化學發光技術
一、 化學發光免疫分析簡介
化學發光免疫測定是目前世界公認先進的標記免疫測定技術，化學發光 免疫分析技術具有高度的准確性和特異性，成為檢驗方法中最為重要的技術之一。 化學發光 免疫分析技術作為疾病診斷的主要手段已被廣泛用於機體免疫功能、傳染性疾病、內分泌功能、腫瘤標志物、 性激素、甲狀腺功能 等方面的體外診斷實驗中。
化學發光是一種特異的化學反應，有機分子吸收化學能後發生能級躍遷，產生一種高能級的電子激發態不穩定的中間體，當其返回到基態而發出光子，即為化學發光。將化學發光與抗原抗體相結合而形成的免疫分析技術，即為化學發光免疫分析。
化學發光的發光類型通常分為閃光型（flash type）和輝光型（glow type）兩種。閃光型發光時間很短，只有零點幾秒到幾秒。輝光型又稱持續型，發光時間從幾分鍾到幾十分鍾，或幾小時至更久。閃光型的樣品必須立即測量，必須配以全自動化的加樣及測量儀。測量輝光型的樣品可以使用通用型儀器，也可以配全自動化儀器。 泰格科信的化學發光免疫分析診斷試劑 發光類型 為 輝光型 。
化學發光免疫分析（Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）是近十年來在世界范圍內發展非常迅速的非放射性免疫分析。它具有高靈敏度、檢測范圍寬、操作簡便快速、標記物穩定性好、無污染、儀器簡單經濟等優點。它是放射性免疫分析與普通酶免疫分析的取代者，是免疫分析重要的發展方向。CLIA發展迅猛，已佔各種免疫分析的首位 ，是目前放射免疫分析和酶聯免疫分析最佳的取代者。
二、 化學發光免疫分析的 優勢 ：
1、 靈敏度高
靈敏度高 是 化學發光免疫分析 關鍵的優越性，其靈敏度可達 10 -16 mol/L （ RIA 為 10 -12 mol/L ）。 化學發光免疫分析能夠檢出放射免疫分析和酶聯免疫分析等方法無法檢出的物質，對疾病的早期診斷具有十分重要的意義。
2、 寬的線性動力學范圍
發光強度在 4 ～ 6 個量級之間與測定物質濃度間呈線性關系。這與顯色的酶免疫分析吸光度（ OD 值）為 2.0 的范圍相比，優勢明顯。雖然 RIA 也有較寬的線性動力學范圍，但放射性限制了其應用。
3、 光信號持續時間長
輝光型的 CLIA 產生的光信號持續時間可達數小時甚至一天。簡化了實驗操作及測量。
4、 分析方法簡便快速
絕大多數分析測定均為僅需加入一種試劑 （ 或復合試劑）的一步模式。
5、 結果穩定、誤差小
樣品系直接自己發光，不需要任何光源照射，免除了各種可能因素（光源穩定性、光散射、光波選擇器等）給分析帶來的影響，使分析結果靈敏穩定可靠。
6、 安全性好及使用期長
免除了使用放射性物質。到目前為止，還未發現其危害性；試劑穩定，保存期可達一年。
三、市場前景
化學發光免疫分析法作為非放射性的免疫分析法，具有靈敏度 高、所需時間短、無污染、檢測范圍寬等特點，隨著各種自動發光分析儀器面市，以及不同類型的化學發光免疫分析試劑盒的不斷推出，使得檢測項目更多，檢測速度提高，這些勢必推動化學發光免疫分析的迅速發展， 成為時間分辨、放射免疫和酶聯免疫分析的取代者，將成為檢驗的主流。 使實驗室更好、更快地為臨床服務
⑵ 什麼叫化學發光
化學發光的原理
化學發光是物質在進行化學反應過程中伴隨的一種光輻射現象，可以分為直接發光和間接發光。直接發光是最簡單的化學發光反應，有兩個關鍵步驟組成：即激發和輻射。如A、B兩種物質發生化學反應生成C物質，反應釋放的能量被C物質的分子吸收並躍遷至激發態C*，處於激發的C*在回到基態的過程中產生光輻射。這里C*是發光體，此過程中由於C直接參與反應，故稱直接化學發光。
間接發光又稱能量轉移化學發光，它主要由三個步驟組成：首先反應物A和B反應生成激發態中間體C*(能量給予體)；當C*分解時釋放出能量轉移給F(能量接受體)，使F被激發而躍遷至激發態F*；最後，當F*躍遷回基態時，產生發光。
一個化學反應要產生化學發光現象, 必須滿足以下條件: 第一是該反應必須提供足夠的激發能, 並由某一步驟單獨提供, 因為前一步反應釋放的能量將因振動弛豫消失在溶液中而不能發光; 第二是要有有利的反應過程, 使化學反應的能量至少能被一種物質所接受並生成激發態; 第三是激發態分子必須具有一定的化學發光量子效率釋放出光子, 或者能夠轉移它的能量給另一個分子使之進入激發態並釋放出光子。
化學發光分析測定的物質可以分為三類：第一類物質是化學發光反應中的反應物；第二類物質是化學發光反應中的催化劑、增敏劑或抑制劑；第三類物質是偶合反應中的反應物、催化劑、增敏劑等。這三類物質還可以通過標記方式用來測定其他物質，進一步擴大化學發光分析的應用范圍。
化學發光反應的發光類型通常分為閃光型（flash type）和輝光型（glow type）兩種。閃光型發光時間很短，只有零點幾秒到幾秒。輝光型又稱持續型，發光時間從幾分鍾到幾十分鍾，或幾小時至更久。
⑶ 化學發光是什麼技術
化學發光是物質在進行化學反應過程中伴隨的一種光輻射現象，可以分為直接內發光和間接發光。直接發光是最容簡單的化學發光反應，有兩個關鍵步驟組成:即激發和輻射。如A、B兩種物質發生化學反應生成C物質，反應釋放的能量被C物質的分子吸收並躍遷至激發態C*，處於激發的C*在回到基態的過程中產生光輻射。這里C*是發光體，此過程中由於C直接參與反應，故稱直接化學發光。
間接發光又稱能量轉移化學發光，它主要由三個步驟組成:首先反應物A和B反應生成激發態中間體C*(能量給予體);當C*分解時釋放出能量轉移給F(能量接受體)，使F被激發而躍遷至激發態F*;最後，當F*躍遷回基態時，產生發光。
⑷ 化驗單上什麼叫做化學發光
化學發光是物質在進行化學反應過程中伴隨的一種光輻射現象，可以分為直接發光和間接發光。直接發光是最簡單的化學發光反應，有兩個關鍵步驟組成：即激發和輻射。
如A、B兩種物質發生化學反應生成C物質，反應釋放的能量被C物質的分子吸收並躍遷至激發態C*，處於激發的C*在回到基態的過程中產生光輻射。這里C*是發光體，此過程中由於C直接參與反應，故稱直接化學發光。
間接發光又稱能量轉移化學發光，它主要由三個步驟組成：首先反應物A和B反應生成激發態中間體C*（能量給予體）；當C*分解時釋放出能量轉移給F（能量接受體），使F被激發而躍遷至激發態F*；最後，當F*躍遷回基態時，產生發光。
(4)化學發光技術擴展閱讀
依據供能反應的特點，可將化學發光分析法分為：
1）普通化學發光分析法（供能反應為一般化學反應）；
2）生物化學發光分析法（供能反應為生物化學反應；簡稱BCL）；
3）電致化學發光分析法（供能反應為電化學反應，簡稱ECL）等。
根據測定方法該法又可分為：
1）直接測定CL分析法；
2）偶合反應CL分析法（通過反應的偶合，測定體系中某一組份）；
3）時間分辨CL分析法（即利用多組份對同一化學發光反應影響的時間差實現多組份測定）；
4）固相、氣相、液相CL分析法；
5）酵聯免疫CL分析法等。
參考資料來源：網路-化學發光法
參考資料來源：網路-化學發光
⑸ 化學發光分析法的簡介
化學發光與其它發光分析的本質區別是體系產生發光 ( 光輻射 ) 所吸收的能量來源不同。體系產生化學發光，必須具有一個產生可檢信號的光輻射反應和一個可一次提供導致發光現象足夠能量的單獨反應步驟的化學反應。
化學發光Western 雜交檢測，是同位素檢測的一種高度靈敏的替代方法。酶標記抗體取代了放射性標記抗體， 當它作用於底物時，可產生光信號。多數特異抗原檢測方法以辣根過氧化物酶(HRP)或鹼性磷酸酶(AP) 二級抗體 耦聯物為基礎。信號可通過感光膠片或專用的成像設備來採集。化學發光底物用於免疫印跡技術已有十幾年的歷史，大部分實驗室做轉印時都會採用化學發光技術進行檢測。隨著冷CCD化學發光檢測技術的發展，越來越多的實驗室都開始採用冷CCD的凝膠成像系統進行化學發光的檢測，膠片成像雖然比自然發光法靈敏度更高，但也有很多缺點：耗時，需要暗房，顯影劑和膠片，膠片較貴且為需持續購買的消耗品。同時由於膠片的線性范圍較窄，因此用膠片上的條帶（特別是表達量較低的條帶）進行定量幾乎不可能。冷CCD技術與X膠片相比具有瞬時影像處理、高靈敏度和高解析度、動力范圍廣等優點，因此能對條帶進行精確定量。當然這項技術要求底物能產生高強度長持續時間的信號，以保證信號能被冷CCD的凝膠成像系統捕獲。在這方面多家公司都提供了相應的化學發光底物或試劑盒，特別是Bio-Rad Immun-Star™ AP 化學發光試劑盒 、bio-rad Western-C化學發光檢測試劑盒等。Western-C化學發光檢測試劑盒底物可產生高強度的持續光信號24小時，因此用戶可以進行多次曝光，最低可檢測至10-19mol，配合Bio-Rad屢獲大獎的化學發光成像系統ChemiDoc XRS或VersaDoc系統能得到得到高質量的印記信號 。
⑹ 化學發光免疫分析原理是什麼
化學發光免疫分析包含兩個部分，即免疫反應系統和化學發光分析系統。化學發光分析系統是利用化學發光物質經催化劑的催化和氧化劑的氧化，形成一個激發態的中間體，當這種激發態中間體回到穩定的基態時，同時發射出光子(hM)，利用發光信號測量儀器測量光量子產額。免疫反應系統是將發光物質(在反應劑激發下生成激發態中間體)直接標記在抗原(化學發光免疫分析)或抗體(免疫化學發光分析)上，或酶作用於發光底物。
化學發光免疫分析根據其所採用的標記物的不同可分為發光物標記、酶標記和元素標記化學發光免疫分析三大類。發光物標記的CLIA是以發光物質代替放射性核素或酶作為標記物(如吖啶酯)，在反應體系中發光物質在鹼性介質中氧化時釋放大量自由能，產生激發態的中問體，該激發態的中間體由最低振動能級回到穩定的基態，各個振動能級產生輻射時，同時產生能量，多餘的能量即為發射光子，從而產生發光現象。利用發光信號的測量儀器，分析接收的光量子產額，通過計算機系統轉換成被測物質的濃度單位。在此系統中包含兩個部分，化學發光反應系統和免疫反應系統，即在抗原一抗體特異性反應過程中，伴隨有化學反應過程而產生光的發射現象。化學反應系統中以化學反應為基礎，化學發光的首要條件是吸收了化學能而處於激發態的分子或原子必須能釋放出光子或者能將能量轉移到另一個物質的分子上並使這種分子激發，當這種分子回到基態時釋放出光子。
化學發光與熒光的根本區別是形成激發態分子的激發能原理不同。熒光是發光物質吸收了激發光後使分子產生發射光；化學發光是化學反應過程中所產生的化學能使分子激發產生的發射光。因此，化學發光反應過程必須產生足夠的激發能是產生發光效應的重要條件。化學發光反應可在氣相、液相或固相反應體系中發生，以液相發光在免疫學檢測中最常應用。
⑺ 化學發光免疫分析法有哪三類
1、直接化學發光，標記物為吖啶酯（雅培）或者ABEI（新產業）
2、酶促化學發光，標記物為鹼性磷酸酶（廈門波生）或者辣根過氧化物酶（強生）
3、電化學發光，標記物為三聯吡啶釕（羅氏）
註：括弧內為代表廠家。
⑻ 化學發光免疫分析技術和免疫熒光技術的區別
化學發光是利來用化學反應自產生的能量促使產生能級躍遷，從而發光，典型的如魯米諾檢測血跡；熒光是一種光致發光現象，必須提供光源去激發分子產生能級躍遷，進而發光。
使用上述兩種方法進行免疫分析時，其區別很明顯，化學發光無需外加光源，背景干擾小；而熒光則需要外加光源，在垂直光源的方向上檢測，生物樣品中的蛋白質、氨基酸等分子也會產生背景熒光，背景稍高一些，需要選擇合適的熒光試劑，以及樣品處理方法以減少非特異性吸附蛋白的影響。
⑼ 化學發光是什麼技術
化學發光是指能量來自於化學反應引起的發光。相對於化學發光的生物發光，是指能量來自於酶促催化下的生化反應引起的發光。化學發光作為一種分析工具的吸引之處就在於檢測的簡單性。化學發光的實質是自身發光，這意味著化學發光的分析測試儀器只需要提供一種可以檢測光信號和紀錄結果的方法就可以了。
簡單的說，化學發光
(ChemiLuminescence
，簡稱為
CL)
分析法是分子發光光譜分析法中的一類，它主要是依據化學檢測體系中待測物濃度與體系的化學發光強度在一定條件下呈線性定量關系的原理，利用儀器對體系化學發光強度的檢測，而確定待測物含量的一種痕量分析方法。
發光技術的應用：
Ø
鈣流檢測
Ø
活性氧分析
Ø
發光免疫分析
Ø
基因調控（Luciferase
報告基因）
Ø
蛋白質相互作用（BRET,生物發光共振能量傳遞）
BRET是細胞內實時分析蛋白質－蛋白質相互作用的工具。