生物測定

㈠ 細胞水平及分子水平的生物測定是怎樣的

傳統的生物測定方法雖然所得數據較為可靠，但是往往所需要的時間較多，且供試葯劑的需求量較大，現在新農葯的篩選，供試化合物動輒幾萬個甚至更多，傳統的方法根本無法滿足數量巨大的篩選要求。基於以上原因，近年來，許多新的生物測定方法層出不窮。

（1）預期作用靶標抑制活性的測定。隨著農葯作用於昆蟲的靶標部位、昆蟲體內農葯的代謝解毒機制漸漸為人們認知，通過檢測供試葯物對靶標或代謝物質的作用，可以簡化生物篩選測定的步驟與時間，這也是生物合理設計農葯的重要思路。

（2）MTT法。MTT（methylthiazoletrazolium）是一種黃色水溶性四噻唑藍，活細胞中的琥珀酸脫氫酶可使MTT分解產生紫色結晶狀顆粒積於細胞內和細胞周圍。其量與細胞數呈正比，也與細胞活力呈正比，但是死細胞不具有這個能力。因此，用一定濃度的葯劑處理指數生長期的細胞後一段時間，加入MTT，再測出所有混合液體的吸光值，可推出細胞的活力，衡量供試葯劑的毒力大小。

一般步驟是首先培養昆蟲細胞系，如棉鈴蟲細胞系、煙草夜蛾細胞系，取對數生長期細胞，置96孔微量滴定板中培養一定時間（使細胞貼壁），然後加入待測化合物，並繼續培養24h，結束培養前一定時間，向孔內加入MTT母液，培養結束後棄去上清液，再向孔內加入一定溶劑，待生成物完全溶解後，置酶聯檢測儀上於570nm處讀取吸光度值，通過細胞死亡率高低初步判斷化合物有無活性，還可設置系列樣品濃度，最終求出LD50/LC50值，以判斷活性大小。

MTT法需要專門的無菌操作台及相配套的細胞培養設備，成本較高。但是，此法對葯劑所需要的劑量少，能很好的滿足現在高通量篩選等篩選技術的要求。

（3）生物感測器。生物感測器是一種以生物的部分活性物質作為敏感部件，結合物理化學分析儀器，對特定種類化學物質或生物活性物質具有選擇性和可反應的分析裝置。其中關鍵技術原理是感測器的生物敏感層與復雜樣品中特定的目標分析物之間（如酶與底物、抗體與抗原、外源凝集素與糖、核酸與互補片段之間）的識別反應會產生一些物理化學信號（如光熱、聲音、顏色、電化學）的變化，這些變化通過不同原理的轉換器（如光敏管壓電裝置、光極光敏電阻、離子選擇性電極等）轉換成第二信號（通常為電信號），經放大後顯示或記錄。

生物感測器按照識別元件可分為三類：基於分子（酶、抗原或抗體、受體、核酸、脂質體等）的感測器、基於細胞的感測器和基於組織切片的感測器。就敏感元件而言，前者是固定化的生物體成分，後兩者是生物體本身。基於分子的生物感測器具有高度選擇性和敏感性，只對一靶分子有響應。正因為這種高度選擇性，可能會使某些具有相同功能的相關分子檢測不到。而將活細胞作為探測單元，可以檢測到許多未知的物質。目前生物感測器主要用於環境監測（生化武器、地下水污染等）、葯物篩選、新葯開發和基礎神經學等研究，在農葯領域的應用正在起步。

例如測定昆蟲電生理反應。其原理是昆蟲產生拒食行為與葯劑刺激昆蟲的味覺感受器如中栓錐感受器有一定的相關性，用供試葯液刺激昆蟲的中栓錐感受器，同時，將電極連接該感受器，通過電子設備接受並放大感受器發出的脈沖信號，用示波器或記錄器記錄這些信號，或直接輸入電腦通過特定的處理軟體對信號進行分析，判斷活性的有無或大小。華南農業大學曾就炔類化合物和川楝素對亞洲玉米螟拒食活性與電生理反應做了相關的研究工作。

（4）生物晶元。生物晶元（biochip）技術，採用光導原位合成或微量點樣等方法，將大量生物大分子，如核酸片段、多肽分子甚至組織切片、細胞等生物樣品有序地固化於支持物（如玻片、矽片、聚丙烯醯胺凝膠、尼龍膜等載體）的表面，組成密集二維分子排列，然後與已標記的待測生物樣品中靶分子雜交，通過特定的儀器，如激光共聚焦掃描或電荷耦聯攝影像機（CCD）對雜交信號的強度進行快速、並行、高效地檢測分析，從而判斷樣品中靶分子數量。

目前，生物晶元包括基因晶元、蛋白質晶元、組織晶元等。在已知的防治昆蟲靶標中，可以將多種害蟲的細胞、作用靶標或核酸片斷同時製作在同一生物晶元上，以供葯物的篩選。晶元技術具有高通量、大規模、平行性等特點，可以進行新葯的篩選，也可採用生物晶元技術來尋找潛在葯物靶標。用晶元做大規模的篩選研究可以省略大量的動物試驗，縮短葯物篩選所用時間。

㈡ 生物測定學閱讀器的基本問題是什麼

農葯室內生物測定需要定量噴霧塔等噴霧設備；吸管、天平等量取、稱量設備；生物培養箱、智能溫室等培養設備。
農葯生物測定是指用活體生物對農葯的毒效、毒性進行的測定評價，是測定葯劑有無生物活性的基本方法，包括利用標准供試生物對農葯有效成分含量的測定；農葯在室內外對病蟲草葯的測定；農葯在動、植物體內殘留量的測定，對病蟲草抗葯性的測定。
農葯生物測定與室內毒力測定一般沒有嚴格區別，多半是指在室內進行的測定。

㈢ 常用的測定做生物生長的方法有哪幾種

常用測定微生物生長的方法有：

1)稱乾重法.可用離心法或過濾法測定.優點：可適用於一切微生物,缺點：無法區別死菌和活菌.
2)比濁法.原理：由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定.優點：比較准確.
3)測含氮量,大多數微生物的含氮量占乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量.
4)血球計數板法.優點：簡便、快速、直觀.缺點：結果包括死菌和活菌.
5)液體稀釋法.對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查MPN表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量.優點：可計算活菌數,較准確.缺點：比較繁瑣.
6)平板菌落計數法.取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數.優點,可以獲得活菌的信息.缺點：操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響.

㈣ 生物監測的含義

農業環境學上： 生物監測是指利用生物對環境中污染物質的反應，即在各種污染環境下所發出的各種信息，來判斷環境污染狀況的一種手段，對污染物敏感的生物種類，都可以作為監測生物。
又稱「生物測定」。利用生物對環境中污染的物質的敏感性反應來判斷環境污染的一種手段。用來補充物理、化學分析方法的不足。如利用敏感植物監測大氣污染；應用指示生物群落結構、生物測試及殘毒測定等方法，反映水體受污染的情況。 基本信息
生物監測方法的建立是以環境生物學理論為基礎的。根據監測生物系統的結構水平、監測指示及分析技術等，可以將生物監測的基本方法大致分為四大類，即生態學方法、生理學方法、毒理學方法及生物化學成分分析法。
這里說用的生物主要包括：海藻、水蚤、斑馬魚、豆芽等等，操作起來比較繁瑣，實驗周期較長，無法現場快速檢測和在線長期監測，目前另外一種生物：發光細菌倍受用戶的青睞，所用設備分別有實驗室用、攜帶型、在線式，其中進口設備居多如美國、以色列、德國、荷蘭，價格昂貴，尤其是菌種的後期采購時間周期長，且菌種易失活；國產設備有中科院南京土壤所、上海上立、北京濱松光子，價格低廉，售後服務快捷，其中北京濱松公司設備靈敏度可以與美國設備相媲美，希望能增加研發力度，為國產設備增添影響力

㈤ 生物學效價的測定方法

（一）生物試驗法，這是一種以仔雞為試驗對象，以某一磷酸鹽為參照物，用斜率比法測定磷酸鹽RBV的方法，已被廣泛使用。同一磷源的RBV測值常常是各不相同的，造成這一現象的原因之一是試驗條件存有差異。對其測定方法加以比較後可知，基礎日糧、飼養方式、試驗期、試驗動物和評定指標等都會影響測值。
（二）同位素示蹤法，同位素32P示蹤法試驗周期更短，一般不需要2~4周時間，但耗資更大，對小動物試驗來說不太經濟，而且用同位素世蹤測定礦物元素的表觀消化率意義不大，因為糞中排出的礦物質既混有未吸收的，也有內源性的。

㈥ 什麼是生物鑒定法

生物鑒定法是利用某些生物對某些物質(如維生素、氨基酸)的特殊需要，回或對某些物質(如激素、植答物激素、抗生素、葯物等)的特殊反應來定性、定量測定這些物質的方法。如用小鼠的驚厥反應測定胰島素，用微生物測定維生素B12等。生物測定有時比其他測定方法更為靈敏和專一。它是生物學、醫學、特別是毒理學的重要內容和基礎。

㈦ 生物測定試驗設計的基本原則有哪些

研究農葯與生物的相關性，對農葯及生物的要求是比較嚴格的。例如，室內的篩選或毒力測定，葯品應該是純品，至少要有確切的有效成分含量。而供試生物應該是純種，個體差異小，生理標准較為均一的。同時，還必須以確定的環境條件為前提。故試驗設計應該掌握以下原則：1．相對的控制環境條件

室內應該盡量保持與田間環境條件的一致性。因為環境條件的差異，尤其是本身環境條件的惡劣就極有可能會使供試生物體死亡。測定農葯的毒力，原則上要求只有兩個變數，一個是葯劑的劑量或濃度作為自變數，另一個是死亡率或抑制率作應變數。葯劑與生物的反應，一般是正相關，這樣所得的結果，容易重復和分析。但環境條件，主要是溫、濕度對農葯及生物都有直接或間接的影響，因此，生物測定的試驗條件，首先要求相對的控制環境條件，使影響因素力求穩定。室內尚可採用特定的恆溫、恆濕設備來控制，同時，使用精密的測試儀器及嚴格的測試方法，而且供試蟲種或菌種也用室內飼養標准化的純種，這樣盡可能消除或減少處理之間因條件或人為因素造成的差異，以提高試驗的精確度。田間試驗，除溫、濕度外，光照、風雨等多因子變異因素使許多條件不能控制，但小區試驗，也應盡量力求所選地區土壤肥力、病蟲害分布、作物長勢及管理水平等條件均勻相似，以減少試驗誤差為准則。

2．必須設立對照

在生物測定試驗中，對照是十分重要的。因昆蟲在試驗期間往往有自然死亡的情況，故應設立對照加以校正。對照有3種：①空白對照：是不做任何處理的對照。②不含葯劑對照：與葯劑處理所用溶劑或乳化劑完全一樣，只是不含葯劑。③標准葯劑對照：用標准葯劑作對照。標准葯劑是選擇同類化合物已對某種病蟲害確定是有效的葯劑，它不僅可以與新品種對比，也可以消除一些偶然因素影響的誤差。這3種對照，並不一定在每次試驗中都設立，應根據具體情況和測定要求加以確定。

3．處理必須設重復

毒力的測試對象是群體，一個生物體個體之間對葯劑的耐葯性是有差異的，取樣應具有代表性，每個處理要求一定的數量，重復的次數越多，結果越可靠。增加重復是減少誤差的一種方法，但也不能過多，應根據不同的供試材料，各自的試驗目的和要求而定。一般至少重復3次。

4．運用生物統計分析試驗結果

統計方法是生物測定的基本技術，是判斷和評價試驗結果的工具之一。它是應用數學邏輯來解釋生物界各種數量的資料，將其化繁為簡，找出規律。統計學的處理，是分析結果中極重要的一環，可以從錯綜復雜的試驗數據中，揭示農葯與病蟲害之間的內在聯系，因此應該正確運用，以避免輕率下結論。

㈧ 測定微生物的生物量有哪些主要方法

聖才學習網為您解答：
1.直接計數測定 根據微生物種類,有血球計數板和細菌計數板；或者用電子計數器計數
2.比濁法 根據菌懸液的濃度在一定范圍內與光密度成正比,可以用分光光度計測OD值,用OD值表示樣品菌液濃度
3.核酸計數法 熒光定量PCR技術
4.活菌計數法 MPN和平板計數法
由於測定方法的限制,前幾種計數結果不太准確,目前應用廣泛的是第四種
對糞大腸菌群和光合細菌可用MPN,對其他微生物可用平板計數法

㈨ QC生物測定

又稱生物檢(鑒)定。利用某些生物對某些物質（如、）的特殊需要，或對某些物質（如、、抗生素、葯物等）的特殊反應來定性、定量測定這些物質的方法。如用小鼠的驚厥反應測定，用微生物測定維生素B等。生物測定有時比其他測定方法更為靈敏和專一。它是生物學、醫學、特別是毒理學的重要內容和基礎。

㈩ 什麼是農葯的生物測定

農葯的生物測定是指利用生物（動物、植物、微生物等）的整體或離體內的組織、細胞以及細容胞中的活性物質（如靶標酶、細胞膜等）對某些化合物的反應，如死亡率、抑制率等，作為評價他們生物活性的量度，運用特定的實驗設計，以生物統計為工具，測定供試對象在一定條件下的效應。

生物測定可以為新農葯的研製與開發提供科學的理論數據。在新農葯創制的初期，生物測定能夠對供試化合物的生物活性做出准確的分析，為先導化合物構效關系提供定量的活性資料，也可為待開發化合物的商品化評價提供依據。通過農葯的生物測定，對得出的試驗結果進行統計分析，得出科學的結論，並以此指導生產，以期達到科學合理的使用農葯的目的。對作物危害最多的有害生物主要為害蟲、病原物與雜草，因此生物測定也主要圍繞針對防治這些有害生物的殺蟲劑、殺菌劑和除草劑進行探討。

生物測定在農葯研究和植物化學保護應用中主要涉及的內容和范圍：①活性篩選的常規測定；②農葯殘留的微量生物分析；③抗性毒力測定；④葯害毒性測定。