微生物鉴定系统

1. 多重食源性致病菌核酸检测系统与微生物鉴定系统一样吗

多重食源性致病菌核酸检测系统与微生物鉴定系统一样
1 传统生物学方法，按照标准检测，最麻烦，最传统，但是最经典，可作为其他方法之验证。
2 显色培养基方法，用国外进口显色培养基检测，比较方便，目前最流行，使用简单，也不贵。
3 胶体金试纸条检测，购买国外进口试纸条，现场检测，这种方法10分钟可以检测到结果。但是检测灵敏度偏低。
4 ELISA，酶联免疫实验。目前只有国外进口，欧美四家大公司垄断了全球95%以上的市场，一个96孔试剂盒，售价高达5000-6000元，非常无奈，但是是国外最流行的快速筛选技术，检测灵敏度、检测周期都比较理想，不过国内现在有公司专业在做这方面的试剂盒了，估计价格很快会降下来，可能是将来主流的检测技术了，部分已经写进国标了。
5 IC-PCR，免疫捕捉PCR，用抗体特异性识别捕捉，之后再PCR扩增。最大的优势是，病原经过抗体识别、PCR检测双重检测，可一次鉴定到种，检测灵敏度可以达到十的两次方，不用核酸提取，所有反应在一个PCR管里进行，减少了病原的损失，缺点是检测时间大致在4个小时，是一张理想的验证手段。
6 Direct-PCR，增菌后直接PCR，比较简单的验证手段，增菌后直接扩增，受PCR检测体系的现实，灵敏度偏低，但是取决于样品中的菌含量。
7 Nested-PCR，两对引物巢式PCR。两对引物两次扩增，最大的优势是检测准确性、灵敏度可绝对保障，劣势是检测时间较长。
8膜过滤PCR，利用病原富集装置，富集之后检测，最笨的一种方法，但是是最实用的，病原经过微孔滤膜过滤后，可高效富集病原 ，之后去检测，大大提高检测灵敏度。
9 BIO-PCR，培养增菌后PCR扩增，这个技术只能做研究用了，就是分离培养后，用PCR检测，乏善可陈。
10 IMS-PCR，免疫磁珠PCR，用免疫磁珠捕捉，之后进行PCR，用磁珠富集样品中的病原，之后直接PCR扩增，非常实用的方法，主要是可以富集病原。
11 BAX快速检测系统，按照系统说明书操作。贵族实验室用的东西，灵敏度和其成本、假阳性一样出色。
12 RiboPrinter快速检测系统，按照系统说明书操作。同上，大同小异。

2. 什么是微生物鉴定

自动微生物鉴定系统是传统的微生物鉴定主要参考《伯杰式细菌鉴定手册》和《真菌鉴定手册》，鉴定过程繁琐，耗时长，容易出错，对经验要求非常高。
商品化的自动微生物系统有效地解决了这个问题，目前自动微生物鉴定系统从原理上包括以下几种：
1)基于表型的鉴定方法：如美国Biolog公司的Microstation和Omnilog自动微生物鉴定系统，基于95种碳源或化学敏感物质的利用为原理，可鉴定细菌、酵母和霉菌超过2650种；另外还有基于脂肪酸鉴定的方法，采用气相色谱分析微生物细胞壁的脂肪酸构成；在临床领域，梅里埃、BD、热电和西门子都有相应的自动微生物鉴定系统，其数据库主要以鉴定致病菌为主，通常是200-600种数据库，可做药敏测试；
2)基于基因型的鉴定方法：如基因测序法及基因条带图谱法，以Life和杜邦为典型代表。
3)基于蛋白的鉴定方法：以布鲁克和梅里埃为代表，基于蛋白质飞行质谱平台，分析不同高度保守的微生物核糖体蛋白电解离后的电子飞行时间进行鉴定。
三类方法各有优缺点，理论上不冲突，应该互为补充，应根据需要进行选择。

3. biolog微生物鉴定系统

Biolog微生物鉴定步骤
一 检测原理

Biolog微生物鉴定系统测试的是微生物在鉴定板中利用或氧化化和物的能力。测试会产生特征性的紫色孔模式，组成代谢指纹。所有必需的营养物质和生化试剂都预先加进96孔板中，四唑紫是一种氧化还原染料，指示碳源的利用情况。.鉴定步骤非常简单，纯化分离到的菌株经扩大培养，再制成接种液加到鉴定板中。在培养过程中，一些孔中的化学物质能被氧化并将显色物质成紫色，对照孔（A-1）和阴性孔仍然为无色。鉴定板在相应的培养条件下培养4-6小时或16-24小时即可形成代谢模式。系统软件自动和数据库对比，如果能找到合适的匹配，就可以得出一个鉴定结果。

二 所需器材和消耗品：

培养基、接种液、巯基乙酸钠、长棉签、接种棒、储液槽、八道移液器、移液器头、浊度仪、浊度标准品、控温培养箱和相应的鉴定板。其中接种液自行配制，接种棒、储液槽可选用国产品牌代替。

三 鉴定步骤：

Biolog微生物鉴定样品处理步骤
分离纯化培养基
BUG+B
通用培养基加羊血
BUA+B
厌氧培养基加羊血
BUY
酵母培养基
2%ME
2%的麦芽汁提取物

革兰氏染色和菌落菌株形态观察
革兰氏染色结果
革兰氏阴性
革兰氏阳性
厌氧菌
酵母菌
丝状真菌
确认实验
氧化酶反应阳性
氧化酶反应阴性、三糖铁实验A/A或K/A
需在巧克力培养基上或需要6.5% CO2培养

确认实验
氧化酶反应阴性、三糖铁实验K/K或K/Aw
微生物类型
GN-NENT
非肠道菌
GN-ENT
肠道菌
GN-FAS
苛生菌
GP-COCCUS-ROD杆球菌、GP-COCCUS球菌、GP-ROD杆菌
GP-ROD
（芽孢杆菌）
AN
厌氧菌
YT
酵母菌
FF
丝状真菌
扩大培养基
BUG+B
BUG+B
巧克力培养基
BUG+B
BUG+M+T
BUA+B
BUY
2%ME
培养温度
30℃
35-37℃
35-37℃
35-37℃
30℃
35-37℃
26℃
26℃
培养气体
空气
空气
6.5% CO2
空气或6.5% CO2
空气
无氢气的厌氧环境
空气
空气
接种液类型
GN/GP-IF
GN/GP-IF+T
GN/GP-IF+T
GN/GP-IF+T
GN/GP-IF
AN-IF
水
FF-IF
接种浊度/
浊度标准管
52%T
GN-NENT
61%T
GN-ENT
20%T
GP-COC&GP-ROD&GN-FAS
20%T
GP-COC&GP-ROD&GN-FAS
28%T
GP-ROD SB
65%T
AN
47%T
YT
75%T
FF
鉴定板类型/
每孔菌悬液的量
GN2
150μl
GN2
150μl
GN2
150μl
GP2
150μl
GP2
150μl
AN
100μl
YT
100μl
FF
100μl
培养时间（小时）
4-6,16-24
4-6,16-24
4-6,16-24
4-6,16-24
4-6,16-24
20-24
24,48,72
24,48,72,96

第一步：
在用户自己的培养基上纯化菌株，如果菌株为冻干或冷冻样品，需要传代培养2-3代，让菌株恢复活力。
对纯化好的菌株做革兰氏染色，确定菌株是革兰氏阴性还是阳性。观察菌落外部形态或用显微镜观察菌株形态，确定是酵母还是丝状真菌，是球菌还是杆菌。
如果是革兰氏阴性菌，还需要最终确认是肠道菌、非肠道菌或苛生菌。方法是，氧化酶阳性或氧化酶阴性但三糖铁实验为K/K或K/Aw，则该菌株为非肠道菌(GN-NENT)，氧化酶阴性以及三糖铁实验为A/A或K/A，则该菌株为肠道菌(GN-ENT)。如果菌株①需要在巧克力培养基上或需要6.5% CO2培养，②在BUG+B培养基上生长非常差，形成针尖大小的菌落，那么可以认为这些菌是苛生菌(GN-FAS)。大多数苛生菌都是从哺乳动物的呼吸道里分离出来的，如Actinobacillus, Alysiella, Brucella, Capnocytophaga, CDC Group DF-3, CDC Group EF-4, Eikenella, Haemophilus, Kingella, Moraxella, Neisseria, Simonsiella, Suttonella,和Taylorella。
如果是革兰氏阳性菌，用革兰氏染色可以很容易的区分球菌和杆菌，推荐再做一个过氧化氢酶实验，最终确定是球菌还是杆菌。通过革兰氏染色或观察菌落形态可以区分出芽孢杆菌。
微生物的扩大培养应该用Biolog推荐的培养基和培养条件，以便使微生物达到最佳的代谢活性，进而准确的和数据库中的代谢模式匹配。
微生物应该是新鲜的，确保其处于指数增长期，因为一些菌株在达到稳定期时会失去生存能力或代谢活性，推荐的培养周期为4-24个小时。
如果扩大培养的量不足以配制相应的浊度，可以培养多个平板，培养时间可以延长到48个小时。
第二步：
首先确定浊度仪没开启电源的时候，指针应指在0%，如果没有，用螺丝刀调整。开启电源，取未开盖的装有接种液的试管，擦干净管壁，放入浊度仪，指针应指在100%，如果没有，旋动右方旋钮。然后用浊度标准管检验，读数在±2%都是正常的。要使用哪管接种液，就用相应的试管做100%校正，不要在浊度仪的光路中旋转试管。
 在鉴定革兰氏阴性肠道菌和苛生菌的时候，在接种液里应该加准确三滴巯基乙酸钠。巯基乙酸钠的作用是抑制芽孢形成，并且可以部分或完全的抑制A-1或其它孔由于微生物利用自身分泌的聚多糖荚膜而出现的紫色。一些非肠道菌液需要添加巯基乙酸钠。
按照下列步骤制备均匀的菌悬液：用接种液将棉签稍微浸湿，用棉签在菌落上面轻轻的滚动可以将菌落取到接种液中，从而不会将培养基或其它营养物质带入接种液。先取单菌落，不够再取生长紧密的菌落。在试管内壁接种液液面的上方，旋转挤压棉签可以将菌落团分散。然后上下移动棉签，将分散的菌落和接种液充分混合形成均一，无菌团的菌悬液。如果菌悬液有菌团，可以让菌团沉到管底。
 调整浊度直至达到允许的范围，增加接种液或添加菌落可以降低或升高菌悬液的密度。
 将菌悬液接种到鉴定板上，不要超过20分钟。如果长时间部接种到鉴定板上，一些菌会失去代谢活性。
第三步：
 将鉴定板编上相应的号码。把菌悬液倒入储液槽，不要全部倒入，因为试管底部可能有未分散的菌团。按照不同的鉴定板所需的加样量进行移液器的程序选择，将移液器头安放到移液器上，必要时可以用手加固，以免造成上方漏气。吸取菌悬液，观察每个移液器头中的液面是否一致，如果不一致，放出菌悬液，加固移液器头。加完菌悬液后，盖上盖子。
第四步：
培养环境根据所鉴定的菌株种类而定。准备一个塑料容器，在底部铺上湿纸巾，把鉴定板放在纸巾上，可以防止鉴定板外缘孔水分的蒸发。对于革兰氏阴性阳性菌，鉴定板培养4-6个小时可以进行一次读数，过夜培养（16-24个小时）可再进行一次读数。厌氧菌在培养20-24个小时后进行一次读数即可。酵母和丝状真菌所需培养时间稍长，一般间隔24个小时读一次数。
第五步：
开启读数仪和电脑，打开Biolog软件，并对读数仪进行初始化，设置好各项参数（培养时间、菌株名称、菌株编号、菌株类型），用纸巾擦干净培养好的鉴定板底部，放入读数仪，A-1孔位于左上方。即可点击“Read This”进行读数。鉴定结果自动显示在屏幕下方，将所得数据进行保存即可。

4. 哪个医疗器械品牌有全自动微生物鉴定和药敏分析仪器急急急

国内的话，融智生物的QuanID微生物鉴定质谱系统，性能不错。

5. 有谁用过全自动微生物质谱鉴定系统

全自动微生物质谱鉴定系统
如果是可靠机构出具的鉴定证书的话，是可信的
水晶类鉴定证书都如此，如果是染色的黄水晶的话，则证书上压根不会出现“黄晶”字样，只会写“水晶”，但绝对不是“黄晶”
至于担心是其他物质合成的的话，则完全没有必要，因为证书上写的又不是“玻璃”“塑料”
呵呵~
不过为了保险起见，你最好是打电话去查询一下，IP卡，拨连云港区号+114查询质量技术监督金银珠宝饰品产品质量检验站的电话，然后打过去告知其编号询问结果

6. 全自动微生物鉴定及药敏分析系统怎么用，注意事项

探讨VITEK2Compact全自动微生物分析系统对无锡市常见12种食源性致病微生物金黄色葡版萄球菌、蜡样芽胞杆菌、变权形杆菌、副溶血性弧菌、O139群霍乱弧菌、沙门菌、肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157︰H7、志贺菌、溶血性链球菌、单核细胞增生李斯特菌、空肠弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌鉴定的准确性。[方法]按照VITEK2Compact全自动微生物分析系统仪器说明书中的标准操作流程进行。选择法国生物梅里埃API系统、常规法作为参照,同时与PCR快速检测方法进行比对,以验证PCR快速检测方法的符合性。[结果]从本试验结果来看VITEK2Compact全自动微生物分析系统仪对无锡市常见12种食源性致病微生物的鉴定结果与API鉴定系统鉴定结果的总体符合率为99.6%(223/224),PCR快速检测方法结果与API鉴定系统鉴定结果的总体符合率为97.3%(218/224)。[结论]VITEK2Compact全自动微生物分析系统仪对无锡市常见11种食源性致病微生物鉴定的准确性极好,但对革兰阳性链球菌的鉴定还应结合细菌的其他生物学特性综合评定。

7. 微生物鉴定系统编码的工作原理中，所有生化反应记录数字为

正确答案:C
解析：微生物鉴定系统编码原理是将全部反应分组，根据反应阳性、阴性结果和反应次序分别记录不同分数，每组三项反应均阳性记录7分，均阴性记录0分，因此每组实验的数字在0～7之间
。

8. 微生物鉴别测试是什么

微生物对化妆品的污染，不仅影响产品本身的质量，而更严重的是它危及消费者的健康回和安全。因此世界各答国极为重视，各国都制定了化妆品中微生物的卫生标准，将化妆品中微生物的污染状况作为产品的一个质量指标，在各国关于化妆品中微生物的第二项指标是，化妆品中不得含有致病菌。
关于致病菌的定义在微生物学中应是很清楚的，但其内涵所包括的细菌是很广的。而在化妆品中的微生物这项指标中，所指的致病菌包括致病菌和条件致病菌。
(1) 常规鉴定
常规鉴定内容有形态特征和理化特性。形态特征包括显微形态和培养特征。
(2) API细菌数值鉴定系统
API鉴定系统涵盖15个鉴定系列，约有1000种生化反应，目前已可鉴定超过600种的细菌。鉴定过程中，可根据细菌所属类群选择适当的生理生化鉴定系列，通过软件将待测细菌与数据库参比，得出鉴定结果。

9. vitek全自动微生物鉴定系统出现slashline是什么细菌

探讨VITEK2Compact全自动微生物分析系统对无锡市常见12种食源性致病微生物金黄色葡萄球菌、蜡回样芽胞杆菌答、变形杆菌、副溶血性弧菌、O139群霍乱弧菌、沙门菌、肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157︰H7、志贺菌、溶血性链球菌、单核细胞增生李斯特菌、空肠弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌鉴定的准确性。[方法]按照VITEK2Compact全自动微生物分析系统仪器说明书中的标准操作流程进行。选择法国生物梅里埃API系统、常规法作为参照,同时与PCR快速检测方法进行比对,以验证PCR快速检测方法的符合性。[结果]从本试验结果来看VITEK2Compact全自动微生物分析系统仪对无锡市常见12种食源性致病微生物的鉴定结果与API鉴定系统鉴定结果的总体符合率为99.6%(223/224),PCR快速检测方法结果与API鉴定系统鉴定结果的总体符合率为97.3%(218/224)。[结论]VITEK2Compact全自动微生物分析系统仪对无锡市常见11种食源性致病微生物鉴定的准确性极好,但对革兰阳性链球菌的鉴定还应结合细菌的其他生物学特性综合评定。

10. 梅里埃biomerieux半自动微生物鉴定仪可以鉴定真菌吗

半自动微生物鉴定仪是一款操作简便、小巧精致的仪器，适用于临床常见病原菌的定性鉴定及抗菌药物敏感性的定量分析

2、应用领域

半自动微生物鉴定仪除了应用于医院临床外，还可应用于牲畜、水产、商检、环保、食品、防疫、科研、教学等领域

3、系统组成

半自动微生物鉴定仪及其系统由鉴定仪、配套试剂盒组成，其中鉴定仪由计算机主机、微生物鉴定软件、显示器、打印机等组成

4、产品特点

1）鉴定范围：

可鉴定肠杆菌科、非发酵菌、葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、微球菌属、李斯特菌属、真菌、弧菌属、嗜血杆菌属、弯曲菌属、奈瑟菌属、阳性杆菌、厌氧菌（在有氧环境下）等各种常见微生物。多数可直接鉴定到病原微生物的种，部分可鉴定到亚种和亚型

2）药敏试验：

根据CLSI标准设置临床适用的抗生素及其浓度梯度，设置几乎涵盖了所有临床常用的抗生素，并按抗生素分组（A组、B组、C组、U组、O组等）报告药敏结果

3）专家系统：

根据生化反应特性及CLSI标准，建立智能化专家系统。能够自动对细菌和药敏结果进行二次复核及分析校验，异常结果自动提示并纠错；同时，能进行MRS、MRSA、HLAR、KPC、VRE等特殊耐药机制的分析与提示

4）配套试剂盒：种类齐全，操作简单

鉴定试剂盒：肠杆菌、非发酵菌、葡萄球菌、链球菌、真菌、弧菌

药敏试剂盒：肠杆菌、非发酵菌、葡萄球菌、链球菌

5）检测原理：

比色法、比浊法

6）检测方式：

人工判读

7）鉴定时间：18-24小时，最快4-6小时

8）查询统计功能：

鉴定仪软件具有强大的查询统计功能，可进行多种方式的查询统计操作，旨在为医院流行病学调查、耐药趋势分析和医院感染管理等提供最大的数据支持

9）质控功能：

软件具有室内质控功能，检测ATCC标准菌株，满足质控需求

10）医院感染监测功能：

软件具有医院感染监测功能，可进行医院感染监测数据的录入、修改、删除和打印操作

11）LIS系统连接

12）WHONET数据转换