『壹』 微生物痰塗片合格標准最先是怎麼制定的
做痰檢能檢查出痰里的細菌(比如結核桿菌),但不會檢查出病毒(因為病毒顆粒太小,普通光學顯微鏡檢測不出來)。
結核病檢查的痰檢一般要三種痰:即時痰,夜間痰,早晨痰,這樣三個痰作成玻片通過抗酸染色後在顯微鏡下查找結核菌。
還有一個查痰的方法就是做痰培養:可根據需要進行需氧菌培養、厭氧菌培養、結核桿菌培養或真菌培養,用於呼吸道感染的病因診斷。痰培養的理論依據是致病菌應高於污染菌,據此,對痰液進行定量培養和辦定量培養。常與葯物敏感試驗一起進行。
『貳』 微生物塗片染色法計數計算方法
測定微生物細胞數目的方法有很多,介紹幾種
1.血細胞計數法
將稀釋的菌液樣品滴在血細胞計數板上,在顯微鏡下計算4~5個中格的細菌數,並求出每個小格所含細菌的平均數,再以此為依據,估算總菌數.
①此法的缺點是不能區分死菌和活菌.
②對壓在小方格界線上的細菌,應當取平均值計數.
③此法可用於測定培養液中酵母菌種群數量的變化
2.稀釋塗布平板法
原理:每個活細菌在適宜的培養基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落.培養基表面生長的一個菌落,來源於樣品稀釋液中的一個活菌.
①這一方法常用來統計樣品中活菌的數目
②統計的菌落數往往比活菌的實際數目低,原因是當兩個活多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落.因此統計結果一般用菌落數而不是用活菌數來表示.
③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細菌、酵母、芽孢與孢子等的數量均可用此法測定.但不適於測定樣品中絲狀體微生物,例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍細菌等的營養體等.
④此法若不培養成菌落,可通過將一定量的菌液均勻地塗布在玻片上的一定面積上,經固定染色後在顯微鏡下計數,這樣又稱塗片計數法.染色可用台盼藍,台盼藍能使死細胞染成藍色,可分別計數死細胞和活細胞.
3.濾膜法
濾膜法是當樣品中菌數很低時,可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器.然後將濾膜乾燥、染色,並經處理使膜透明,再在顯微鏡下計算膜上(或一定面積上)的細菌數.
此法也可以通過培養觀察形成的菌落數來推算樣品中的菌數.例如測定飲用水中大腸桿菌的數目:將已知體積的水過濾後,將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養.在該培養基上大腸桿菌的菌落呈現黑色,可根據培養基上黑色菌落的數目,計算出水樣中大腸桿菌的數目.
此法也是統計樣品中活菌的數目.
4.比濁法
原理是在一定范圍內,菌是懸液中細胞濃度與混濁度成正比,即與光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可藉助與分光光度計,在一定波長下,測定菌懸液的光密度,以光密度表示菌量.實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內,否則不準確.
5.顯微鏡直接計數法
在課本生物選修1生物技術實踐P22中「除了上述活菌計數法外,顯微鏡直接計數也是測定微生物數量的常用方法.」這里說的顯微鏡直接計數,我認為應該是在稀釋塗布的基礎上不培養成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數.再如濾膜法也一樣,可以有兩種情況.
另外,微生物計數法發展迅速,多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法可以用來統計微生物的數目.
『叄』 製作微生物塗片要自然乾燥
說是這么說的,但是實驗中這樣很慢的,其實可以微微加熱的,我們一直都這樣做,沒什麼影響的!!
『肆』 微生物鏡檢塗片步驟
單染色來法,以觀察菌體形態為主。自
1、把泡在酒精中的片子用鑷子夾出,放在酒精燈上點燃,去掉片子上的酒精及油脂。
2、片子冷卻後,蘸一接種環發酵液,均勻地塗在片子上。
3、塗後的片子,於酒精燈火焰上過幾遍,使所塗的細菌固定在片子上,注意,片子溫度不易過高,以不燙手背為主,溫度過高,會使菌變形,影響觀察結果。
4、片子塗菌的位置,滴幾滴結晶紫染液,使染液完全覆蓋住所塗的菌,染1分鍾左右。
5、用水沖洗片子至無紫色水流下後,進行火焰烤乾。
6、鏡下觀察。在塗點處滴1滴香柏油,於油鏡下觀察菌體形態。
『伍』 微生物鏡檢塗片步驟
塗片是將微生物培養物塗在載波片上,用來觀察死的微生物。微生物版剛放到波片上是活權的,但經過固定步驟就將其殺死了。如果塗片太厚,就難以觀察單個細胞,如果太薄,就可能找不到微生物。如果將塗片時攪動太厲害,又會破壞原來細胞的排布。塗片後應使其完全風干。然後將其快速通過火焰3~4次,這個過程成為熱固定。若固定主要目的有三個:1.殺滅微生物,2.使微生物黏附在載波片上,3.使菌體跟容易染色。如果載波片還沒在完全風乾的時候將其在火焰上移動,菌體就會煮沸二被破壞。如果熱固定不夠,菌體就無法粘在載波片上,在後續步驟中容易被沖洗掉。
『陸』 微生物塗片實驗時,用嘴吹氣為什麼沒有雜菌的污染!
塗片都是在空氣中進行的,嘴吹的氣菌總數不多,相對你載玻片上的菌數來說可完全忽略不計,故沒什麼影響。個人意見。
『柒』 醫學檢驗微生物室細菌塗片的制備及常用染色法
用的最多的有,抗酸萋尼氏染色,抗酸熒光,革蘭氏染色,六鞍銀染色等。現在都有商品化試劑,不需自製。
『捌』 微生物製片時是不是都要進行塗片
一般是的,有的標本還需要進行組織固定,用福爾馬林固定效果更好,再進行塗片、切片,有需要請惠存http://www.jnbo.com/rencai.html
『玖』 在進行微生物製片時是否都需要進行塗片為什麼
塗片是將微生物均勻分散開,微生物個體微小數量多,許多物種經常成團生長,不利於觀察,塗片可以將微生物分散成單層,利於鏡檢.