從土壤中分離微生物

1. 怎樣從土壤中篩選微生物

原理： 目前尚無一種培養基可以養出所有的微生物，但我們可以設計一種培養基，其組成份適合所要分離的微生物，而不利其他微生物的生長，如此一來，即使我們想分離的微生物為數不多，也可以將它們分離出來，這就是選擇性培養基。本實驗就是使用選擇性培養基來分離土壤微生物，並計數它們的數量以及觀察在不同的選擇性培養基下，菌落型態的差異。

材料：分離細菌之培養基：TSA（Tryptic Soy Agar）、1/10 TSA 並分別添加100 ppm cycloheximide；分離放線菌之培養基：Alkaline Water Agar、Starch-Casein Agar並分別添加100 ppm cycloheximide；分離真菌之培養基：PDA（Potato Dextrose Agar）添加Triton X-100 (1 mg per mL)及100 ppm streptomycin sulfate、MRB（Martin』s Rose Bengal）再加入30 ppm streptomycin sulfate； (cycloheximide為抑制真核細胞蛋白質合成之抗生素，請小心使用)、9毫升0.85%生理食鹽水、玻璃彎棒、酒精燈、少許農地表土。

步驟：
1. 配製選擇性培養基。
2. 秤過篩農土 1克置入9毫升生理食鹽水中，充分震湯混合，接著作10倍連續稀釋至適當的稀釋度。
3. 取0.1毫升稀釋液塗抹於不同的選擇性培養基平板上。分離細菌取104、105及106倍稀釋之稀釋液；分離放線菌取103、104及105倍稀釋之稀釋液；分離真菌則取102、103及104倍稀釋之稀釋液。
4. 塗抹過稀釋液之平板置於28℃培養箱中培養，按時觀察並記錄菌數、菌落型態、真菌孢子的顏色等。
5. 另外，秤10克濕土置入玻璃燒杯中，於105℃下烘乾至恆重，將燒杯連烘乾後的土放入乾燥器中，冷卻至室溫後秤重，即可知每克濕土的乾重。將平板上的菌數除以乾重，就可以知道每克乾重土壤的菌數。
6. 以t-test 做統計比較，細菌在相同養分但不同濃度下(TSA、1/10TSA)的數目有無差異；另外由分離放線菌的平板，純化 5個菌落型態不同之菌株，同時保留由真菌平板上所篩得的綠黴菌（Trichoderma spp.），作為下次實驗的材料。

2. 如何從復雜的土壤樣本中分離我們所需要的目標微生物

如何從復雜的土壤樣本中分離我們所需要的目標微生物？
有機肥之中有機質的分解轉化是一個復雜的過程，微生物活動在分解轉化過程之中起著重要作用。土壤環境非常適合微生物活動，所以土壤之中天然微生物數量最多。因為土壤之中微生物種類繁多，數量大；一克土壤之中，微生物有幾十種到幾百種，幾億到幾十億個，土壤微生物繁殖迅速，在有機質的轉化和分解之中起著重要作用。土壤微生物包括細菌、放線菌、真菌和藻類。

（1）細菌



細菌是一種單細胞微生物，是土壤之中分布最廣、數量最多的微生物。細菌有三種基本形態：球形、桿狀和螺旋形；有球菌、桿菌和螺旋體（40種）；包括弧菌&41；三種類型。土壤細菌按其營養類型可分為自養菌、兼性自養菌和異養菌。

（2） 真菌



土壤真菌分布廣泛，適應廣泛的酸性條件，在PH4.0條件之下生長良好，對森林土壤有機質的轉化起著重要作用。土壤真菌是異養的。它們必須從土壤有機質之中獲取能量和碳源，並在發育過程之中需要良好的供氧。根據真菌與樹木的關系及其營養類型，真菌可分為腐生真菌、寄生真菌和共生真菌。

（3） 放線菌



放線菌是細長的菌絲體，呈分枝狀或放射狀。它們在土壤之中僅次於細菌。大多數是腐生植物。許多放線菌能分解纖維素、澱粉、脂肪、木質素和蛋白質。

3. 如何從土壤中分離純化某種微生物

先取土樣，然後提純稀釋，放在選擇培養基上。例如分離純化能分解纖維素的微生物，就放在以纖維素為唯一碳源的培養基上。能存活的就是你要的了。

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4. 從土壤中分離微生物稀釋多少倍就可以了

這個不一定，因為不同環境和條件下的土壤中微生物的種類和數量也不同，不能一概而論。
一般是作多個不同稀釋度的稀釋液，如從100倍到10萬倍，分別進行平板劃線培養，每個稀釋度至少做三個平行。總會有一到兩個稀釋度的平板上有合適的菌落。
如果在100倍稀釋度的平板上也沒有或基本沒有菌落，那就再降低稀釋倍數，甚至要先用全營養液體培養基進行富集培養，然後再稀釋分離。

5. 如何從土壤中分離得到一個微生物的純培養體

首先你需要確定你分離的是什麼微生物，然後按照以下步驟
1.
選擇合適的富集培養基，加入土壤把目標菌屬富集
2.
選擇合適的選擇性培養基把目標菌屬分離出來。
3.
通過稀釋平板塗布，培養三天後，觀察不同的菌落，在平板反面用記號筆編號不同的菌落。
4.
把標記的菌落在培養基上劃線分離，每一個編號劃線三個平板
5.
待平板長出單菌落後，顯微鏡鏡檢，觀察目標菌是否單一。
單一菌落即為微生物的純培養體。

6. 從土壤中能分離出哪些微生物

生活在土壤中的微生物。一般包括細菌、放線菌、真菌、藻類、原生動物、病毒及類病毒。

7. 如何從污水（或土壤）中提取微生物

把污水加蒸餾水分別稀釋10，100，1000倍，然後加入培養基中培養，如果培養出來菌落重合，菌非常多，無法分離，就加大稀釋倍數，直至獲得清晰可分離的菌落，有時甚至是非常小的菌落，要用倒置顯微鏡操作。而培養基則根據要分離的菌的營養類型進行配置，若要獲得多種微生物就要配置多種培養基進行如上操作。對於土壤加水溶解，對溶解液進行如上操作，不溶的部分就不用管了

8. 《微生物問題》如何從土壤中分離微生物(黴菌，細菌，放線菌等)

1.取以少許土壤(一地表以下10cm處為宜)與適量無菌水混勻備用
2.做浸出液的梯度稀釋
3
.塗平板
4.劃線分離
5.接平板，接斜面
6.檢測

9. 從土壤中分離與食品工業有關的微生物的過程

從土壤中分離微生物的過程，實際就是利用不同選擇培養基逐步篩選微生物的過程，具體怎麼設計培養基，是根據你最終的目的來決定的。

10. 怎樣分離土壤中的細菌

這個工作量很大
首先是將土壤用生理鹽水洗，再用低轉速離心，取上層液體
然後要明確你需要的菌種，設計或查找培養基，並配好後面滅菌
菌液稀釋到一定比例後塗布或者劃線到鋪有培養基的平板上，或者以一定比例接入液體培養基。用什麼形式的培養基取決於你需要分離的菌
放置與培養箱中培養若干小時
以上為初篩，下面需要進一步復篩，
挑出你需要的菌落，再改進培養基，重復以上步驟
直到完全篩選出目的菌落

以上為自己想出的方案，本人正好是微生物專業，個人認為，動手之前的准備工作要做好，注意多查文獻，多了解目的菌種的特點，採用最快捷的方法

祝你成功