化學感受態

Ⅰ DH5α感受態細胞 哪位用過哪家的好一些啊

博凌科為生產的DH5а感受態細胞是採用大腸桿菌DH5а菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞，可用於DNA 的化學轉化。使用pUC19 質粒檢測，轉化效率可達108 ，－70 ℃ 保存幾個月轉化效率不發生改變。每支感受態可以酌情分裝使用，降低了實驗的成本。質量穩定，使用方便，質優價廉。儲存的條件：-70 ℃ 保存，避免反復凍融。我們用了很久了，對於實驗室來說還是比較容易儲存的，也很方便。

Ⅱ 電擊法制備感受態細胞的方法與化學法的不同點是什麼

受體細胞經過一些特殊方法（如：電擊法，CaCl2等化學試劑法）處理後，使細胞膜的通透性發生變化，成為能容許外源DNA分子通過的感受態細胞。進入細胞的DNA分子通過復制、表達實現遺傳信息的轉移，使受體細胞出現新的遺傳性狀。

大腸桿菌的轉化常用化學法（CaCl2法），該法最先是由Cohen於1972年發現的。其原理是細菌處於0℃，CaCl2的低滲溶液中，菌細胞膨脹成球形，轉化混合物中的DNA形成抗DNase的羥基-鈣磷酸復合物粘附於細胞表面，經42℃短時間熱沖擊處理，促使細胞吸收DNA復合物，在豐富培養基上生長數小時後，球狀細胞復原並分裂增值，被轉化的細菌中，重組子中基因得到表達，在選擇性培養基平板上，可選出所需的轉化子。

Ca2+處理的感受態細胞，其轉化率一般能達到5×106~2×107轉化子/ug質粒DNA，可以滿足一般的基因克隆試驗。如在Ca2+的基礎上，聯合其它的二價金屬離子（如Mn2+、Co2+）、DMSO或還原劑等物質處理細菌，則可使轉化率提高100~1000倍。

化學法簡單、快速、穩定、重復性好，菌株適用范圍廣，感受態細菌可以在-70℃保存，因此被廣泛用於外源基因的轉化。

除化學法轉化細菌外，還有電擊轉化法，電擊法不需要預先誘導細菌的感受態，依靠短暫的電擊，促使DNA進入細菌，轉化率最高能達到109~1010轉化子/ug閉環DNA。因操作簡便，愈來愈為人們所接受。

Ⅲ 感受態細胞（細菌），什麼是感受態細胞

野生型E.coli並不容易轉化，這是由於細菌產生一種酶能迅速降解進入的外源DNA。經過多年的努力，科學家們發現了一種方法可以增加細胞吸收外源DNA的效率。那就是用化學方法處理細胞，使其改變膜對DNA的通透性。這種細胞就稱為感受態細胞，即細胞處於能攝入核酸分子時的生理狀態。這種方法已經成為基因工程的常規技術，它對於我們利用體外DNA重組技術來了解真核和原核生物的基因功能特別重要。細菌的轉化有兩種類型：一種是自然轉化（natural transformation），在自然轉化中細菌可以自由地吸收DNA，通過它來進行遺傳轉化；另一種是工程轉化（engineered transformation），在這種轉化中，細菌發生改變使得它們能攝入並轉化外源DNA。枯草桿菌中的轉化屬於自然轉化，E.coli轉化就屬於工程轉化。

Ⅳ 如何製作轉化效率高的BJ5183化學感受態

DH5α F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rk- mk), λ– 1. An Hoffman-Berling 1100 strain derivative (Meselson68) 2. nalidixic acid resistant _________________________________。

Ⅳ 什麼是感受態

是指一種容易接受外源DNA的狀態。在轉基因的過程中，一般會把待轉化的宿主細胞處理成為感受態，以提高轉化的效率。

Ⅵ 將目的基因導入大腸桿菌常用什麼處理細胞,使其成為感受態

Ca ²⁺ 處理法能使大腸桿菌細胞的生理狀態發生改變，使之成為易於吸收周圍環境中DNA分子的感受態，故將目的基因導入大腸桿菌，應採用感受態細胞法，即用氯化鈣處理大腸桿菌，使其成為感受態細胞．
故選：C．

Ⅶ 博凌科為的JM109感受態細胞能否用於DNA 的化學轉化，效果好不好

可以的，而且效果很不錯，我們實驗時用了，確實是很好。博凌科為生產的JM109感受態細胞是採用大腸桿菌JM109菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞，可用於DNA
的化學轉化。使用pUC19
質粒檢測，轉化效率可達108
，－70
℃
保存幾個月轉化效率不發生改變。每支感受態可以酌情分裝使用，降低了實驗的成本。質量穩定，使用方便，質優價廉。

Ⅷ 制備高效率感受態的方法是什麼

樓主你好： 液氮或低溫冰箱中取出的大腸桿菌*E.COLI DH5, JM109,HB101等,在LB平板上劃線,37度過夜至長出單菌落.挑直徑1-3毫米的單菌落*可多個, 接種到250毫升/3升錐形瓶 或80毫升/1升錐形瓶的SOB培養基. 培養基量不可再多,會影響效率.在18度 150-250RPM 培養19-50小時*沒有冷卻搖床的可在室溫, 但不可高於37度.OD600約0.4-0.8時停止培養, 放在冰水中冷卻10分鍾4度, 300RPM離心15分鍾, 更多質量檢測、分析測試、化學計量、標准物質相關技術資料請參考國家標准物質中檢所網站，進口標准物質請參考 http://www.rmhot.com/plist_5/plist_5_20_0_1.html 。 回收菌體去掉上清後, 用1/3體積的冰冷TB溶液懸浮, 在冷10分鍾再次離心回收菌體用1/12.5體積的TB懸浮, 添加最終濃度為7%的DMSO, 再冷卻10分鍾0.1-1毫升分裝, 直接在液氮中凍上.在液氮或-80度保存.TB溶液*TRANSFORMATION BUFFERPIPES 3.0G 10mMCaCl2.2H2O 2.2g 15mMKCl 18.6g 250mMadd water up to 950ml用 5N KOH 調PH至6.7-6.8*低PH不溶在加終濃度未55mM的MnCl2.4H2O 10.9g定溶到1升, 過濾滅菌, 4度保存.但有人提出, 凍存後轉化效率降低, 且這種方法不適合大質粒.【zihudie】 （1）將置於液氮保存的大腸桿菌劃線在LB平板上，37℃培養活化。 （2）挑取經活化的大腸桿菌單菌落於SOC液體培養基，18℃，200-250rpm培養。 （3）當OD600=0.5-0.8時，用預冷的40mL離心管於4℃，8000rpm離心10min，收集菌體。 （4）用預冷的TB Buffer重懸菌體，4℃，8000rpm離心10min，收集菌體。 （5）重復第4步操作。 （6）用8mL預冷的TB Buffer重懸菌體，緩慢加入DMSO至終濃度7% 。 （7）冰浴10min後，分裝保存於液氮中。本法效率極高,建議大家採納【yog】1. 單菌落-------2ml LB 37度 120RPM過夜------1%轉接-------37度 200RPM2小時(OD到0.4~0.5)2. 2ml, 冰浴15min, 4度, 6000RPM 5min, 棄上清, 懸浮於1ml0.1MCaCl2中, 冰浴20min3. 4度, 6000RPM 10min, 重懸浮於200ul 0.1MCaCl2中, 冰浴30min建議用TSS法，簡單方便，比氯化鈣法的轉化效率高.別的菌可能不一定適用。 以下為轉貼，具體方法請最好查閱文獻。E.coli感受態細胞制備方法:單菌落平板至2ml LB, 37 oC 250 r/m ovn, 1ml 轉至50 ml LB, 37oC 250 r/m至 A600=0.2-0.4離心後用10毫升TSS重懸後,分裝 -70oC保存。盡量冰上操作.轉化: 加質粒(<5 ul/100ul cell) 後冰上30分鍾，42oC 90秒，冰上2分鍾，加LB至1ml, 37oC 1小時後鋪抗生素平板。
求採納