微生物涂片
做痰检能检查出痰里的细菌(比如结核杆菌),但不会检查出病毒(因为病毒颗粒太小,普通光学显微镜检测不出来)。
结核病检查的痰检一般要三种痰:即时痰,夜间痰,早晨痰,这样三个痰作成玻片通过抗酸染色后在显微镜下查找结核菌。
还有一个查痰的方法就是做痰培养:可根据需要进行需氧菌培养、厌氧菌培养、结核杆菌培养或真菌培养,用于呼吸道感染的病因诊断。痰培养的理论依据是致病菌应高于污染菌,据此,对痰液进行定量培养和办定量培养。常与药物敏感试验一起进行。
『贰』 微生物涂片染色法计数计算方法
测定微生物细胞数目的方法有很多,介绍几种
1.血细胞计数法
将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上,在显微镜下计算4~5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再以此为依据,估算总菌数.
①此法的缺点是不能区分死菌和活菌.
②对压在小方格界线上的细菌,应当取平均值计数.
③此法可用于测定培养液中酵母菌种群数量的变化
2.稀释涂布平板法
原理:每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落.培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌.
①这一方法常用来统计样品中活菌的数目
②统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是当两个活多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落.因此统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示.
③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含细菌、酵母、芽孢与孢子等的数量均可用此法测定.但不适于测定样品中丝状体微生物,例如放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等的营养体等.
④此法若不培养成菌落,可通过将一定量的菌液均匀地涂布在玻片上的一定面积上,经固定染色后在显微镜下计数,这样又称涂片计数法.染色可用台盼蓝,台盼蓝能使死细胞染成蓝色,可分别计数死细胞和活细胞.
3.滤膜法
滤膜法是当样品中菌数很低时,可将一定体积的湖水、海水或饮用水灯样品通过膜过滤器.然后将滤膜干燥、染色,并经处理使膜透明,再在显微镜下计算膜上(或一定面积上)的细菌数.
此法也可以通过培养观察形成的菌落数来推算样品中的菌数.例如测定饮用水中大肠杆菌的数目:将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养.在该培养基上大肠杆菌的菌落呈现黑色,可根据培养基上黑色菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数目.
此法也是统计样品中活菌的数目.
4.比浊法
原理是在一定范围内,菌是悬液中细胞浓度与混浊度成正比,即与光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可借助与分光光度计,在一定波长下,测定菌悬液的光密度,以光密度表示菌量.实验测量时一定要控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内,否则不准确.
5.显微镜直接计数法
在课本生物选修1生物技术实践P22中“除了上述活菌计数法外,显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法.”这里说的显微镜直接计数,我认为应该是在稀释涂布的基础上不培养成菌落而通过染色的方法在显微镜下直接计数.再如滤膜法也一样,可以有两种情况.
另外,微生物计数法发展迅速,多种多样的快速、简易、自动化的仪器和装置等方法可以用来统计微生物的数目.
『叁』 制作微生物涂片要自然干燥
说是这么说的,但是实验中这样很慢的,其实可以微微加热的,我们一直都这样做,没什么影响的!!
『肆』 微生物镜检涂片步骤
单染色来法,以观察菌体形态为主。自
1、把泡在酒精中的片子用镊子夹出,放在酒精灯上点燃,去掉片子上的酒精及油脂。
2、片子冷却后,蘸一接种环发酵液,均匀地涂在片子上。
3、涂后的片子,于酒精灯火焰上过几遍,使所涂的细菌固定在片子上,注意,片子温度不易过高,以不烫手背为主,温度过高,会使菌变形,影响观察结果。
4、片子涂菌的位置,滴几滴结晶紫染液,使染液完全覆盖住所涂的菌,染1分钟左右。
5、用水冲洗片子至无紫色水流下后,进行火焰烤干。
6、镜下观察。在涂点处滴1滴香柏油,于油镜下观察菌体形态。
『伍』 微生物镜检涂片步骤
涂片是将微生物培养物涂在载波片上,用来观察死的微生物。微生物版刚放到波片上是活权的,但经过固定步骤就将其杀死了。如果涂片太厚,就难以观察单个细胞,如果太薄,就可能找不到微生物。如果将涂片时搅动太厉害,又会破坏原来细胞的排布。涂片后应使其完全风干。然后将其快速通过火焰3~4次,这个过程成为热固定。若固定主要目的有三个:1.杀灭微生物,2.使微生物黏附在载波片上,3.使菌体跟容易染色。如果载波片还没在完全风干的时候将其在火焰上移动,菌体就会煮沸二被破坏。如果热固定不够,菌体就无法粘在载波片上,在后续步骤中容易被冲洗掉。
『陆』 微生物涂片实验时,用嘴吹气为什么没有杂菌的污染!
涂片都是在空气中进行的,嘴吹的气菌总数不多,相对你载玻片上的菌数来说可完全忽略不计,故没什么影响。个人意见。
『柒』 医学检验微生物室细菌涂片的制备及常用染色法
用的最多的有,抗酸萋尼氏染色,抗酸荧光,革兰氏染色,六鞍银染色等。现在都有商品化试剂,不需自制。
『捌』 微生物制片时是不是都要进行涂片
一般是的,有的标本还需要进行组织固定,用福尔马林固定效果更好,再进行涂片、切片,有需要请惠存http://www.jnbo.com/rencai.html
『玖』 在进行微生物制片时是否都需要进行涂片为什么
涂片是将微生物均匀分散开,微生物个体微小数量多,许多物种经常成团生长,不利于观察,涂片可以将微生物分散成单层,利于镜检.