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㈡ 石家莊好的軟體公司有嗎
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1、報價適中
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2、開發實力強
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㈢ 沙鼠的科學實驗
【摘要】目的 研究沙鼠短暫性腦缺血及西比靈干預後腦內Smad2和Smad4蛋白的表達。方法 製作沙鼠腦缺血再灌注模型,用免疫組化法檢測腦內Smad2、Smad4蛋白的表達變化。結果 各組沙鼠神經元和膠質細胞胞漿內均有Smad2、Smad4蛋白陽性表達,且Smad4蛋白表達均顯著強於Smad2蛋白。缺血再灌注6h、1天後Smad2、Smad4蛋白表達顯著上調(P<0.05)。同腦缺血組相比,西比靈干預組20隻沙鼠神經元和神經膠質細胞內Smad2和Smad4蛋白在缺血再灌注6h、1天時表達明顯下調(P<0.05)。結論 沙鼠腦神經細胞和神經膠質細胞內均有Smad2、Smad4蛋白表達;西比靈干預後,缺血再灌注沙鼠腦神經細胞和神經膠質細胞內Smad2和Smad4蛋白表達下調。提示Smad2和Smad4蛋白可能是缺血性腦損傷程度的又一重要標志;Smad4、Smad2在沙鼠腦缺血的發生和發展過程中可能有協同作用。
【關鍵詞】Smad蛋白;免疫組化;缺血再灌注;沙鼠
體內外實驗均證明,轉化生長因子β有神經保護作用。腦缺血後,腦組織內TGF-β表達增高,是機體對缺血性腦損傷的一種保護性反應。TGF-β1增高能減少腦梗死面積,抵禦腦缺血性損傷。Smad蛋白是輔助TGF-β超家族信號在細胞內傳導的一族蛋白,包括了Smad2、Smad4等;直接參與TGF-β超家族成員的信號傳導,是TGF-β超家族成員參與生命活動的重要介質。我們通過免疫組化技術測定沙鼠正常腦組織;缺血再灌注後腦組織及西比靈干預後缺血再灌注後腦組織及Smad2/4轉錄水平的表達,初步發現了Smad2、Smad4之間的關系,現報告如下。
材料方法
1.1 實驗材料
1.1.1 實驗動物 健康雄性蒙古沙鼠60隻,9月齡,體重(90±5)g,購自上海實驗動物管理委員會。隨機分為正常組、假手術組、腦缺血組及西比靈干預組。
1.1.2 主要試劑 Smad2、Smad4免疫組化檢測試劑盒,一抗(鼠IgG),二抗(羊抗鼠IgG),抗原修復液I,山羊血清封閉液、SABC等和DAB顯色試劑盒均由武漢博士德生物工程有限公司提供;西比靈膠囊由西安楊森醫葯公司提供。
1.1.3 主要儀器 石蠟切片機、免疫組化專用蓋玻片(武漢博士德生物工程有限公司提供)、恆溫箱、冰箱、顯微鏡、照相機等。
1.2 實驗步驟和方法
1.2.1 動物模型的建立 健康雄性蒙古沙鼠,用3%戊巴比妥以30mg/kg的劑量腹腔注射進行麻醉,固定動物,消毒,頸正中切開皮膚1.5cm左右,鈍性分離皮下組織,分離雙側頸總動脈,微血管夾夾閉雙側頸總動脈10min後松夾再灌注,縫合皮膚。
1.2.2 動物的分組和處置 正常組10隻,不予任何處理即斷頭處死動物。假手術組10隻,僅分離雙側的頸總動脈,不予夾閉,就縫合皮膚,1天後斷頭處死。腦缺血組:共20隻沙鼠,分為缺血6h組(IR6h)、缺血1天組(IRld)兩組,每組10隻,分別在缺血再灌注(IR)6h、1天時間點處死動物。西比靈干預組共20隻沙鼠,分為IR6h,IRld兩組,每組n=10,在缺血再灌注前一天給予餵食西比靈[按20mg/(kg·d)]。分別在缺血再灌注(IR)6h、1天時間點處死動物。所有實驗動物在預定時間斷頭處死,快速取前腦置10%福爾馬林固定,常規石蠟包埋後5μm連續切片。
1.2.3 結果判定 病理結果採用相鄰腦組織切片作常規HE染色,用光鏡觀察其組織病理變化,估計腦損傷程度。免疫組化取各組沙鼠斷面水平相似的連續組織切片,所有切片分析均在同一強度、同一放大倍數下進行,每個指標採用陽性細胞計數法。在40×10倍的光鏡視野下觀察免疫反應,以細胞漿著棕褐色為陽性,每張切片在高倍視野下分別取上、下、左、右及中心共5個區域進行細胞計數, 每個區計數200個細胞, 共計數1000個細胞, 計算染色細胞所佔比例,即為Smad2、Smad4表達指數。
1.3 統計學分析 各組檢測結果用單因素方差分析方法,2個獨立樣本用t檢驗,兩變數間相關關系用直線相關分析,計算Pearson相關系數;確定P<0.05差異有顯著性;所有統計分析均用SPSS11.0統計軟體包完成。
結果
2.1 病理觀察結果 正常組和假手術組皮層組織形態結構正常。腦缺血組IR6h可見部分神經元和膠質細胞輕度水腫;IRld後神經元出現變性、灶性壞死、膠質細胞輕度增生。西比靈治療組:IR6h、IRId各組分別同腦缺血組相應時間點相比,腦組織損傷程度均明顯輕於腦缺血組。
2.2 免疫組化結果 所有正常沙鼠腦組織神經元和神經膠質細胞內均有Smad2和Smad4蛋白不同程度的陽性表達,多呈棕黃色顆粒;顆粒主要定位於胞漿,部分定位於胞核。但表達程度有所不同,Smad4蛋白表達強於Smad2蛋白,統計差異有顯著性(P<0.05)。在缺血再灌注沙鼠腦組織中,神經元和神經膠質細胞內也有不同程度的Smad2和Smad4蛋白的陽性表達,表達部位與正常組基本一致,Smad4蛋白表達也高於Smad2蛋白,統計差異有顯著性(P<0.05)。缺血再灌注組(IR6h、IR1D)與正常組、假手術組比較,Smad2和Smad4蛋白陽性表達率增高,統計差異有顯著性(P<0.05)。西比靈干預組Smad2和Smad4蛋白陽性表達率低於同時間點的腦缺血組,高於同時間點的正常對照組,統計差異均有顯著性(P<0.05)(圖1、2;表1)。表1 各組Smad2和Smad4蛋白表達指數比較 註:與正常對照組比較,▲P<0.05;與同時間點缺血組比較,△P<0.05;與各組Smad4蛋白比較,*P<0.05
討論
Smad蛋白質群是發現的新的細胞內信號傳導蛋白,它們直接參與TGF-β超家族成員的信號傳導。已發現的Smad蛋白至少有10種,在哺乳動物中有8種,Smad1~Smad8。其中,參與調節TGF-β的Smads包括Smad1,2,3和4。Smad2由Eppert等於1996年從人腎cDNA文庫中克隆獲得,其C端含有SSXS結構,SSXS結構能被特異的絲氨酸激酶I型受體磷酸化,進而參與信號傳導。Smad4C端不含SSXS結構,它不能特異地介導信號傳導,但它能與Smad1,2,3,5和8等結合後協同激活各自的特異靶基因,因此也稱為協同Smad;當TGF-β受體活化後,可以誘導限制途徑Smad2和Smad3通過細胞膜特異的絲氨酸/蘇氨酸激酶受體活化而發生磷酸化,再與共有型Smad4結合成寡聚體轉運到細胞核,在細胞核直接地應答TGF-β的轉錄功能,這一結構是TGF-β細胞內信號的開關。
國內外已有研究Smad2和Smad4蛋白在心肌細胞、肝細胞、牙乳頭細胞和胃癌等細胞和組織中有表達,但沙鼠腦組織中是否存在Smad2和Smad4蛋白表達尚未見文獻報道。本實驗用免疫組化方法檢測到正常沙鼠腦組織神經細胞和神經膠質細胞胞漿和胞核內均有Smad2和Smad4蛋白表達,Smad4蛋白表達強於Smad2蛋白,兩者差異有顯著性。這表明Smad2和Smad4蛋白作為TGF-β在細胞內信號轉導的分子,在於沙鼠神經細胞及神經膠質細胞中是必需的,神經細胞及神經膠質細胞需要Smad2和Smad4蛋白的表達才能發揮正常功能。而Smad4蛋白表達高於Smad2蛋白的可能原因是Smad4蛋白是TGFβ信號通路的共同通路有關。Smad2和Smad4蛋白在缺血再灌注6h,1天時沙鼠神經細胞、神經膠質細胞胞漿和胞核內也均有表達,且較正常沙鼠神經細胞、神經膠質細胞胞漿和胞核內的表達有明顯上調,兩者差異有顯著性。進一步分析發現Smad2和Smad4蛋白在缺血第1天時間點表達比在缺血第6h時間點表達更明顯(P<0.05)。腦缺血再灌注後Smad2和Smad4蛋白表達升高的可能原因我們認為是:腦缺血再灌注後,腦組織發生損害,氧自由基等有害物質表達增加,機體為了抵禦這些有害因子,反應性地上調一些保護性因子,這其中就有TGF-β1。Smad2和Smad4蛋白是TGF-β1信號轉導的必需分子,故當TGF-β1表達上調時,可能需要更多Smad2和Smad4蛋白來轉導具有腦保護作用的TGF-β1的信號,而1天時TGF-β1表達較6h更高,Smad2和Smad4表達也相應增多。統計還發現,正常對照組、缺血組沙鼠腦神經細胞和神經膠質細胞內Smad4蛋白和Smad2蛋白表達存在正相關關系,其Pearson相關系數為0.582,這提示Smad4蛋白和Smad2蛋白在正常沙鼠腦組織內及腦缺血的發生和發展過程中可能有協同作用,這與大多數研究一致。西比靈是經典的鈣離子拮抗劑,它有明顯的腦保護作用。西比靈可有效的抑制神經細胞膜受體依賴性Ca2+通道開放,具有神經保護作用,並具有減輕皮質抑制,縮短恢復時間,防止腦組織缺血性改變的功能,增加腦組織對缺氧的耐受性。已有研究表明,西比靈發揮腦保護是通過以下機制實現的:西比靈可增加腦組織對缺氧的耐受性,有神經細胞保護作用;抑制病理性血管收縮,阻止血小板聚集,抗自由基作用,拮抗興奮性氨基酸作用;改善腦循環,減輕腦水腫;避免再灌注性損傷[6]。由於Smad是TGF-β信號轉導通路必需的,故闡明正常、缺血沙鼠腦組織內Smad4和Smad2蛋白的表達水平有助於加深對TGF-β胞內信號轉導機制的理解,也有助於深入闡明腦缺血缺氧的發病機制,為其進一步深入分子水平的研究與治療打下基礎。
使其聰明
《美國實驗生物學聯合會會志》發布一項新的研究成果稱:「有證據表明,如果我們能夠聰明的吃,我們就會變得更聰明」。麻省理工大學的科學家指出,從嬰兒配方奶粉到雞蛋等日常飲食中吸取的營養成分,能夠增加大腦突觸並提高認知能力。
該項研究的高級研究員理查德說:「但願人腦能和實驗動物的大腦一樣,對營養食物產生回應,增加大腦突觸以儲存認知能力。」
在相關的實驗中,研究人員將沙鼠分為兩組,用雞蛋中含有的膽鹼、甜菜中的尿苷磷酸以及魚油中的DHA搭配成不同的組合餵食其中一組沙鼠,另一組沙鼠的食物中則完全不含這些營養成分。四周以後對沙鼠進行認知能力的測試,科學家發現,餵食膽鹼—尿甘磷酸和膽鹼—DHA組合的沙鼠,認知能力有明顯提高。科學家解剖沙鼠的大腦,以期獲得認知能力提高的生物學原因。他們發現,這些沙鼠大腦突觸活動高於正常值,表明它們擁有較高的智商。
《美國實驗生物學聯合會會志》的總編輯傑拉爾德·魏斯曼說:「我們現在已經知道如何令沙鼠更聰明,那麼提高人類智商就不會太遙遠。不過坦率的說,也不是很快就會到來。」
㈣ 口袋妖怪紅寶石攻略
冒險,從蔓莎拉鎮開始了。不論是歐奇多博士的研究所還是競爭對手的家,都座落於這個城鎮中。前往至第1線路之後,歐奇多博士就會登場,乖乖的和他去研究所吧!桌子上有三個精靈球(妙蛙種子、傑尼龜和小火龍)去選擇一個自己喜歡的PM(本人選擇傑尼龜),博士拜託你去常磐市的友誼商店拿回托送物品,剛要離開,競爭對手前來挑戰,於是,你的初次對決開始了(戰斗過程中系統會有戰斗提示,所以初學者不用擔心)輕松獲勝後,去常磐市友誼商店從店主那裡得到托送物品,回來交給博士,就會得到口袋怪獸圖鑒了,要離開家鄉的時候,千萬不要忘記去姐姐家裡索取地圖(城內地圖)那可是冒險必備之物。
通過了1號道路後,再次來到了常磐市,如果此時前往左邊的22號道路,就會再次與競爭對手戰斗(依據此處戰斗的勝負結果,競爭對手所擁有的pm進化形態也會發生變化),在游戲的開始階段常磐市立體育館是無法進入的,所以只好向北方進發了(出口處的老爺爺會教你如何進行pm捕捉,初學者好好學習一下吧!)通過了2號道路的常磐之森出入站後就來到了神秘的常磐之森,這里有不少pm訓練員,可以和他們進行挑戰以獲取經驗值和金錢,這里的路上可以揀到教程訓練機,可以隨時提供在線演示,十分方便。森林裡生活著各種各樣的昆蟲系pm,如果這時有飛行系的pm在隊伍中,會對戰斗十分有利!
走出森林後,來到了日比市,如果認為pm等級夠高的話,就去挑戰日比市立體育館的小剛吧,看過動畫的人應該知道,他可是訓練岩石系pm的高手。打敗他以後獲得了灰色徽章和39號訓練機(岩石封印 100%追加效果讓敵人速度下降一個等級)日比市最著名的科學博物館是向遊人開放的,只要花50元就可以進入參觀,里邊可以看到傳說中的口袋妖怪化石鐮刀盔和化石翼龍的骨骼標本,二樓還可以看到太空梭的模型,有一對親子雖然很想要主角身上的pm,但是因為和所有人很熟識地緣故,所以只好放棄了
離開了日比市,來到了3號道路,這里到月見山洞之間有八位訓練員登場,好好利用月見山洞入口附近的pc進行及時的回復吧,在pc大廳左上角會有人出價500元賣秘密pm,其實就是鯉魚王,玩過紅綠藍的朋友應該不會上他的當了吧。
一切准備就緒以後,就可以進入月見山洞了,里邊同樣有很多訓練員等候主角的挑戰,而且,還有身穿黑色衣服的火箭團擋路,經過了重重難關終於到達了山洞的另一端,這時會和考古專家對戰,戰勝後取得化石的其中一種(左邊龜殼化石,右邊甲殼化石)不管是做什麼用的,先出洞再說(pm快撐不住了啊)
來到空曠的4號道路,途中會遇到兩個格鬥家,可以向他們學習威力強大的招式,左邊的會教授百萬噸拳擊,右邊的會教授百萬噸飛踢(好懷舊的招式啊!)一定要記得讓你的pm學習,之後來到了著名的水都(守護神?)——花田市,在花田市中,擁有水系pm的館主小霞(KASUMI~~)早已經做好准備在此等候著主角的到來,將其擊敗後可以取得藍色徽章和03號訓練機(水波動 有20%可能性追加效果讓對手進入混亂狀態),在pc左邊的屋子裡,老人會向你交換蚊香蛙,但是你要有紅唇姐(就是冰系+超能力系的那個人形pm)才可以換得,左上方民居內的老人會給你解釋各屬性的特點,現在如果沒有兌換卷的話,自行車價格簡直是天文數字(1000000元)所以不要理會,向北方繼續前進。 鴑霌b%[1?
剛到24號道路,競爭對手再度出現,他的pm非常厲害,屬性也很全面,要用相剋的屬性招數來對付,戰勝後他會送給主角類似於前作口袋導航儀的裝置,主要用於和重要人物、館主進行聯絡。在離開了花田市後,來到了黃金球大橋,只要打敗橋上的五名挑戰者並擊敗火箭團員(剛開始說話還挺客氣,後來狐狸尾巴就露出來了)就可以獲得金球最為獎勵,進入25號道路後仍然有許多挑戰者嚴陣以待,注意善用恢復道具,繼續向前走會看到一個小屋,屋裡面只有一隻皮皮,和他對話後發現原來是個人,等他進入交換機以後操作下邊的電腦就可以幫助他回復原狀,為了表達謝意,他會送給你非常重要的SANDOANNU號輪船的船票。再度回到花田市,右邊房子門前的警衛會讓開,進入後發現屋內一片狼藉,順著腳印從後邊的洞口出去,會遇到火箭團的人(真是無惡不作,讓人家怎麼住啊?)好好教訓他一頓以後,他留下了28號訓練機(挖洞 蓄力一回合第二回合攻擊,可用於逃出迷宮)逃之夭夭。繼續向下方前進,就來到了5號道路,順著坡道下來可以進入口袋育成屋,可以在這里存放你的pm進行養育,下邊的山吹市檢查站有檢查人員暫時無法通過,所以,只好走右邊的地下通道了,入口處的小女孩可以用尼多娜換取尼多蘭。
通過了地下通路,來到了6號道路,這個地區有兩對男女組合,要小心應付。一直向下就來到了枯葉市,在pc大廳的櫃台前有人會送你遠程呼叫器,這個東西可以讓你反復挑戰已經挑戰過的訓練員,
只要在此人附近使用就可以進行「挑釁」但是,每呼叫一次都要蓄電,所以,還算是有用的東西。在口袋人氣俱樂部內,如能忍受會長的長篇大論,就可以從他那裡拿到自行車兌換卷(還記得上邊提到的天價自行車嗎?現在可以免費獲得了!)在海邊的小屋裡和釣魚人談話可以獲得初級吊桿。由於,枯葉市修行場前邊的道路被小樹阻擋無法通過,所以,還是先上船再說吧!向水手出示了船票之後就可以進入SANDOANNU號了。
在船艙的客房裡又很多遊客會與主角對決,所以,回復自然是少不了的,一進門右數第二個房間里,和女孩說話就可以進行回復了。在底層餐廳的垃圾桶里可以找到放樹果的袋子,以後可以通個這個道具存儲各種果實。來到二層船長室門前和競爭對手進行第四次戰斗後,進入船長室和船長說話就可以得到01號秘傳機(居合斬 普通攻擊技巧,可以破壞小樹和草地),剛離開了SANDOANNU號,船就離去了。 cc慶醥噧
讓隊伍里的pm學習居合斬以後,破壞枯葉市修行場前邊的小樹後,就可以進入挑戰了,館主是電系pm的使用者馬奇士,這里要注意一下,修行場內的機關比較麻煩,建議消除第一個光柱以後存個檔,兩個光柱全部關閉以後就可以進入挑戰了,戰勝後可以獲得橘色徽章和34號訓練機(電擊波 必定命中對手)繼續向右前進,經過11號道路,來到12號道路入口的2樓,歐基德博士德助手在此等待主角的到來,只要現在捕捉pm數量在30隻以上,就可以和他換取探寶機,相信大家對這個儀器都不陌生了,它可以尋找地圖上的隱藏物品,上方的男孩會那尼多利換取尼多利娜,剛要准備向12號道路前進,一隻碩大的卡比獸就擋在了路的中央,阻止了前進的道路,沒辦法,只好原路返回。 b~�?]??
來到11號道路,這里會看到地鼠洞穴,從這里可以回到以前經過的2號路,途中的房間找玩gba的男孩可以用凱西換取吸盤魔偶,以前被小樹阻擋而無法通過的地方現在也可以通過了,下邊的房子里可以拿到05號秘傳機(閃光 使對手命中率下降一個等級,可以擴大黑暗中的視野范圍)條件是必須要捕捉到10種不同的pm,一定要記得拿啊
下一個目標就是曾經去過的花田市了,途中會經過日比市,科學博物館右側的樹現在可以破壞了,從這里可以進入到博物館的後門,和中間的學者說話後,得到秘密的琥珀(請大家記住這個物品,以後要用到的)右下角的工作人員會教授格鬥系代表招式地球擲(傷害值和等級相同)幾經周折,又回到了花田市,這回有了居合斬的幫助右邊的通路也沒有問題了(玩這個游戲記憶力不好可不行)把擋路的小樹砍掉後來到9號道路,經歷了眾多訓練員的戰斗後,來到了岩山隧道旁的pc進行回復,pc中心大廳右邊的白衣人會給你不變之石,條件是要捕捉20種不同的pm,回復完畢後進入岩山隧道!
隧道內漆黑一片,只有有限的一點可視范圍,幸好之前拿到了05號秘傳機閃光(之前沒拿到的可別怪冷羽我沒提醒過你啊!這一代用完閃光以後的可是范圍變為全屏了呢,方便!)洞穴里的結構比月見山洞略顯復雜,主要是圍繞兩層轉,訓練員以怪獸小子和登山者為主(我的水箭龜專克這類訓練家的pm)離開岩山隧道後經過10號道路來到了著名的鬼市——紫苑市。
紫苑市給人一種非常神秘感覺,座落於城市東方的靈骨塔更是雲霧繚繞。由於城市並不寬闊,所以,當中也沒有設立GYM,這些大概都應該要怪罪於為了慰藉口袋妖怪靈魂而興建的口袋妖怪靈骨塔了吧?雖然總覺得散發著些許令人害怕的妖氣,但是,還是阻止不了我們的調查行動。位於城中的是義工之家,聽家裡人講,身為義工之家長老的富士老人,自從靈骨塔之後就行蹤不明了,南方的小屋是姓名占卜師家,可以給你的pm更改姓名。為了解救老人,我闖入了靈骨塔,塔內的訓練員全部是巫女,使用的是幽靈系pm,建議大家用惡系的招式對付,遇到的敵人都是呈霧狀的,所以無法進行實體攻擊,只有逃跑。(第五層有一個結界可以進行回復,中央取得靈符)當我即將到達最高層時,在樓梯前遇到一個30級的霧狀pm,由於無法進攻也無法前進的緣故,我只好離開了靈骨塔去尋找破低的其他方法……從鎮上人那裡得知,要讓黑霧現身只有去玉蟲市取得銀色保險絲盒,所以,只有先離開這里了。
從左邊出城經過第8號道路,由於通往山吹市的入口有警衛看守,所以暫時從上邊的地下通路走吧。(怎麼總是地道戰啊?)出了通路經過第7號道路來到了最繁華的玉蟲市,首先利用居合斬到達玉蟲市立體育館,館主是喜愛花草的草系pm訓練員艾利卡,戰勝後獲得綠色徽章和19號訓練機(強力抽取 命中後將傷害值的一半進行恢復)現在要去百貨頂樓購入一些飲料(送禮用)給旁邊的小女孩可以得到回報,送她美味之水可以得到16號訓練機 精神蘇打可以得到20號訓練機 綜合水果汁可以得到33號訓練機。另外,從右邊大樓後門進入的話,在頂層的房間桌子上可以拿到依布。關於本市的游戲大廳的游戲介紹,我就不再做文章了(請各位會員期待以後的詳解吧!)大廳右邊壁畫前有個火箭團員形跡可疑,和他說話居然大打出手,將其擊敗後調查壁畫,發現右邊出現樓梯,這里應該就是火箭團的地下指揮部了。
【口袋火紅全攻略上半部分完成,攻略開始時間21:30 結束時間5:35 此攻略為本人的原創,也是第一次嘗試做攻略,所以,語言有錯誤的地方請您原諒,具體哪裡看不懂的也請您指出,我會及時更正,最後,謝謝您對CG和口袋的支持!!】
附帶上半部分結束點(火箭團玉蟲市基地截圖)
口袋妖怪火紅版全攻略(下半部分)
火箭團的地下指揮部一共分為四個場景,有兩個場景都會出現傳送帶機關,要先看好傳送路徑以後在去踩,千萬不要太心急,因為這樣會更加麻煩的。既然是火箭團的基地,訓練員肯定是一水的團員了,輕松的來到B4F,擊敗左上方房間內的團員以後,他會交給你電梯鑰匙,進入電梯(每層的右下方紅門)使用電梯要是以後就可以進行樓層選擇了,來到B4F,門口有兩個團員要一一擊敗門才會開放,里邊坐在沙發上的就是火箭團的魔王——薩克奇,他的pm是大岩蛇 鐵甲犀牛和袋熊,擊敗他以後可以拿到銀色透鏡(還記得這個東西嗎?它就是可以破除靈骨塔內黑霧的關鍵道具)現在可以順原路返回紫苑市了。
再度進入神秘的靈骨塔,由於有了銀色透鏡的幫助,這下就可以看清黑霧的真正身份了,原來是一隻30級的格拉格拉(它是無法進行捕捉的)擊敗它以後進入塔頂,原來富士老人是被火箭團綁架的,連續擊敗3個團員後解救老人,作為回報富士老人會把自己珍藏的口袋妖怪之笛送給主角,他可以喚醒沉睡的卡比獸,這下又有很多未知地帶可以到達了。
由於游戲里一共有兩只卡比獸阻擋的道路,所以,下面我將分別寫出兩條線路的攻略:
線路1:從紫苑市左邊通過第8號道路的地下通路來到玉蟲市左邊的16號道路處喚醒卡比獸(這種罕見的pm一定要捉啊!)通過居合斬砍斷小樹以後到達左邊的民家,和小女孩對話可以得到02號秘傳機(飛天 第一回合消失第二回合攻擊,可以到達以前去過得城市)快讓你的飛行系學習吧,這個可是非常方便的技能!在通過自行車道入口大樓時別忘了和二樓的博士助手對話,如果此時你的pm種類已經到達40種以上時,他會送給你金幣護身符(和訓練家戰斗後金錢獲得2倍,就是紅藍寶石版通關後媽媽送的東西啦!)出大樓以後來到自行車專用下坡道17和18號道路,如果之前沒有取得自行車的話,是無法進入的。順利滑行至石竹市入口大樓(左側),二樓的黃發男孩會用大舌頭換取哥達鴨,出大樓進入石竹市。 �
線路2:利用飛天回到枯葉市,通過右邊的11號道路入口大樓(如果之前沒有得到探寶器的現在可以到二樓取得,不要告訴我現在還沒有捕捉到30種pm)出大樓來到12號道路,同樣方法擊敗(捕捉)擋路的卡比獸,第12號道路是垂釣者的聚集之處,水系訓練員很多。向北方走又可以回到紫苑市,向南方前進會看見一間小屋和屋內漁夫的兒子說話可以得到中級釣桿,繼續向下走會來到13號道路,這里地形較為復雜,由眾多柵欄組成,由於下面還要經過訓練員區,所以建議做好回復准備以後再向下前進,經過了13 14和15號道路的漫長旅途之後,終於到達了石竹市入口大樓(右側)二樓同樣可以找到博士的助手(分身?)取得學習機(老玩家應該不陌生吧?就是隊伍中的pm不戰斗一樣可以分配到經驗值和努力值的好東西)要求是要收集50種不同的pm,出大樓進入石竹市。
進入石竹市後,首先要去石竹市立體育館和使用毒系pm的館主強進行對決,體育館內有很多隱形的牆壁,只要多走走就可以到達館主所在的位置了,擊敗強以後可以獲得愛心徽章和06號訓練機(猛毒 使對手進入中毒狀態,毒傷害隨回合數增加而提升)找pc左邊的屋子裡的人,可以讓你的pm忘記之前所學的一種招數(對於秘傳機招式無法覆蓋的,現在可以直接消除了)右邊的第二個屋子可以得到高級釣桿,第一個屋子的園長會要你幫助他找丟失在狩獵區的金色假牙。為了可以得到獎勵,只有向位於北方狩獵區前進了,
花費300元可以得到30個狩獵球,而且有步數限制(600步),難度也是很大的,在區域3的訓練所中可以得到03號秘傳機(乘浪 攻擊技巧,可以在水上移動)學會以後從下邊的水池游過去,就能在草叢中找到金色假牙了,回去交給老人可以得到04號秘傳機(怪力 攻擊技巧,可以推動怪石)右邊剛才不能推動的石頭現在可以了,取得神奇糖果(耶~~好幾顆了!)
通往山吹市的入口(四個)都有警員把守,從他們的說話態度來分析,這幾位警員大概都非常渴,所以先飛回玉蟲市,到百貨大樓右邊的高層建築第一層找老奶奶要好喝的飲料(千萬不要買百貨大樓頂層自動販賣機里的飲料,那三種他們不喝的),把飲料交給其中一個入口的警員之後四個入口都可以通行了,進入山吹市,城內看來已經被火箭團佔領了,山吹市立體育館的門有團員把守暫時無法通過,先去挑戰左邊的格鬥道場吧!擊敗老師之後,就能夠獲得格鬥系pm代表艾比郎或沙瓦郎。下一個目標就是位於市中心的希魯佛公司總部,這座大樓一共有11層,內部很多地方由傳送點構成,首先在第5層下方拿到鑰匙卡,現在可以打開一切封閉的門了,9樓左下有個房間的女孩可以進行pm回復,從3樓中央的傳送點可以傳送到7樓左上的封閉房間,競爭對手在這里等候著主角的到來,戰勝他之後從下邊的傳送點來到最高層,這里要挑戰的是企圖侵佔希魯佛公司的薩卡奇,戰勝他之後可以從會長那裡獲得大師球!山吹市再度恢復了平靜。體育館沒有了守衛,這下就可以挑戰超能力系pm的訓練者娜紫美了,體育館內全部是由傳送點構成的,相信有了剛才的經利,這點困難也不算什麼了吧,戰勝後獲得圓月徽章和04號訓練機(冥想 自身的特攻特防值上升一個等級)
離開山吹市,用以前學會的乘浪進入市南的19 20號水路,途中登陸孤島——雙子島,洞內結構非常復雜,冰系pm較多遇敵幾率很高,等級不夠的還是不要擅自闖入了,到達一出全是岩石的地方,用怪力將其中兩塊順著洞推下去,然後跳下,原來了激流也被堵住了,往前游一段,就可以看到三聖獸之一的急凍鳥(lv50)捕捉!出了雙子山洞,由於前方水路不通,所以只好用飛天回到主角的家鄉蔓莎拉鎮了(好懷念啊~~)回家恢復一下後,向南方的21號水路前進,和眾多水系訓練員一一戰斗之後來到了南方的小島——紅蓮鎮,這里的口袋妖怪研究所可以幫助你復原之前拿到的化石(一個是月見山洞二選一的化石,一個是日比博物館取得的神秘的琥珀)交給第三個房間的研究人員吧。去調查紅蓮鎮修行場的時候發現門是鎖住的,所以只好先去口袋妖怪小屋裡一探究竟。在第一層調查一個超夢的石像,啟動開關後右邊的鐵門會交互的開放,在三樓的一個桌子上發現關於口袋妖怪超夢與夢幻的報告,最後到達地下一樓取得桌子上的秘密鑰匙和下方的草系太陽光線訓練機以後,到紅蓮鎮修行場用鑰匙開門後就可以挑戰火系pm的使用者卡茲拉了,修行場內又很多關閉的門,要通過啟動旁邊的機器才可以打開,戰勝卡茲拉以後可以得到火焰徽章和38號訓練機(大字篝火 有10%的可能性追加燒傷效果)剛出修行場大門,就被人強制送到了陌生的第二塊版圖1號島嶼。
島嶼上方的山洞內可以泡溫泉來恢復pm的體力,找洞內的白鬍子老人說話可以得到06號秘傳機(碎岩 攻擊技巧,有50%的可能性追加效果讓敵人的防禦力下降一個等級,可以擊碎岩石),由於電力問題所以此處的pc都無法存取pm,只有先去位於1號島嶼北部的孤島一探究竟了,經過了火焰捷徑來到了孤島的山頂,三聖獸之一的火焰鳥(lv50)正在這里等候,捕捉!回到1號島嶼坐水世界號來到2號島嶼,進入一民居得知主人家的小孩去3號島採集果實至今不知下落所以請求主角的幫助,之後發生電單車黨闖入事件,北方小屋裡地巫女會教授pm水系代表招式高壓水槍。坐船來到3號島嶼,剛一上島就發現單車黨和島嶼居民發生了沖突,上前幫助居民,分別打敗三個人之後,頭目出現(使用的pm為雙彈瓦斯和臭臭泥)擊敗後敵人撤退(此時電力全部恢復)。繼續往島嶼左方探索,進入果實森林,利用居合斬和乘浪來到森林最深處,找到失蹤的小女孩,但是發現她根本無法行動,正在奇怪之時,突然從樹叢中跳出一直素里普,將其收服以後,小女孩得救,回到1號島嶼的大型pc中心領賞(具體是什麼,冷某實在沒有看清,請知道的朋友告知)並且送回了紅蓮鎮。
還差最後一枚徽章了,還記得常磐市那個關閉的體育館嗎?現在應該開放了,用飛天直接飛至常磐市,進入常磐市修行場這里的館主就是之前那個無惡不作的火箭員團長薩卡奇,他使用的pm屬於地面和毒系,戰勝他以後可以得到羽毛徽章和26號訓練機(地震 攻擊招式,對手使用挖洞時攻擊力加倍)至此,全部的八枚徽章入手,但這並不表示此游戲的終結,更加厲害的對手還在等待著主角的挑戰!從常磐市左邊的出口進入22號道路,再度遇到競爭對手,他的pm果然有很大的長進,尤其是妙蛙花,順利的戰勝他之後對手離去。 娕^@??G?
最關鍵的時刻即將到來,我來到了冠軍道路,這里設立了八個檢查站,只有獲得全部徽章的人才可以順利通過,進入洞穴,這里的訓練員果然全部都是超強,一定要注意保存體力和pp值,這里要用怪力把石頭推倒白色機關上邊才可以消除阻擋的牆壁,在三樓的一處把石頭推下洞穴,再跳下來用這塊石頭壓住左邊的機關,就可以到達洞口了,出去以後會看到由亂石組成的道路,只能走右邊的那條路才可以到達石英高原的主樓,進入大廳後,選取自己最厲害的隊伍進入挑戰游戲的最終關卡——四大天王和冠軍。
四大天王與冠軍陣容:
KANSU:lv52 白海豹 lv51 鐵甲貝 lv52 胖頓 lv54 紅唇姐 lv54 乘龍
SIPA:lv51 大岩蛇 lv53 艾比郎 lv53 沙瓦郎 lv56 豪力 lv54 大岩蛇
菊子:lv53(這個等級沒有看清楚)耿鬼 lv54 大嘴蝠 lv56 阿柏怪 lv58 耿鬼 lv53 鬼斯通
WATORU:lv56 暴鯉龍 lv54 哈克龍 lv54 哈克龍 lv60 快龍 lv58 化石翼龍
競爭對手(怎麼還來啊?每輸夠):lv59 比雕 lv63 妙蛙花(根據你所選的主獸) lv59 鐵甲犀牛 lv57 胡迪 lv59 暴鯉龍 lv61 風速狗
終於戰勝了最後的強敵,博士前來為你的pm做冠軍ID登陸,競爭對手生氣的跑回家去了,主角成為了新一代的冠軍,故事也算是告一段落了~~ 想和大家說的是,其實自己做攻略也蠻有意思的,不信的話你也來試一試啊~~~休息去了
口袋妖怪火紅劇情攻略 【完】 冷羽原創,僅供CG參考使用
補充:
花田洞穴進入方法
通關後,如果圖鑒種類達到60以上就可以找博士換取386圖鑒。然後,用飛天飛到石英高原發現四天王的挑戰被暫時取消了,因為冰系天王KANSU離開了,去了桔子群島。回到枯葉市港口坐船到1號島嶼,到大型pc大廳內找機器前邊的工作人員對話,得知紅藍寶石被盜。來到原來捕捉火焰鳥的山會發生火箭團劇情,分別打敗兩個人之後就可以進入洞穴,再深層得到紅寶石,把寶石交給工作人員,這時再去港口的時候會發現4-7號島嶼的航線開通了,來到4號島有一個口袋育成屋,在這里可以進行pm的培養和生蛋,方法:1、放一公一母給屋裡的老人,放的pm只要是同生蛋組別就會生蛋2、過一段時間後會看到外邊的那個老人向前走了一步,這時隊伍里空一個位置,和他說話得到蛋,如果想讓兩只pm繼續生蛋或升級就不要急於取出3、帶著蛋步行,走夠一定不熟就會孵化,具體步數由存入的母方種類決定。在4號島嶼的冰洞找到07號秘傳機(逆流而上 攻擊技巧,移動中可以爬上瀑布)後爬上瀑布會看到冰系天王KANSU,幫助他打敗火箭團員後可以繼續向6號島嶼前進了,進入6號島遺跡(門口用居合斬即可進入)後在深層拿到藍寶石,但是寶石被火箭團的研究人員搶走,於是來到5號島,發現原來鎖著的火箭團基地現在可以進入了,經過傳送帶來到研究室,打敗研究人員以後就可以奪回藍寶石了,帶著這顆寶石來到1號島嶼的pc大廳交給工作人員,就可以啟動大型機器了。回到花田市,用乘浪遊至左上的洞穴前,發現原來看門的人已經離開,進入洞穴會遇到很多高等級的pm,沒有訓練員挑戰,在最深層可以捕捉lv70超夢
㈤ 武漢博士德生物工程有限公司的翻譯是:什麼意思
are usually short-lived and are proced in large numbers ringactive fungal growth; and (2) survival spores, which are usually proced insmaller numbers and at a time in the life cycle when the fungus is under somekind of environmental stress.
作為不會移動的異養生物,真菌最終能夠發現營養新資源的。這個過程由孢子來完成,即真菌的生殖體。孢子可能是在氣生菌絲的中心,將孢子釋放到空氣中,依賴物種不同,可能是單倍體也可能是二倍體。有兩種主要的孢子:(1)分散的孢子,通常生命期短,數量大,主要存在於活躍的菌絲生長階段;(2)存活孢子,通常產生很少的數量,在生存壓力條件下的一種生命循環。
㈥ 如何定位一段寡核苷酸在基因組中的位置
應用寡核苷酸探針檢測甘薯基因組中
NB S與 LRR 序列數目
屈滿義 , 查向東 ,王鈺 ,楊金環 , 蔣琳
()230039 安徽大學生命科學學院 安徽省生態工程不生物技術重點實驗室 ,合肥 摘 要 :以含編碼 NB S及 LRR 結構域序列的 PCR 擴增產物作標准對照 ,根據 P2LOO P模體及 LRR 結構域氨基酸 序列設計寡核苷酸探針 ,應用 Sou the rn雜交定量檢測甘薯基因組中 NB S不 LRR 序列的拷貝數目 。結果表明 ,甘薯 基因組中存在多個拷貝的 NB S不 LRR 編碼序列 ,經計算刜步獲得了其在基因組中的拷貝數目 ,為揭示甘薯抗病分
子機制及植物抗病分子育種打下基礎 。
關鍵詞 :甘薯 ; NB S2LRR;寡核苷酸探針 ; Sou the rn雜交
( ) 文章編號 : 1008 - 9632 200902 - 0011 - 04 中圖分類號 : Q94312 文獻標識碼 : A
寡核苷酸探針是指利用 15~50 bp 核苷酸片段制備的 1 材料與方法
探針 ,因序列長度較小 ,寡核苷酸探針常用於檢測小片段 111 植物材料及生化試劑 實驗材料選用甘薯高抗莖線[ 1 ] 的 DNA 。應用寡核苷酸探針進行 Sou the rn 雜交 , 避免 蟲品種 AB94078 21,由徐
了雙鏈 DNA 探針在雜交中自我復性 ,提高了雜交效率丏 州農科所甘薯研究中心 、安徽省農業科學院提供 。限制性[ 2 ] 檢測特異性強 。通過測定基因組 DNA 雜交信號的強 內切酶購自 TaKaR a 公司 ; 瓊脂糖購自 OXO ID 公司 ; D ig
度 R andom L abe ling and D e tec tion Kit,並不標准對照的雜交信號相比較 ,可估算出某個特定 購自博士德公司 ; 尼龍 [ 3 ] 基因的拷貝數 。 膜購自 H ybond公司 。
( ) 植物抗病基因 R gene s具有高度的保守性 , 如編碼112 甘薯總 DNA 的提叏
( 的蛋白質常具有核苷酸結合位點 N uc leo tide b ind ing site, 甘薯基因組 DNA 提叏採用改進的 CTAB 法 。
) () 113 標准對照甘薯 NB S2LRR 類序列的克隆NB S、富含亮氨酸重復序列 L euc ine2rich rep ea ts, LRR 、
( ) 絲氨酸 2蘇氨酸激酶 Se rine 2th reon ine k ina se, STK等結構 11311 引物設計及 PCR 擴增
根據 H e 等克隆的甘薯 NB S2LRR 類抗病基因同源序 域 。NB S及 LRR 類抗病基因是 R 基因中最大的類群 ,其
() ( ) 蛋白產物含一個核苷酸結合位點 NB S和一個富含亮氨 列 GenB ank 登錄號 : DQ903640 的 P2LOO P 和 GL PLA 區 [ 4 ] () 酸重復 LRR 結構域 。有關 NB S2LRR 類序列拷貝數的 序列設計上游引物 P21: GGTGGGGTTGGGAA GACA ,下游
分析 ,目前主要集中在已獲得基因組全序列的植物 ,例如引物 P22: CCACGCTA GTGGCAA TCCTT。以甘薯高抗莖線 [ 5 ] 蟲病品種 Zhou等 収現水稻 NB S2LRR 類序列占整個基因組的 1%AB9407821 基因組 DNA 為模板 , 利用上述引物 [ 6 ] ~2% ,而擬南芥基因組中有 149 條 NB S2LRR 類序列 。 進行 PCR 擴增 ,反應體積為 20uL ,其中包含 1 ×PCR B uff2
甘薯為同源多倍體 ,基因組較大 ,其基因組全序列尚未獲 e r, 2mmo l /L M gC l, dN TP10m mo l /L , 上 、下 游 引 物 各2
μ 3mo l /L ,模板 DNA30 ~50 ng, 115U Taq 酶 ,反應在 Epp en2得 ,復雜的遺傳背景為在分子水平研究甘薯抗病機制帶來 [ 7 ] do rf 5331 型 PCR 儀上進行 。擴增程序為 : 94? 2m in, 1 個 了一定的困難 。本研究應用寡核苷酸探針對甘薯高抗
莖線蟲病品種 AB94078 21 基 因 組 DNA 進 行 Sou the rn 雜 循環 ; 94 ? 40 s, 55 ? 50 s, 72 ? 90 s, 30 個循環 ; 72? 5m in;
4?保存 。交 ,檢測基因組中 NB S及 LRR
㈦ 博士德配件與維修管理系統怎樣備份和恢復數據
打開伺服器端程序 裡面有數據備份選項。備份後復制到新的電腦上安裝同樣版本的資料庫 恢復數據就可以了。 844256300
㈧ 武漢博士德生物工程有限公司怎麼樣
簡介:武漢博士德生物工程有限公司成立於1993年,坐落於武漢關山二路特一號國際企業中心,是一家致力於抗體、免疫檢測系統和ELISA試劑盒等研發和生產的綜合性現代化高科技企業。
法定代表人:夏一方
成立時間:1996-11-19
注冊資本:500萬人民幣
工商注冊號:420100000032153
企業類型:有限責任公司(自然人投資或控股)
公司地址:東湖開發區關山二路特一號國際企業中心3-502號
㈨ 選專業,我想探求生命前沿,請問生命科學屬於哪個專業
只做補充:
生物方面專業四個方向: 生物科學 生物技術 生物工程 生態學
11日,教育部陽光高考網站公布了2010年中國大學「紅黃綠牌」專業名單。「紅牌」專業主要是指失業量較大,就業率持續走低,且薪資較低的專業中綜合考慮的前幾個專業,屬於高失業風險型專業。
被亮「紅牌」的本科專業(10個):動畫、法學、生物技術、生物科學與工程、數學與應用數學、體育教育、生物工程、計算機科學與技術、英語、國際經濟與貿易。
生科,生工,生技都榜上有名。很不幸呀!!!