生物測定法
⑴ 肝素生物測定法
羊血漿的配置 將羊血漿直接收集於質量分數為8%的檸檬酸三鈉溶液的容器中(以頸動脈放血為好),檸檬酸三鈉與羊血漿的比例為1:19,邊收集邊搖動,迅速於離心機上分離血漿。取1ml血漿於試管中,加0.2ml 1%氯化鈣溶液混勻,若5分鍾內有血塊出現,則此血漿可用。將血漿分裝多份,每體積不超過100ml。裝入一個200ml的容量瓶中,在-1- -20度結冰。-8度保存。
一般使用的專用 羊血漿 制備過程就不需要親自參與了。,希望上述的過程能解決你的疑問。
⑵ 常用的測定做生物生長的方法有哪幾種
常用測定微生物生長的方法有:
1)稱乾重法.可用離心法或過濾法測定.優點:可適用於一切微生物,缺點:無法區別死菌和活菌.
2)比濁法.原理:由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定.優點:比較准確.
3)測含氮量,大多數微生物的含氮量占乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量.
4)血球計數板法.優點:簡便、快速、直觀.缺點:結果包括死菌和活菌.
5)液體稀釋法.對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查MPN表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量.優點:可計算活菌數,較准確.缺點:比較繁瑣.
6)平板菌落計數法.取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數.優點,可以獲得活菌的信息.缺點:操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響.
⑶ 微生物測定法的方法分類
液體稀釋法
在一組試管中分別加入一定的培養基,然後加入不等量的被測物質,再將已培養好的、用於測定的微生物接種進去,在規定的條件下培養一定時間,觀察其消長情況並與標准曲線對比,計算出被測物質的含量。
固體平板擴散法
將溶化的固體培養基與被測定微生物混合做成平板,把含不等量被測物質的液體滴入置於平板上(直接滴樣法);或注入平板上的牛津杯內(管碟法);或吸入圓形濾紙片後,再置於平板上(紙片法);也可以在平板上挖一定大小的圓孔,然後把被測物滴入孔內(打孔法);經培養後在物質擴散所及的范圍內出現抑菌法(或生長圈),測量圈的直徑,並與標准曲線對比,計算出被測物質的含量(見圖[固體平板擴散法 1、3、7 打孔法2、8紙片法4、6管碟法5直接滴樣法][])。
1932年,A.弗萊明在研究溶菌酶和青黴素時,開始使用微生物法測定抗生素的活性。1940年,E.B.錢恩等根據平板上抑菌圈的大小測定青黴素的活性含量。後又經E.P.亞伯拉罕等進一步將上述測定方法予以完善。測定抗生素時常用的微生物有大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、啤酒酵母、黑麴黴等。1935年,W.H.肖普費最先用微生物測定維生素B。1939年,E.E.斯內爾和F.M.斯特朗用乳桿菌測定維生素的含量。1934年,K.A.凱肯等用阿拉伯聚糖乳桿菌測定9種氨基酸。此後,乳桿菌屬、鏈球菌屬、明串珠菌屬的成員及某些微生物的變異株,逐漸成為最常使用的對象。
⑷ 微生物測定法的介紹
微生物測定法是指在規定條件下選用適當微生物測定某物質含量的方法。被測定的物質可以是某些生物生長所必需的維生素、氨基酸等,也可以是抑制某些微生物生長的抗生素、農葯等。常使用的有液體稀釋法和固體平板擴散法。
⑸ 什麼是生物鑒定法
生物鑒定法是利用某些生物對某些物質(如維生素、氨基酸)的特殊需要,回或對某些物質(如激素、植答物激素、抗生素、葯物等)的特殊反應來定性、定量測定這些物質的方法。如用小鼠的驚厥反應測定胰島素,用微生物測定維生素B12等。生物測定有時比其他測定方法更為靈敏和專一。它是生物學、醫學、特別是毒理學的重要內容和基礎。
⑹ 生物醫學測量法的步驟有哪些
這個他其實是有槍的一個流程可以直接搜索一下,他的一個使用方法都是沒有問題的。
⑺ 生物學效價的測定方法
(一)生物試驗法,這是一種以仔雞為試驗對象,以某一磷酸鹽為參照物,用斜率比法測定磷酸鹽RBV的方法,已被廣泛使用。同一磷源的RBV測值常常是各不相同的,造成這一現象的原因之一是試驗條件存有差異。對其測定方法加以比較後可知,基礎日糧、飼養方式、試驗期、試驗動物和評定指標等都會影響測值。
(二)同位素示蹤法,同位素32P示蹤法試驗周期更短,一般不需要2~4周時間,但耗資更大,對小動物試驗來說不太經濟,而且用同位素世蹤測定礦物元素的表觀消化率意義不大,因為糞中排出的礦物質既混有未吸收的,也有內源性的。
⑻ 測定微生物的生物量有哪些主要方法
聖才學習網為您解答:
1.直接計數測定 根據微生物種類,有血球計數板和細菌計數板;或者用電子計數器計數
2.比濁法 根據菌懸液的濃度在一定范圍內與光密度成正比,可以用分光光度計測OD值,用OD值表示樣品菌液濃度
3.核酸計數法 熒光定量PCR技術
4.活菌計數法 MPN和平板計數法
由於測定方法的限制,前幾種計數結果不太准確,目前應用廣泛的是第四種
對糞大腸菌群和光合細菌可用MPN,對其他微生物可用平板計數法
⑼ 生物年代測定法哪個准確
考古里的碳十四測年法,就是根據碳依四衰變的程度來計算出樣品的大概年代的一種測量方法。 碳依四是碳元素的一種具放射性的同位素,它是透過宇宙射線撞擊空氣中的氮原子所產生。碳-依四原子核由陸個質子和吧個中子組成,其半衰期約為5,漆三0±四0年。由於在有機材料中含有碳-依四,因此根據它的衰變可以確定考古學樣本的大致年代。 碳十四測年法的原理在於,碳依四由於受到宇宙射線中子對碳依四原子的作用,不斷地形成於大氣上層。它在空氣中迅速氧化,形成二氧化碳並進入全球碳循環。動植物一生中都從二氧化碳中吸收碳依四。當它們死亡後,立即停止與生物圈的碳交換,其碳依四含量開始減少,減少的速度由放射性衰變決定。放射性碳定年本質上是一種用來測量剩餘放射能的方法。通過了解樣品中殘留的碳依四含量,就可以知道有機物死亡的年齡。 這一原理通常用來測定古生物化石的年代。
碳十四年測年法由美國加州大學伯克利分校博士威拉得·利比發明,威拉得·利比也因此獲得依9陸0年諾貝爾化學獎
⑽ 生物利用度有哪兩種測定方法
目的:(1)建立和驗證同時測定人血漿中二甲雙胍、格列齊特濃度的LC/MS/MS方法。 (2)以深圳市中聯制葯有限公司研製的二甲雙胍格列齊特片為受試制劑,以市售格列齊特片(深圳市中聯制葯有限公司生產)及鹽酸二甲雙胍片(中美上海施貴寶制葯有限公司生產)為參比制劑,應用LC/MS/MS法,研究受試制劑與參比制劑的二甲雙胍、格列齊特人體生物利用度和生物等效性。 方法:(1)LC/MS/MS方法建立與確證:以乙腈為血漿蛋白沉澱劑對人血漿樣本進行處理,選用石杉鹼甲為內標物,以甲醇/水(含1%甲酸)/乙腈(30/31/39,v/v/v)為流動相、HypersilBDSC18為色譜柱;通過電噴霧電離(ESI)源正離子選擇反應監測(SRM)掃描方式進行LC/MS/MS分析,同時測定人血漿中二甲雙胍、格列齊特的濃度,並根據相關指導原則進行特異性、標准曲線、回收率、精密度與准確度、穩定性等方面的方法學確證。 (2)二甲雙胍格列齊特片人體生物利用度和生物等效性試驗研究:20例健康成年男性受試者隨機分組,自身對照,單次空腹口服葯物(鹽酸二甲雙胍片500mg及格列齊特片80mg或二甲雙胍格列齊特片500mg/80mg×2)。應用已確證的LC/MS/MS法測定受試者血漿中二甲雙胍和格列齊特的濃度,根據所得血漿濃度-時間數據計算各主要葯代動力學參數。 結果:(1)建立了同時測定人血漿中二甲雙胍、格列齊特濃度的LC/MS/MS方法,方法學驗證結果表明,該方法特異性好,無內源性雜質干擾。二甲雙胍在7.8~4678.9μg/L范圍線性良好,定量下限為7.8μg/L;格列齊特在10~10000μg/L范圍線性良好,定量下限為10μg/L。二甲雙胍批內RSD為5.8%~8.2%,批間RSD為5.1%~7.3%;格列齊特批內RSD為7.5%~10.7%,批間RSD為8.1%~12.5%。二甲雙胍的平均提取回收率為71.0%~83.6%,平均相對回收率為96.1%~109.4%;格列齊特的平均提取回收率為88.1%~104.0%,平均相對回收率為91.5%~103.7%。血漿樣品在室溫放置4h,二甲雙胍偏差為-11.0%~-6.5%,格列齊特偏差為7.9%~10.6%。血漿樣品凍融2次,二甲雙胍偏差為-2.1%~2.7%,格列齊特偏差為10.0%~11.3%。血漿樣品提取液在室溫放置12h,二甲雙胍偏差為0.8%~5.6%,格列齊特偏差為-3.5%~1.8%。血漿樣品冰凍(-30℃)39d,二甲雙胍偏差為-16.7%~7.4%,格列齊特偏差為-1.6%~11.8%。 (2)二甲雙胍格列齊特片人體生物利用度和生物等效性試驗研究結果:參比制劑與受試制劑二甲雙胍的Cmax分別為1161.7±307.9μg/L及1264.4±275.0μg/L;Tmax分別為1.9±1.0h及2.0±0.8h;t1/2分別為4.6±0.9h及4.1±0.6h;AUC0-t分別為7132.9±1956.1μg/L·h及7758.5±2096.4μg/L·h;AUC0→∞分別為7287.3±1988.9μg/L·h及8063.6±2069.0μg/L·h;受試制劑相對於參比制劑的生物利用度為111.2%±23.6%;90%可信限:Cmax為101.7%~119.4%,AUC0-t為99.8%~118.5%,AUC0→∞為99.9%~123.3%。參比制劑與受試制劑格列齊特的Cmax分別為4958.8±771.2μg/L及5266.7±880.2μg/L;Tmax分別為3.9±0.8h及3.5±1.0h;t1/2分別為12.6±4.8h及12.4±4.4h;AUC0-t分別為75804.7±34103.4μg/L·h及76752.9±33971.9μg/L·h;AUC0→∞分別為82114.4±43993.4μg/L·h及81567.9±44203.9μg/L·h;受試制劑相對於參比制劑的生物利用度為103.4%±16.6%;90%可信限:Cmax為100.5%~111.8%,AUC0-t為95.5%~109.2%,AUC0→∞為92.4%~107.4%。 結論:(1)建立和確證了一種能同時測定人血漿中二甲雙胍、格列齊特濃度的LC/MS/MS方法。方法學確證結果表明,該方法簡便可靠,具有特異性強、精密度與准確度高、靈敏度好等特點。 (2)等劑量下二甲雙胍格列齊特片(受試制劑)與參比制劑(鹽酸二甲雙胍片)的二甲雙胍具有生物等效性,二甲雙胍格列齊特片(受試制劑)與格列齊特片(參比制劑)的格列齊特具有生物等效性。