化學發光分析

『壹』 化學發光分析法的簡介

化學發光與其它發光分析的本質區別是體系產生發光 ( 光輻射 ) 所吸收的能量來源不同。體系產生化學發光，必須具有一個產生可檢信號的光輻射反應和一個可一次提供導致發光現象足夠能量的單獨反應步驟的化學反應。
化學發光Western 雜交檢測，是同位素檢測的一種高度靈敏的替代方法。酶標記抗體取代了放射性標記抗體， 當它作用於底物時，可產生光信號。多數特異抗原檢測方法以辣根過氧化物酶(HRP)或鹼性磷酸酶(AP) 二級抗體 耦聯物為基礎。信號可通過感光膠片或專用的成像設備來採集。化學發光底物用於免疫印跡技術已有十幾年的歷史，大部分實驗室做轉印時都會採用化學發光技術進行檢測。隨著冷CCD化學發光檢測技術的發展，越來越多的實驗室都開始採用冷CCD的凝膠成像系統進行化學發光的檢測，膠片成像雖然比自然發光法靈敏度更高，但也有很多缺點：耗時，需要暗房，顯影劑和膠片，膠片較貴且為需持續購買的消耗品。同時由於膠片的線性范圍較窄，因此用膠片上的條帶（特別是表達量較低的條帶）進行定量幾乎不可能。冷CCD技術與X膠片相比具有瞬時影像處理、高靈敏度和高解析度、動力范圍廣等優點，因此能對條帶進行精確定量。當然這項技術要求底物能產生高強度長持續時間的信號，以保證信號能被冷CCD的凝膠成像系統捕獲。在這方面多家公司都提供了相應的化學發光底物或試劑盒，特別是Bio-Rad Immun-Star™ AP 化學發光試劑盒 、bio-rad Western-C化學發光檢測試劑盒等。Western-C化學發光檢測試劑盒底物可產生高強度的持續光信號24小時，因此用戶可以進行多次曝光，最低可檢測至10-19mol，配合Bio-Rad屢獲大獎的化學發光成像系統ChemiDoc XRS或VersaDoc系統能得到得到高質量的印記信號 。

『貳』 化學發光分析的介紹

簡介利用化學發光進行化學分析的方法。化學反應能產生某種處於電子激發態的產物，當這種產物分子發生輻射躍遷或將能量轉移給其他會發光的分子使該分子再發生輻射躍遷時，便產生發光現象。這種由於吸收了化學能，使分子產生電子激發而發光的現象稱為化學發光。

『叄』 化學發光分析的進展

化學發光分析由於不使用光源，可避免雜散光的影響,但操作要控製得比較嚴格,方能得到准確、再現性好的結果。近幾年來，由於發光檢測技術的改善和電腦技術的飛躍發展，進樣和試劑混合全由微處理機控制以及反應系統全部自動化的化學發光分析儀器的問世，大大提高了分析的速度、靈敏度和准確度。新化學發光試劑的研製，以及化學發光分析和色譜分離技術（見色譜法）的聯用，又進一步擴大了本法的應用范圍。

『肆』 化學發光分析法的化學發光分析系統介紹

在整個的檢測系統中其關鍵的部分為 PMT ，其直接影響到儀器的檢測性能，其最高檢測極限為 10 － 22 mol/L 。不同型號的儀器其檢測技術不一樣，但基本原理都是利用待測組份與體系的化學發光強度呈線性定量關系，而化學發光強度隨體系反應進行的速度增強或衰弱。記錄儀記錄峰形，以峰高定量，也可以峰面積定量。因化學發光多為閃爍式發光 (1—2s 左右 ) ，故進樣與記錄時差短，分析速度快 。

『伍』 化學發光免疫分析原理是什麼

化學發光免疫分析包含兩個部分，即免疫反應系統和化學發光分析系統。化學發光分析系統是利用化學發光物質經催化劑的催化和氧化劑的氧化，形成一個激發態的中間體，當這種激發態中間體回到穩定的基態時，同時發射出光子(hM)，利用發光信號測量儀器測量光量子產額。免疫反應系統是將發光物質(在反應劑激發下生成激發態中間體)直接標記在抗原(化學發光免疫分析)或抗體(免疫化學發光分析)上，或酶作用於發光底物。
化學發光免疫分析根據其所採用的標記物的不同可分為發光物標記、酶標記和元素標記化學發光免疫分析三大類。發光物標記的CLIA是以發光物質代替放射性核素或酶作為標記物(如吖啶酯)，在反應體系中發光物質在鹼性介質中氧化時釋放大量自由能，產生激發態的中問體，該激發態的中間體由最低振動能級回到穩定的基態，各個振動能級產生輻射時，同時產生能量，多餘的能量即為發射光子，從而產生發光現象。利用發光信號的測量儀器，分析接收的光量子產額，通過計算機系統轉換成被測物質的濃度單位。在此系統中包含兩個部分，化學發光反應系統和免疫反應系統，即在抗原一抗體特異性反應過程中，伴隨有化學反應過程而產生光的發射現象。化學反應系統中以化學反應為基礎，化學發光的首要條件是吸收了化學能而處於激發態的分子或原子必須能釋放出光子或者能將能量轉移到另一個物質的分子上並使這種分子激發，當這種分子回到基態時釋放出光子。
化學發光與熒光的根本區別是形成激發態分子的激發能原理不同。熒光是發光物質吸收了激發光後使分子產生發射光；化學發光是化學反應過程中所產生的化學能使分子激發產生的發射光。因此，化學發光反應過程必須產生足夠的激發能是產生發光效應的重要條件。化學發光反應可在氣相、液相或固相反應體系中發生，以液相發光在免疫學檢測中最常應用。

『陸』 化學發光與其它發光分析有什麼區別

化學發光與其它發光分析的本質區別是體系產生發光 ( 光輻射 ) 所吸收的能量來源不專同。體系產生化學發屬光，必須具有一個產生可檢信號的光輻射反應和一個可一次提供導致發光現象足夠能量的單獨反應步驟的化學反應。

『柒』 什麼是化學發光分析方法

化學發光分析測定的物質可以分為三類：第一類物質是化學發光反應中的反應物；第二類物質是化學發光反應中的催化劑、增敏劑或抑制劑；第三類物質是偶合反應中的反應物、催化劑、增敏劑等。這三類物質還可以通過標記方式用來測定其他物質，進一步擴大化學發光分析的應用范圍。

化學發光反應的發光類型通常分為閃光型（flash type）和輝光型（glow type）兩種。閃光型發光時間很短，只有零點幾秒到幾秒。輝光型又稱持續型，發光時間從幾分鍾到幾十分鍾，或幾小時至更久

『捌』 化學發光分析的應用

化學發光分析的靈敏度高，是痕量分析的重要手段之一，在環境監測、臨床分內析、生物化容學等領域里，例如污染物測定、酶分析、免疫測定法和痕量金屬分析等方面得到廣泛的應用。例如，致癌物亞硝胺經熱解後產生亞硝醯自由基NO·，後者與臭氧反應，產生激發態二氧化氮NO壗，最後成為二氧化氮而發光,可用於亞硝胺的檢測,靈敏度達亞ppb級。魯米諾在某些氧化劑存在下的發光反應，可用於測定這些氧化劑；苯巴比妥與過氧化氫的反應為某些過渡金屬及其他一些物質所催化，可用來測定這些起催化作用的物質。又如，用化學發光分析可測定腺嘌呤核苷三磷酸酯(ATP),檢出限為10～10摩爾；許多酶催化的過程以 ATP作為反應物或產物，借測量ATP可測定酶的活性。