化学感受态

Ⅰ DH5α感受态细胞 哪位用过哪家的好一些啊

博凌科为生产的DH5а感受态细胞是采用大肠杆菌DH5а菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA 的化学转化。使用pUC19 质粒检测，转化效率可达108 ，－70 ℃ 保存几个月转化效率不发生改变。每支感受态可以酌情分装使用，降低了实验的成本。质量稳定，使用方便，质优价廉。储存的条件：-70 ℃ 保存，避免反复冻融。我们用了很久了，对于实验室来说还是比较容易储存的，也很方便。

Ⅱ 电击法制备感受态细胞的方法与化学法的不同点是什么

受体细胞经过一些特殊方法（如：电击法，CaCl2等化学试剂法）处理后，使细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源DNA分子通过的感受态细胞。进入细胞的DNA分子通过复制、表达实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。

大肠杆菌的转化常用化学法（CaCl2法），该法最先是由Cohen于1972年发现的。其原理是细菌处于0℃，CaCl2的低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形，转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面，经42℃短时间热冲击处理，促使细胞吸收DNA复合物，在丰富培养基上生长数小时后，球状细胞复原并分裂增值，被转化的细菌中，重组子中基因得到表达，在选择性培养基平板上，可选出所需的转化子。

Ca2+处理的感受态细胞，其转化率一般能达到5×106~2×107转化子/ug质粒DNA，可以满足一般的基因克隆试验。如在Ca2+的基础上，联合其它的二价金属离子（如Mn2+、Co2+）、DMSO或还原剂等物质处理细菌，则可使转化率提高100~1000倍。

化学法简单、快速、稳定、重复性好，菌株适用范围广，感受态细菌可以在-70℃保存，因此被广泛用于外源基因的转化。

除化学法转化细菌外，还有电击转化法，电击法不需要预先诱导细菌的感受态，依靠短暂的电击，促使DNA进入细菌，转化率最高能达到109~1010转化子/ug闭环DNA。因操作简便，愈来愈为人们所接受。

Ⅲ 感受态细胞（细菌），什么是感受态细胞

野生型E.coli并不容易转化，这是由于细菌产生一种酶能迅速降解进入的外源DNA。经过多年的努力，科学家们发现了一种方法可以增加细胞吸收外源DNA的效率。那就是用化学方法处理细胞，使其改变膜对DNA的通透性。这种细胞就称为感受态细胞，即细胞处于能摄入核酸分子时的生理状态。这种方法已经成为基因工程的常规技术，它对于我们利用体外DNA重组技术来了解真核和原核生物的基因功能特别重要。细菌的转化有两种类型：一种是自然转化（natural transformation），在自然转化中细菌可以自由地吸收DNA，通过它来进行遗传转化；另一种是工程转化（engineered transformation），在这种转化中，细菌发生改变使得它们能摄入并转化外源DNA。枯草杆菌中的转化属于自然转化，E.coli转化就属于工程转化。

Ⅳ 如何制作转化效率高的BJ5183化学感受态

DH5α F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rk- mk), λ– 1. An Hoffman-Berling 1100 strain derivative (Meselson68) 2. nalidixic acid resistant _________________________________。

Ⅳ 什么是感受态

是指一种容易接受外源DNA的状态。在转基因的过程中，一般会把待转化的宿主细胞处理成为感受态，以提高转化的效率。

Ⅵ 将目的基因导入大肠杆菌常用什么处理细胞,使其成为感受态

Ca ²⁺ 处理法能使大肠杆菌细胞的生理状态发生改变，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，故将目的基因导入大肠杆菌，应采用感受态细胞法，即用氯化钙处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞．
故选：C．

Ⅶ 博凌科为的JM109感受态细胞能否用于DNA 的化学转化，效果好不好

可以的，而且效果很不错，我们实验时用了，确实是很好。博凌科为生产的JM109感受态细胞是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA
的化学转化。使用pUC19
质粒检测，转化效率可达108
，－70
℃
保存几个月转化效率不发生改变。每支感受态可以酌情分装使用，降低了实验的成本。质量稳定，使用方便，质优价廉。

Ⅷ 制备高效率感受态的方法是什么

楼主你好： 液氮或低温冰箱中取出的大肠杆菌*E.COLI DH5, JM109,HB101等,在LB平板上划线,37度过夜至长出单菌落.挑直径1-3毫米的单菌落*可多个, 接种到250毫升/3升锥形瓶 或80毫升/1升锥形瓶的SOB培养基. 培养基量不可再多,会影响效率.在18度 150-250RPM 培养19-50小时*没有冷却摇床的可在室温, 但不可高于37度.OD600约0.4-0.8时停止培养, 放在冰水中冷却10分钟4度, 300RPM离心15分钟, 更多质量检测、分析测试、化学计量、标准物质相关技术资料请参考国家标准物质中检所网站，进口标准物质请参考 http://www.rmhot.com/plist_5/plist_5_20_0_1.html 。 回收菌体去掉上清后, 用1/3体积的冰冷TB溶液悬浮, 在冷10分钟再次离心回收菌体用1/12.5体积的TB悬浮, 添加最终浓度为7%的DMSO, 再冷却10分钟0.1-1毫升分装, 直接在液氮中冻上.在液氮或-80度保存.TB溶液*TRANSFORMATION BUFFERPIPES 3.0G 10mMCaCl2.2H2O 2.2g 15mMKCl 18.6g 250mMadd water up to 950ml用 5N KOH 调PH至6.7-6.8*低PH不溶在加终浓度未55mM的MnCl2.4H2O 10.9g定溶到1升, 过滤灭菌, 4度保存.但有人提出, 冻存后转化效率降低, 且这种方法不适合大质粒.【zihudie】 （1）将置于液氮保存的大肠杆菌划线在LB平板上，37℃培养活化。 （2）挑取经活化的大肠杆菌单菌落于SOC液体培养基，18℃，200-250rpm培养。 （3）当OD600=0.5-0.8时，用预冷的40mL离心管于4℃，8000rpm离心10min，收集菌体。 （4）用预冷的TB Buffer重悬菌体，4℃，8000rpm离心10min，收集菌体。 （5）重复第4步操作。 （6）用8mL预冷的TB Buffer重悬菌体，缓慢加入DMSO至终浓度7% 。 （7）冰浴10min后，分装保存于液氮中。本法效率极高,建议大家采纳【yog】1. 单菌落-------2ml LB 37度 120RPM过夜------1%转接-------37度 200RPM2小时(OD到0.4~0.5)2. 2ml, 冰浴15min, 4度, 6000RPM 5min, 弃上清, 悬浮于1ml0.1MCaCl2中, 冰浴20min3. 4度, 6000RPM 10min, 重悬浮于200ul 0.1MCaCl2中, 冰浴30min建议用TSS法，简单方便，比氯化钙法的转化效率高.别的菌可能不一定适用。 以下为转贴，具体方法请最好查阅文献。E.coli感受态细胞制备方法:单菌落平板至2ml LB, 37 oC 250 r/m ovn, 1ml 转至50 ml LB, 37oC 250 r/m至 A600=0.2-0.4离心后用10毫升TSS重悬后,分装 -70oC保存。尽量冰上操作.转化: 加质粒(<5 ul/100ul cell) 后冰上30分钟，42oC 90秒，冰上2分钟，加LB至1ml, 37oC 1小时后铺抗生素平板。
求采纳