从土壤中分离微生物
1. 怎样从土壤中筛选微生物
原理: 目前尚无一种培养基可以养出所有的微生物,但我们可以设计一种培养基,其组成份适合所要分离的微生物,而不利其他微生物的生长,如此一来,即使我们想分离的微生物为数不多,也可以将它们分离出来,这就是选择性培养基。本实验就是使用选择性培养基来分离土壤微生物,并计数它们的数量以及观察在不同的选择性培养基下,菌落型态的差异。
材料:分离细菌之培养基:TSA(Tryptic Soy Agar)、1/10 TSA 并分别添加100 ppm cycloheximide;分离放线菌之培养基:Alkaline Water Agar、Starch-Casein Agar并分别添加100 ppm cycloheximide;分离真菌之培养基:PDA(Potato Dextrose Agar)添加Triton X-100 (1 mg per mL)及100 ppm streptomycin sulfate、MRB(Martin’s Rose Bengal)再加入30 ppm streptomycin sulfate; (cycloheximide为抑制真核细胞蛋白质合成之抗生素,请小心使用)、9毫升0.85%生理食盐水、玻璃弯棒、酒精灯、少许农地表土。
步骤:
1. 配制选择性培养基。
2. 秤过筛农土 1克置入9毫升生理食盐水中,充分震汤混合,接著作10倍连续稀释至适当的稀释度。
3. 取0.1毫升稀释液涂抹於不同的选择性培养基平板上。分离细菌取104、105及106倍稀释之稀释液;分离放线菌取103、104及105倍稀释之稀释液;分离真菌则取102、103及104倍稀释之稀释液。
4. 涂抹过稀释液之平板置於28℃培养箱中培养,按时观察并记录菌数、菌落型态、真菌孢子的颜色等。
5. 另外,秤10克湿土置入玻璃烧杯中,於105℃下烘乾至恒重,将烧杯连烘乾後的土放入乾燥器中,冷却至室温後秤重,即可知每克湿土的乾重。将平板上的菌数除以乾重,就可以知道每克乾重土壤的菌数。
6. 以t-test 做统计比较,细菌在相同养分但不同浓度下(TSA、1/10TSA)的数目有无差异;另外由分离放线菌的平板,纯化 5个菌落型态不同之菌株,同时保留由真菌平板上所筛得的绿黴菌(Trichoderma spp.),作为下次实验的材料。
2. 如何从复杂的土壤样本中分离我们所需要的目标微生物
如何从复杂的土壤样本中分离我们所需要的目标微生物?
有机肥之中有机质的分解转化是一个复杂的过程,微生物活动在分解转化过程之中起着重要作用。土壤环境非常适合微生物活动,所以土壤之中天然微生物数量最多。因为土壤之中微生物种类繁多,数量大;一克土壤之中,微生物有几十种到几百种,几亿到几十亿个,土壤微生物繁殖迅速,在有机质的转化和分解之中起着重要作用。土壤微生物包括细菌、放线菌、真菌和藻类。
(1)细菌
细菌是一种单细胞微生物,是土壤之中分布最广、数量最多的微生物。细菌有三种基本形态:球形、杆状和螺旋形;有球菌、杆菌和螺旋体(40种);包括弧菌&41;三种类型。土壤细菌按其营养类型可分为自养菌、兼性自养菌和异养菌。
(2) 真菌
土壤真菌分布广泛,适应广泛的酸性条件,在PH4.0条件之下生长良好,对森林土壤有机质的转化起着重要作用。土壤真菌是异养的。它们必须从土壤有机质之中获取能量和碳源,并在发育过程之中需要良好的供氧。根据真菌与树木的关系及其营养类型,真菌可分为腐生真菌、寄生真菌和共生真菌。
(3) 放线菌
放线菌是细长的菌丝体,呈分枝状或放射状。它们在土壤之中仅次于细菌。大多数是腐生植物。许多放线菌能分解纤维素、淀粉、脂肪、木质素和蛋白质。
3. 如何从土壤中分离纯化某种微生物
先取土样,然后提纯稀释,放在选择培养基上。例如分离纯化能分解纤维素的微生物,就放在以纤维素为唯一碳源的培养基上。能存活的就是你要的了。
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4. 从土壤中分离微生物稀释多少倍就可以了
这个不一定,因为不同环境和条件下的土壤中微生物的种类和数量也不同,不能一概而论。
一般是作多个不同稀释度的稀释液,如从100倍到10万倍,分别进行平板划线培养,每个稀释度至少做三个平行。总会有一到两个稀释度的平板上有合适的菌落。
如果在100倍稀释度的平板上也没有或基本没有菌落,那就再降低稀释倍数,甚至要先用全营养液体培养基进行富集培养,然后再稀释分离。
5. 如何从土壤中分离得到一个微生物的纯培养体
首先你需要确定你分离的是什么微生物,然后按照以下步骤
1.
选择合适的富集培养基,加入土壤把目标菌属富集
2.
选择合适的选择性培养基把目标菌属分离出来。
3.
通过稀释平板涂布,培养三天后,观察不同的菌落,在平板反面用记号笔编号不同的菌落。
4.
把标记的菌落在培养基上划线分离,每一个编号划线三个平板
5.
待平板长出单菌落后,显微镜镜检,观察目标菌是否单一。
单一菌落即为微生物的纯培养体。
6. 从土壤中能分离出哪些微生物
生活在土壤中的微生物。一般包括细菌、放线菌、真菌、藻类、原生动物、病毒及类病毒。
7. 如何从污水(或土壤)中提取微生物
把污水加蒸馏水分别稀释10,100,1000倍,然后加入培养基中培养,如果培养出来菌落重合,菌非常多,无法分离,就加大稀释倍数,直至获得清晰可分离的菌落,有时甚至是非常小的菌落,要用倒置显微镜操作。而培养基则根据要分离的菌的营养类型进行配置,若要获得多种微生物就要配置多种培养基进行如上操作。对于土壤加水溶解,对溶解液进行如上操作,不溶的部分就不用管了
8. 《微生物问题》如何从土壤中分离微生物(霉菌,细菌,放线菌等)
1.取以少许土壤(一地表以下10cm处为宜)与适量无菌水混匀备用
2.做浸出液的梯度稀释
3
.涂平板
4.划线分离
5.接平板,接斜面
6.检测
9. 从土壤中分离与食品工业有关的微生物的过程
从土壤中分离微生物的过程,实际就是利用不同选择培养基逐步筛选微生物的过程,具体怎么设计培养基,是根据你最终的目的来决定的。
10. 怎样分离土壤中的细菌
这个工作量很大
首先是将土壤用生理盐水洗,再用低转速离心,取上层液体
然后要明确你需要的菌种,设计或查找培养基,并配好后面灭菌
菌液稀释到一定比例后涂布或者划线到铺有培养基的平板上,或者以一定比例接入液体培养基。用什么形式的培养基取决于你需要分离的菌
放置与培养箱中培养若干小时
以上为初筛,下面需要进一步复筛,
挑出你需要的菌落,再改进培养基,重复以上步骤
直到完全筛选出目的菌落
以上为自己想出的方案,本人正好是微生物专业,个人认为,动手之前的准备工作要做好,注意多查文献,多了解目的菌种的特点,采用最快捷的方法
祝你成功