制(过程)
1.6.1.1 外源基因的起始转录
外源基因在宿主细胞中的有效表达是基因工程的核心问题,而外源基因的起始转录又是基因表达的关键。
1.6.1.2 mRNA的延伸与稳定性
外源基因起始转录后,保持mRNA的有效延伸、终止及稳定存在是外源基因有效表达的关键。
mRNA的稳定性直接导致决定翻译产物的多少,对原核细胞来说,最佳的方法是选择一个RNase缺失受体前。对真核细胞来说则需考虑增加mRNA的正确加工,提高成熟mRNA的稳定性。
1.6.1.3 外源基因mRNA的有效翻译
翻译是mRNA指导多肽链生成的过程,翻译的起始是多种因子协同作用的过程,其中包括mRNA,16SrRNA,fMet-tRNA之间的碱基配对,还有mRNA序列上的终止密码对正确翻译的效率有很大影响。
1.6.1.4 表达蛋白在细胞中的稳定性
外源基因的表达产物能否在宿主细胞中稳定积累而不被内源蛋白水解酶所水解是基因有效表达的一个重要因素,因此,为了避免此现象的发生可从以下几个方面考虑:
(一)构建融合蛋白表达系统; (二)构建分子体蛋白表达系统;
(三)构建包涵体表达系统; (四)选择蛋白水解酶基因缺陷型的受体系统.
1.6.1.5 目的基因沉默
基因沉默是导致外源基因不能正常表达的重要因素。它的作用机制主要有三种:位置效应的基因沉默、转录水平的基因沉默和转录后水平的基因沉默。基因沉默现象主要表现在转基因动物和植物中。
目的基因沉默是在核酸水平上DNA与DNA,DNA与RNA,RNA与RNA相互作用的结果。由于重复序列或同源系列是基因沉默的普通原因之一,因而在构建表达载体时,应尽可能避免与内源序列具有较高的同源性。此外,可以通过选择甲几基化酶活性较弱的受体细胞或以化学物质处理受体细胞抑制甲基化作用。
1.6.2 基因表达的调控元件
通过研究发现主要的基因表达调控元件有:启动子、增强子、终止子、衰减子、绝缘子和反义子
1.6.3 外源基因表达系统
外源基因表达系统泛指目的基因与表达载体重组后,导入合适的受体细胞,并能在其中有效的表达,产生目的基因产物(目的蛋白)。由此可知,外源基因表达系统由基因表达载体和相应的受体细胞两部分组成。基因表达系统有原核生物表达系统和真核生物表达系统。目前,利用较多的是原核生物表达系统,因其遗传背景清楚,繁殖快,表达率高等特点。近年来,真核生物基因表达系统发展很快,因其可以对表达的蛋白质进行翻译后加工过程,有利于保持天然结构和生物活性等优点。目前主要应用的表达系统有:大肠杆菌基因表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统、蓝藻表达系统、酵母表达系统、哺乳动物细胞基因表达系统、植物细胞基因表达系统;还有最新研究的两个新的表达系统[3]:巴斯德毕赤酵母表达系统和动物乳腺生物反应器——全新的生产模式。
2、下游阶段
基因工程只要的过程关键在于上游阶段,因它可以获得有效的工程菌,但下游纯化阶段也必不可少。因此为了获得合格的目的产物,必须建立相应的医药生物技术产品的分离纯化工艺。
2.1、基因工程菌发酵:
良好的发酵工艺对表达外源蛋白至关重要,直接影响下游纯化工艺,形象到产品的质量和生产成本,决定产品在市场上的竞争力。目前,基因工程菌培养常用方法有:补料分批培养、连续培养、透析培养、固定培养。近年来,生物药品已进入生物技术时代,对基因工程菌的培养设备要求十分严格,主要采用新型自动化发酵罐。
2.2、分离纯化的基本过程:
分离纯化是基因工程药物生产中极其重要的
一环,这是由于工程菌经过大规模培养后,产生的
有效成分含量低,杂质含量高;另外由于基因工
程药物是从转化细胞,而不是从正常细胞生产的,
所以对产品的纯度要求也高于传统产品,主要的
步骤如右表:[4]
2.2.1、建立分离纯化工艺根据
主要根据:(1)含目的产物的起始物料特点;
(2)物料中杂志的种类和性质;
(3)目的产物特性;
(4)产品质量的要求.
2.2.2、选择分离纯化方法的依据:
主要依据:
(1) 根据产物表达形式来选择;
(2) 根据分离单元之间的衔接选择;
(3) 根据分离纯化工艺的要求来选择.
2.2.3、常用的分离纯化方法(见下表)[5]
方法 目的
离心/过滤 去除细胞、细胞碎片、颗粒性杂质(如病毒)
阴离子交换层析 去除杂质蛋白、脂质、DNA和病毒等
阳离子交换层析 去除牛血清蛋白或转铁蛋白等
超滤 去除沉淀物及病毒
疏水层析 去除残余的杂蛋白
凝胶过滤 与多聚体分离
0.22μm微孔滤膜过滤 除菌
3、基因工程药物:
自20世纪80年代初第一种基因工程产品——人胰岛素投放市场以来,以基因工程药物为主导的基因工程应用已成为全球发展最快的产业之一。随着生物技术的快速发展,基因工程药物将拥有越来越广阔的发展前景。基因工程药物主要包括细胞因子、抗体、疫苗、激素和寡核苷酸药物等,它对预防和治疗人类的肿瘤、心血管疾病、遗传病、各种传染病、糖尿病、类风湿疾病等有重要作用。
3.1、基因工程激素类药物
激素是一类由生物体内分泌腺或特异性细胞产生的微量有机物,通过体液或细胞外液运送到特定的作用部位,能引起特殊的生理效应。基因工程的激素类主要指通过基因工程方法合成的蛋白多肽类激素。目前被批准上市的激素类药物有胰岛素、人生长激素、人促卵泡激素等。
3.2、基因工程细胞因子类药物
细胞因子是由细胞分泌的能够调节生物有机体生理功能,参与细胞的增殖,分化和凋亡的小分子多肽类物质。目前被批准上市的产品有十多种。主要有:干扰素(IFN)、集落刺激因子(CSF)、白细胞介素(IL)、肿瘤坏死因子(TNF),趋化因子和生长因子(GF)等。它们的生物学功能主要表现为:调节免疫应答、抗病毒、抗肿瘤、调节机体造血功能和促进炎症反应等。
3.3、基因工程疫苗:
直接利用微生物制备疫苗来治疗疾病取得了巨大的成就,但由于各种传染病在世界范围内广泛存在,并不断有新的致病微生物被发现,它们对人类的健康造成巨大威胁。利用基因工程方法制备疫苗对控制传染病的复发和治疗新的传染病有重要意义。目前研究的基因工程疫苗包括:痢疾菌苗、霍乱菌苗、结核菌苗、流感菌苗、狂犬病疫苗、疟疾疫苗、口蹄疫疫苗。
3.4 特殊基因工程药物—防御素
防御素是一类在生物界广泛存在的、富含半胱氨酸,具有微生物和一些恶性细胞抗性的小分子短肽.它的抗性谱十分广泛,目前以发现它不但对细菌、真菌和被膜病毒(如爱滋病病毒)有广泛的毒杀效应,对某些恶性肿瘤细胞也有毒杀作用.最近,对一些长期存活的爱滋病感染者的研究发现,他们体内的爱滋病抑制因子就是一类防御素.这一研究发现给人们战胜爱滋病带来希望.
4. 基因工程研究发展前景
基因工程问世以来短短的二十几年,显示出了巨大的活力,使传统的生产方式和产业结构发生了变化.特别是在医药行业,利用人工的方法合成了许多有用的药物及人体器官等,取得了很大的经济效益.今后,基因工程将重点开展基因组学、基因工程药物、动植物生物反应器和环保等方面的研究.通过这方面的研究、开发,对人类的生活、生存环境从根本上优化做出巨大的贡献.因此,我们相信基因工程的前景将是更加灿烂辉煌.
9. 这个国药准字b属于哪类药品呢
国药准字B的批准文号,严格的说是药品,只不过之前是保健品,但经过审批和临床试验,把它审批成了药品,有正规的批准文号, H代表化学药品,Z代表中成药,S代表生物制品,而“国药准字B”是具有治疗及保健作用的药品,无论是中药还是西药,只要临床证明没有毒副作用,都是可以申请“国药准字B”的批号。不过有些不法商家,会肆意夸大国药准字B类药品的治疗作用,这个是大家需要注意的。
10. 国药准字是B开头的属于哪类药
国药准字B的药品是保健品,但由于有确切的治疗作用而上升为国药准字的药品,按照药品进行管理